Государственная система санитарно-эпидемиологического нормирования _Российской Федерации____
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды
Сборник методических указаний МУК 4.1.1437—4.1.1448—03, МУК 4.1.1453—4.1.1460—03, МУК 4.1.1467—03
Выпуск 4
Издание официальное
Москва • 2007
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды
Сборник методических указаний МУК 4.1.1437—4.1.1448—03, МУК 4.1.1453—4.1.1460—03, МУК 4.1.1467—03
Выпуск 4
2.6.2 Очистка экстракта
Водный остаток экстракта семян (из п.2.6.1.1) переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 5 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 20 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 1 минуты и после се разделения отделяют органическую фазу. Водную фазу экстрагируют повторно 20 мл гексана. Объединенную органическую фазу высушивают над безводным сульфатом натрия и упаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30°С.
Остаток экстракта масла (из п.2.6.1.2) переносят 10 мл смеси ацетонитрил-вода (1:1, по объему) в делительную воронку емкостью 100 мл и метазахлор трижды экстрагируют гексаном порциями по 50 мл при встряхивании. Объединенный гексановый экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30°С.
2.6.3 Очистка на колонке с силикагелем
Сухой остаток семян или масла (из п. 2.6.2) количественно перенося, тремя 1-мл порциями элюента N 1 (смесь гексан-этилацетат, 90:10, по объему) в подготовленную хроматографическую колонку (п. 2.5.5).
Промывают колонку 50 мл элюента N 1, которые отбрасывают. Метазахлор элюируют 30 мл элюента N 2 (смесь гексан-этилацетат, 80:20, по объму), отбрасывая первые 8 мл и собирая последующие 22 мл в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30°С. Сухой остаток экстракта семян или масла растворяют в 1 мл гексана и анализируют на содержание метазахлора по п. 2.7.
ПРИМЕЧАНИЕ: При использовании новой партии сорбента или растворителей проводится проверка хроматографического поведения метазахлора на колонке с силикагелем.
2.7 Условия хроматографирования
Газовый хроматограф ”Цвег>$б01' с детектором постоянной скорости рекомбинации с пределом детектирования по линдану не выше 1,6x10 м г/куб.см.
Показания электрометра -2x10*
Скорость движения ленты самописца - 20 см/час
Колонка стеклянная, спиральная 1800x2 мм; неподвижная фаза -3% SE-52 на Supelcoport (80-100 меш)
Температура испарителя - 260°С, термостата колонки - 200°С, детектора -300°С
Скорость потока газа-носителя (азот) - 30 мл/мин
Объем вводимой пробы - 2 мкл
Время удерживания метазахлора - 2 мин. 30 сек.
Предел детектирования - 0,2 нг .
Линейный диапазон детектирования - 0,2-2 нг
Альтернативная фаза: 5% SE-30 на Инертоне N-AW-DMCS (0,125-0,16 мм); колонка стеклянная 1800x2 мм; температура термостата колонки - 210°С Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1 мкг/мл, разбавляют гексаном.
2.8 Обработка результатов анализа
Содержание метазахлора рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
Ht х Ах V
Х =-, где
Н0хш
X - содержание метазахлора в пробе, мг/кг;
Н| - высота пика образца, мм;
Но - высота пика стандарта, мм;
А - концентрация стандартного раствора метазахлора, мкг/мл;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; ш - масса анализируемой части образца (г) /для семян - 5 г, для масла - 2,5 г/.
3. ТРЕБОВАНИЯ ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.
4. Разработчики
Дубовая Л.В., науч. сотр.; Назарова Т.А., науч. сотр.;
Микипок О.Д., ст. науч. сотр.; Макеев А.М., зав. лаб.
ВНИИ фитопатологии, 143050 Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел, 592-92-86
(ЫЬ Л',!гг~ ^
Подпись руки Л.В.Дубовой, Т.Н.Назаровой, О.Д.Микитю А. М.Максева заверяю
Зав. канцелярией ВНИЙф /• \\\
(ЭльцбергЕ.РШ
Л о л
ББК 51.21 0 37
О 37 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний. Вып. 4—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007.—254 с.
Настоящий сборник содержит копии оригиналов методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды.
1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгнлевич); при участии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.П. Весе лов). Разработчики методов указаны в каждом из них.
2. Методические указания рекомеидовваны к утверждению Комиссией по государственному сани гарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. Введены впервые.
ББК 51.21
Формат 60x88/16 Печ.л.16,0
Тираж 150 экз.
Тиражировано отделом информационно-издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Рослотреб надзора
© Роспотребнадзор, 2007 © Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007
Содержание
Определение остаточных количеств тритосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1437—03..................................................................................4
Определение остаточных количеств трифлуралина в зеленой массе и зерне зерновых культур, в семенах и масле подсолнечника, сои и рапса методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1438—03,.................................. ........................................................................20
Определение остаточных количеств фснпироксимата и его метаболитов в воде, почве, винограде и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:
МУК 4.1.1439—03............................... 30
Измерение концентрации фенпироксимата в воздухе рабочей зоны методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1440—03 ................................. 43
Измерение концентраций флумстсулама и флорасулама в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1441—03............................50
Определение остаточных количеств флуметсулама и флорасулама в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1442—03................................................................................59
Определение остаточных количеств флуазифоп-П-бутил по флуазифоп-П в воде, зеленой массе растений, клубнях картофеля, зерне гороха, семенах и масле сои,
подсолнечника, рапса, льна методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1443—03..................77
Определение остаточных количеств флутриафола в воде, почве, зеленой массе, зерне и соломе зерновых колосовых культур, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, винограде и
яблоках методом капиллярной газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1444—03.....................99
Определение остаточных количеств хлороталонила в зерне и соломе зерновых колосовых культур, винограде, яблоках, хлороталонила и его метаболита - SDS 3701
(R 182281) методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1445—03......................................113
Определение остаточных количеств эсфенвалерата в воде водоемов, почве, яблоках, клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом
газожидкостной хромаго1рафии: МУК 4.1.1446—03...................................................... — 128
Измерение концентраций карбосульфана в воздухе рабочей зоны методом
газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1447—03 .................................................................. 139
Определение остаточных количеств диниконазола в семенах и масле подсолнечника
методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1448—03................................................... 146
Измерение концентраций дикамбы в воздухе рабочей зоны газожидкостной и
тонкослойной хроматографией: МУК 4.1.1453—03.........................................................................153
Определению остаточных количеств имазамокса в воде, почве, зерне и масле сои
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1454—03..........................164
Определение остаточных количеств клефоксидима в воде, почве, зерне и соломе
риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1455—03.................. 176
Определение остаточных количеств кломазона в воде, почве, зерне, соломе риса,
семенах и масле сои хроматографическими методами: МУК 4.1.1456—03..................................187
Определение остаточных количеств крезоксим-метила в воде, почве, яблоках и его
метаболита крезоксима в воде и почве газохроматографическим методом: МУК 4.1.1457—03......203
Определение остаточных количеств метазахлора в семенах и масле горчицы и рапса га-
зохроматографичсским методом: МУК 4.1 1458—03......................................................................215
Определение остатков пирипроксифена в воде, почве и яблоках методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1459—03..........................................223
Определение остаточных количеств тепралоксидима в воде, почве, сахарной свекле и
сое методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1460—03..„.............................................233
Определение остаточных количеств бромуконазола в воде, почве, зерне и зеленой массе зерновых колосовых культур, ягодах черной смородины и винограда методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1467—03........................ 245
3
УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
ртра здравоохранения Федерации
УтЬМ,Г Г ОНИЩЕНКО
^ (I \ МУК 4.1. /*Г/- *3
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ МЕТАЗАХЛОРА В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ГОРЧИЦЫ И РАПСА ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
1. ВВОДНАЯ ЧАСТЬ Фирма производитель: БАСФ (Германия)
Торговое название: БУТИЗАН Действующее вещество: мстазахлор
2-хлор-ЫЧпиразолП -илмст1щ)ацст-2\6,-ксилидид (ИЮПАК) 2-хлор-ЫЧ2,6-димстилфенил)-Ы-( 1 Н-ииразол-1 -илметил )ацетамид (С. А.)
Эмпирическая формула: CmH^CINjO Молекулярная масса: 277,8
Желтоватое кристаллическое вещество без запаха Температура плавления: 85°С Давление паров при 20°С: 0,093 шРа Коэффициент распределения н-октанол/вода:Кочг log Р = 2,13
Растворимость (г/л) при 20°С: ацетон и хлороформ - более 1000, эти л ацетат - 590,
этанол - 200, вода - 0,43.
Стабильно в течение по крайней мерс 2 лет хранения при 40° С.
В биологически активных почвах в аэробных условиях мстазахлор бысгро разрушаема: DT50 - i-23 дна.
Uf
Краткая токсикологическая характеристика:
Острая пероральная токсичность (LD$o) Для крыс - 2150 мг/кг, острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - более 6810 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LCjo) Для крыс - более 34,5 мг/л воздуха. LC50 для рыб 4-15 мг/л (96 час).
Метазахлор нетоксичен для пчел, птиц и диких животных.
Гигиенические регламенты применения метазахлора: ОДК в почве- 0,1 мг/кг, ПДК в воде водоемов - 0,002 мг/куб.дм; ПДК в воздухе рабочей зоны -
1,0 мг/куб.м; МДУ в капусте - 0,02 мг/кг.
Область применения препарата:
Метазахлор - системный гербицид, поглощается корнями и гипокотилями растений и подавляет прорастание семян. Применяется для борьбы с однолетними злаковыми и широколистными сорняками, в г.ч. подмаренником цепким, в посевах сои, рапса, картофеля, табака, подсолнечника, капустных культур, лука, чеснока, горчицы, табака при норме расхода 1,0-1,5 кг д.вУга путем довсходового внесения.
Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Бутизан 400 КС (400 г метазахлора в 1 л препарата) в качестве средства борьбы с сорняками на посевах горчицы и рапса с нормой расхода препарата не более 2,5 л/га (по д.в. не более 1,0 кг/га) и однократной довсходовой обработкой за сезон.
2. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТАЗАХЛОРА В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ГОРЧИЦЫ И РАПСА ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
2.1 Основные положения
2.1.1 Принцип методики
Методика основана на газохроматографическом определении метазахлора с ДПР на неподвижной фазе SE-52 после экстракции его из семян горчицы и рапса водным ацетоном, из масла ацетонитрилом, очистки эксгракта перераспределением в системе нссмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем.
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2 Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания горчицыи рапса.
2.1.3 Метрологическая характеристика метода
Метрологические параметры метода
|
Таблица 1
Анализи- Метрологические параметры, Р в 0,95, п * 20 |
|
руемый |
Предел |
Диапазон |
Среднее |
Стандарт- |
Относит. |
Доверитель- |
|
объект |
обнару- |
определя- |
значение |
нос стою |
стандарт |
.ный интер- |
|
|
жения. |
смых кон- |
опреде- |
некие, S |
отклон. |
вал сред- |
|
|
мг/кг |
центраций |
ления. |
% |
DS, % |
него, % |
|
|
|
мг/кг |
% |
|
|
|
|
|
Семена |
0,02 |
0,02-0,20 |
84,0 |
4,2 |
1,9 |
84,0 + 4,0 |
|
Масло |
0,04 |
0,04-0,40 |
83,2 |
3,9 |
1,7 |
83,2 ± 3,6 |
|
|
Таблица 2 |
Полнота определения метазахлора в модельных матрицах ( п * 5 )
Матрица Внесено метазахлора. Открыто метазахлора. Доверительный ин-мг/кг % тервал среднего
результата, %
|
|
0,02 |
80,6 |
+/-2,3 |
|
|
0,04 |
84,0 |
+/- 3,3 |
|
Семена |
0,10 |
85,1 |
+/- 3,9 |
|
|
0,20 |
86,1 |
+/- 1,9 |
|
|
0,04 |
81,6 |
+/- 5,2 |
|
|
0,08 |
84,4 |
+/- 5,7 |
|
Масло |
0,20 |
81,9 |
+/-2,5 |
|
|
0,40 |
85,1 |
+/-1,6 |
Метазахлор с содержанием д.в. 99,5% (БАСФ, Германия)
Ацетон, чда, ГОСТ 2603-79 Ацетонитрил, ч., ТУ 6-09-3534-82 Вода бидистиллированиая, ГОСТ 7602-72 Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78
Натрий сернокислый, безводный, хч., ГОСТ 4166-76 Натрий хлористый, хч., ГОСТ 4233-77 Этилацетат, ГОСТ 22300-76
ЭлюентИ 1 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этилацетат, 90:10, по объему
ЭлюентН 2 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этилацетат, 80:20, по объему
Силикагель для адсорбционной хроматографии (Всльм, Германия) I степени активности или силикагель КСК (60-100 меш)
Стекловата
Фильтры бумажные, синяя лента, ТУ 6-09-1678 Целит 535 (2-15 мкм) /Серва, Германия/ или аналогичный
2.3 Приборы, аппаратура, посуда Хроматограф газовый "Цвет-560" с детектором постоянной скорости рекомбинации или другой аналогичного типа
Колонка хроматографическая, стеклянная, 1800x2 мм, неподвижная фаза -3% SE-52 на Supelcoport (80-100 меш)
Колонка хроматографическая, стеклянная, 1800x2 мм, неподвижная фаза - 5% SE-30 на Инертоне N-AW-DMCS (0,125-0,16 мм)
Шприц для ввода образцов в газовый хроматограф Весы аналитические типа ВЛР-200, ГОСТ 19401-74 Водоструйный насос, ГОСТ 10696-75 Встрягхиватслъ механический, ТУ 64-1-1081-73 Гомогенизатор, МРТУ 42-1505-63 Прибор для перегонки при атмосферном давлении Ротационный испаритель тип ИР-1М, ТУ 25-11-917-76 Баня водяная, ТУ 46-22-603-75 Воронка Бюхнера, ГОСТ 0147-73
Воронки делительные вместимостью 250 мл, ГОСТ 25336-82 Воронки для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613-75 Колба Бунзена, ГОСТ 5614-75
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 9737-70
Колбы конические с притертыми пробками вместимостью 250 мл, ГОС!'
2<t
25336-82
Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74
Колбы грушевидные вместимостью 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82
Пипетки мерные вместимостью 1,2, 5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74Е
Пробирки градуированные с притертыми пробками вместимостью 5 мл, ГОСТ
10515-75
Цилиндры мерные вместимостью 50, 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 1770-74
2.4 Отбор проб
Отбор проб производится соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" ( N 2051-79 от 21.08.79 г.). Семена и масло горчицы и рапса хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодной комнате при температуре 4°С. Перед анализом семена измельчают на лабораторной мельнице.
2.5 Подготовка к определению
2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей
Органические растворители перед началом работы сушат над хлористым
кальцием и перегоняют в соответствии с типовыми методиками.
2.5.2 Подготовка и кондиционирование колонки
Готовую насадку (3% SE-52 на Supelcoport или 5% SE-30 на Инертоне N-AW-DMCS) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250°С в течение 8-10 часов.
2.5.3 Приготовление стандартных растворов
Основной стандартный раствор метазахлора с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,5%д.в., в гексане в мерной колбе на 100 мл. Рабочие стандартные растворы с концентрациям* 0,1 , 0,2 , 0,5 и 1,0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора метазахлора соответствующим последовательным разбавлением гексаном. Вес растворы хранят в холодильнике не более одного месяца.
2.5.4 Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочего стандартного раствора метазахлора с концентрацией 0,1 , 0,2 , 0,5 и 1,0 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерении и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты
хроматографического пика в мм от концентрации метазахлора в растворе мкг/мл.
2.5.5 Подготовка колонки с силикагелем
В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1,8 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают около 10 мл гексана. Затем в колонку вносят суспензию 5 г силикагеля в 20 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнегокрая сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 30 мл смеси гексан- этилацетат (90:10, по объему) со скоростью 1-2 капли в секунду, после чего она готова к работе.
2.6 Описание определения
2.6.1 Экстракция метазахлора
2.6.1.1 Семена. К навеске (10 г) размолотых семян горчицы или рапса приливают 100 мл 50%-ного водного ацетона и суспензию перемешивают в течение 30 минут на аппарате для встряхивания. Добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 250 мл. Растительный остаток повторно экстрагируют 50 мл 50%-ного ацетона при встряхивании в течение 20 минут, и суспензию фильтруют. Из объединенного водно-ацетонового экстракта отбирают аликвоту раствора, эквивалентную 5 г растительного материала, и упаривают се до водной фазы (до объема 25-30 мл) на роторном испарителе при температуре 40°С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пп. 2.6.2 и 2.6.3.
2.6.1.2 Масло. Навеску (5 г) масла помещают в коническую колбу емкостью 100 мл, приливают 50 мл ацетонитрила и эмульсию энергично перемешивают в течение 1 часа на аппарате для встряхивания. Эмульсию центрифугируют 15 минут при 12000 g и отделяют ацетонитрильную фазу. Масло еще дважды экстрагируют ацетонитрилом (50+25мл) , отделяя каждый раз ацетонитрильную фазу после центрифугирования эмульсии. Из объединенного ацетонитрильного экстракта отбирают аликвоту раствора , эквивалентную 2,5 г масла, и упаривают се досуха на роторном испарителе при температуре 30°С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пп. 2.6.2 и 2.6.3.
220
