Государственная система санитарно-эпидемиологического нормирования _Российской    Федерации____

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний МУК 4.1.1437—4.1.1448—03, МУК 4.1.1453—4.1.1460—03, МУК 4.1.1467—03

Выпуск 4

Издание официальное

Москва • 2007

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний МУК 4.1.1437—4.1.1448—03, МУК 4.1.1453—4.1.1460—03, МУК 4.1.1467—03

Выпуск 4

2.3.1.3.    Метод очистки хлористого метилена

Хлористый метилен последовательно промывают: концентрированной серной кислотой, водой, 2%-м водным раствором гидроксида иатрия и снова водой. Осушают карбонатом калия и перешил ю г.

2.3.1.4.    Метод очистки меганола

К 1 л метанола добавляют 5 г стружек магния, кипятят 2-3 часа с обратным холодильником, после чего перегоняют.

2.3.1.5.1.    Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ с обращенной фазой. Бидистиллят получают с помощью лабораторного бидистиллятора. Для получения

подвижной фазы (ВЭЖХ) 750 мл ацетонитрила смешивают с 250 мл бидистиллята (800 мл и 200 мл для “Милихрома”). Полученную фазу тщательно дегазируют путем продувки гелием или вакуумированием в течение 10 мин (до окончания вскипания при встряхивании).

2.3.1.5.2.    Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ с нормальной фазой (почва).

Для получения подвижной фазы к 700 мл очищенного гексана прибавляют 297 мл

очищенного хлористого метилена и 3 мл очищенного метанола, тщательно перемешивают и дегазируют путем продувки гелием или вакуумированием до прекращения вскипания при встряхивании.

2.3.1.6. Приготовление подвижной фазы для колоночной хроматографии Для колоночной хроматографии 500 мл хлороформа смешивают с 500 мл гексана, тщательно перемешивают (колонка №1). Для колонки № 2 готовят две подвижные фазы:

1)    450 мл гексана смешивают с 50 мл этил ацетата (фаза№ 1 - гексан/эгилацстат (9:1));

2)    60 мл гексана смешивают с 40 мл этилацетата (фаза№ 2- гексан/эти л ацетат (6:4)).

2.3.2.    Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

2.3.2.1. Колонка № 1.

В стеклянную колонку' помешают чистую стекловату (при ее отсутствии обычную вату замачивают на 24 часа в хлороформе, после чего высушивают на воздухе). 3,5 г силикагеля Si-бО помещают в стеклянный стакан и суспендирую! в 15-20 мл подвижной фазы - гек-сап/хлопогЬопм П’1 но ocvw»mv\ KV*ttowvv nnrtuimoinr ->тпй Ло.л» ■* пп по., «2£тгег:ггет2

*    *    »    '    v    ,     “V    г*    ^%    v    T*^wv    *    г    ^vr

полностью стечь, вливают в колонку суспензию силикагеле Операцию повторяют 2-3 раза,

36

пока весь силикагель нс будет перепесен в колонку. Сорбент уплотняют постукиванием по стенкам колонки, до прекращения видимого оседания силикагеля. Сверху помещают стекловату или вату, промытую в хлороформе. Недопустимы видимые пустоты н пузырьки воздуха в колонке! В этом случае колонку заполняют повторно.

2.3.2.2. Колонка № 2.

В стеклянную колонку помещают чистую стекловату (при ее отсутствии обычную вату замачивают на 24 часа в хлороформе, после чего высушивают на воздухе). 3,0 г силикагеля Si-60 помещают в стеклянный стакан и суспендируют в 15-20 мл подвижной фазы № 1 гексан/тгилацетат (9:1 по объему). Колонку промывают этой же фазой и, не дав растворителю полностью стечь, вливают в колонку суспензию силикагеля. Операцию повторяют 2-3 раза, пока весь силикагель не будет перенесен в колонку. Сорбент уплотняют постукиванием по стенкам колонки, до прекращения видимого оседания силикагеля. Сверху помещают стекловату или вазу, промытую в хлороформе. Недоиустимы видимые пустоты и пузырьки воздуха в колонке! В этом случае колонку заполняют повторно. После впитывания растворителя в поверхность силикагеля можно наносить образец.

2.3.3.    Подготовка хроматографической системы к проведению анализа.

Подготовку хроматографической сисгсмы проводят согласно заводской инструкции

по эксплуатации хроматографа.

2.3.4.    Проверка хроматшрафического поведения Фенпироксимата, Z-изомера и диме-гилфен п ироксим ата.

При использовании новой партии силикагеля, а также при отработке методики или при замене силикагеля Si-60 на силикагель КСК (ЛХМ), необходимо провести уточнение поведения анализируемого вещества на хромтао|рафической колонке. Для этого 1 мл стандартного раствора анализируемых веществ с концентрацией 2 мкг/мл упаривают в концентраторе досуха. Остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы (гексан/хлороформ 1:1) и наносят на колонку. Колбу вновь ополаскивают 2 мл фазы, и, после впитывания первой порции в слой силикагеля. также наносят на колонку.

После впитывания колонку промывают 150 мл подвижной фазы (гексан/хлороформ 1:1), отбирая следующие фракции: первые 15 мл, следующие 35 мл (в них содержится фен-нироксимат и Z-изомер) и следующие 100 мл (в них содержится деметилфсяпироксимат). Элюйгг из каждой фракции упаривают до объема 15-20 мл и количественно, используя 15-20 мл хлороформа, переносят в концентратор, упаривают до объема 0,3-0,5 мл.

з?

В токе азота выпаривают растворитель досуха, остаток растворяют в 1 мл ацетонитрила и хроматографируют (при использовании хроматографа “Милихром 4”, образец, содержащий деметилфенпироксимат растворяют в 0,8 мл ацетонитрила и после растворения добавляют 0,2 мл бидистиллята).

Аналогично изучают поведение Фенпироксимата и продуктов его трансформации на колонке № 2. Для этого 1 мл стандартного раствора анализируемых веществ с концентрацией 2 мкг/мл упаривают в концентраторе досуха. Остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы (гексан/хлороформ 1:1) и наносят на колонку. Колбу вновь ополаскивают 2 мл фазы, и, после впитывания первой порции в слой силикагеля, также наносят на колонку.

После впитывания колонку промывают 50 мл подвижной фазы № 1 (гексан/этил ацетат 9:1), собирая элюат в колбу для упаривания. После промывки колонки фен-пироксимат и продукты его трансформации элюируют 25 мл фазы № 2 (гексан/ этил ацетат 6:4), собирая элюат в колбу для упаривания. Элюат упаривают до объема 0.3-0.5 мл. В токе азота выпаривают растворитель досуха, остаток растворяют в 1 мл ацетонитрила и хромтато-графируют.

ВНИМАНИЕ! При использовании хроматографа “Милихром 4”, следует вышеуказанную проверку на колонке № 2 проводить только для фенпироксимата и его Z-изомера (первый стандарт).

2.3.5. Приготовление стандартных растворов

На аналитических весах взвешивают 10 мг фенпироксимата, 10 мг Z-изомсра и 10 мг деметилфенпироксимата в колбу на 100 мл. Навеску растворяют в очищенном ацетонитриле и доводят объем до метки.

Полученный раствор с концентрацией 0,1 мг/мл (стандартный раствор № 1) хранят в холодильнике в течение 1 месяца.

При проведении анализа с помощью хроматографа “Милихром 4^м, готовят 2 стандартных раствора:

1)    10 мг фенпироксимата и 10 мг Z-изомсра взвешивают в колбу на 100 мл, растворяют в ацетонитриле и доводят до метки (стандарт № 1).

2)    В другой колбе на 100 мл взвешивают 10 мг фенпироксимата, растворяют в ацетонитриле и доводят до метки (стандарт № 2).

Непосредственно перед анализом готовят серийные разведения стандартных растворив с концентрацией 2, i, 0,5 и 0,1 мкг/мл. Для этого из стандартного раствора с концентрацией 100 мкг/мл (стандартные растворы № 1и Х<? 2) отбирают 2 мл, переносят я мерную кол-

з&

бу на 100 мл, доводят до метки ацетонитрилом и тщательпо перемешивают. Затем бинарными разведениями получают стандартные растворы с требуемой концентрацией. Стандарт дс-мстилфенпироксимата разводят подвижной фазой (ацетонитрил/вода, 80:20).

Вводят в хроматограф по 10 мкл (20 мкл) каждого раствора, измеряют высоты пиков и строят график зависимости высоты пика от концентрации анализируемого вещества.

2.4.    Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79 г.).

Отобранные пробы анализируют в день взятия образца. При отсутствии такой возможности фрукты замораживают и хранят в холодильнике при -18°С ее более 1 месяца, предварительно определив содержание влаги.

Образцы воды помещают в стеклянную посуду, заполнив не более, чем на 2/3, замораживают и хранят в горизонтальном положении.

Образцы почвы подсушивают до воздушно-сухого состояния, размалывают на мельнице и просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Подготовленную почву хранят до анализа в плотно закрытой стеклянной таре при -18°С, в течение месяца.

Перед анализом яблоки и виноград гомогенизируют (натирают яблоки на терке, виноград растирают в ступке). Образцы воды фильтруют.

2.5.    Описание определения

2.5.1.    Яблоки и виноград.

2.5.1.1.    Экстракция и предварительная очистка

Навеску 50 г измельченных плодов помещают в колбу на 250 мл и заливают 100 мл ацетонитрила. Образец встряхивают в течение 30 мин. Экстракт фильтруют, к образцу добавляют свежую порцию ацетонитрила (100 мл) и встряхивают в течение 30 мин. Экстракт слфильтровывают, остаток на фильтре промывают 50 мл ацетонитрила. Экстракты объединяют. Из полученного объема (250 мл) отбирают 50 мл экстракта, переносят в делительную воронку на 500 мл, добавляют 100 мл дистиллированной воды и 30 мл насыщенною раствора хлорида натрия, перемешивают и трижды экстрагируют гексаном порциями по 70 мл. Объединенные гексановые фракции упаривают до объема 0,3-0,5 мл на на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40°С. В токе азота выпаривают растворитель досуха, полученный остаток очищают на колонке с смлнкшслсы (колонка >£ !).

39

2.5.1.2.    Очистка на колонке с силикагелем № 1

Сухой остаток в кониснираторе растворяют в 2 мл подвижной фазы (гек-саи/хлороформ) и наносят на колонку, подготовленную согласно пп. 2.3.2.1., не допуская ее пересыхания. Колбу повторно ополаскивают 2 мл подвижной фазы и наносят на колонку после впитывания первой порции в слой силикагеля. После нанесения образца, Фенпироксимат и продукты его деградации, элюируют 150 мл подвижной фазы (гексан/хлороформ 1:1). Первые 15 мл элюата отбрасывают. Далее фракции собирают, с учетом .дальнейшего использования хроматографа:

1) . Хроматограф “Hewlett-Packard HP 1050” или аналогичный с аналитической колонкой 200 х 4,6 мм.

После сброса первых 15 мл собирают остальные 135 мл элюента, упаривают до объема 10-15 мл и количественно переносят в конический концентратор, используя 15-20 мл хлороформа для 2-3-кратного ополаскивания колбы. Растворитель отгоняют до объема 0.3-0,5 мл на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40°С. Полностью удаляют растворитель в токе азота, а остаток очищают на колонке № 2.

2) . Хроматограф “Милихром 4”.

После сброса первых 15 мл собирают следующие 35 мл, содержащие Фенпироксимат и его Z-изомер. В другую колбу собирают следующие 100 мл элюата, которые содержат деметил фенпироксимат. Растворитель отгоняют до объема 0,3-0,5 мл на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40°С. Полностью удаляю! растворитель в токе азота, а остаток в колбе № 1 (Фенпироксимат и Z-изомер) очищают на колонке № 2. Сухой же остаток в колбе № 2 (деметилфенпироксимат) растворяют в 0,4 мл ацетонитрила, добавляют 0,1 мл бидистиллята и хроматографируют.

2.5.1.3.    Очистка на колонке с силикагелем № 2

Сухой остаток, полученный согласно пп. 2.6.1. и 2.6.2., растворяют в 2 мл подвижной фазы 1 (гексан/этилацетат, 9:1) и наносят на колонку № 2, подготовленную согласно пп.

2.5.2.2. Колбу повторно ополаскивают 2 мл подвижной фазы и также наносят на колонку по-сле впитывания предыдущей порции. После впитывания образца в слой силикагеля, колонку промывают 50 мл подвижной фазы № 1 (гексан/этилацетат, 9:1). Элюат отбрасывают, а Фенпироксимат и его метаболиты элюируют 25 мл подвижной фазы № 2 (гексан/этилацетат, 6:4). Собранный элюат упаривают до объема 0,3-0,5 мл, растворитель удаляют в токе азота, остаток расгворяюг в 1 мл ацетонитрила (для хроматографа “Милихром 4” в 0,5 мл) и хромаго-рагфируют.

2.5.2.    Почва

В коническую колбу на 100 мл помещают 20 г воздушно-сухой почвы, подготовленной согласно п. 2.4. К навеске добавляют 40 мл смеси: 80%-й водный аце-тон/концентрированная соляная кислота (40:2), встряхивают в течение 1 часа и выдерживают в течение 18 часов (оставляют на ночь). Утром колбу дополнительно встряхивают в течение 30 мин и фильтруют на воронке Бюхнера под вакуумом. К остатку в колбе добавляют 20 мл экстрагирующей смеси и повторяют экстракцию в течение 20 мин, при постоянном встряхивании.

Полученный экстракт также фильтруют с помощью воронки Бюхнера. Экстракты объединяют и из полученного объема отбирают 30 мл. Отобранную аликвоту упаривают до водного остатка на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 45°С.

Водный остаток переносят в делительную воронку на 100 мл, и фенпироксимат реэкс-трагируют хлористым метиленом (3 порции по 15 мл). Органические фракции объединяют, осушают сульфатом натрия и упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 45°С, до объема 1-2 мл. В токе азота выпаривают растворитель досуха, сухой остаток перерастворяют в 5-10 мл подвижной фазы и хроматографируют на колонке с нормальной фазой.

2.5.3.    Вода

Аликвоту образца (250 мл) воды экстрагируют тремя порциями хлороформа (по 50 мл). Объединенный экстракт высушивают, пропуская через безводный сульфат натрия, увлажненный хлороформом, в круглодонную колбу. Сульфат натрия промывают хлороформом и полученный экстракт упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40°С. При необходимости, а при использовании хроматографа “Милихром 4^м обязательно, образец очищают на колонке с силикагелем (колонка № 1), как указано в п.

2.5.1.2. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют.

2.6. Условия хроматографирования

2.6.1. Жидкостной хроматограф “Hewlett-Packard HP 1050” или аналогичный.

Детектор ультрафиолетовый, длина волны 258 нм.

Подвижная фаза: ацетонитрил/во да (75:25).

Скорость потока - 1,5 мкл/мкн.

Объем дозирования - 10 мкл.

Чувствительность детектора - 2,000 aufs.

Показания атенюатора - 2*.

Скорость протяжки лепты - 0,2 мм/мин

w

ББК 51.21 0 37

О 37 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний. Вып. 4—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007.—254 с.

Настоящий сборник содержит копии оригиналов методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды.

1.    Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгнлевич); при участии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.П. Весе лов). Разработчики методов указаны в каждом из них.

2.    Методические указания рекомеидовваны к утверждению Комиссией по государственному сани гарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ.л.16,0

Тираж 150 экз.

Тиражировано отделом информационно-издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Рослотреб надзора

© Роспотребнадзор, 2007 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007

Содержание

Определение остаточных количеств тритосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1437—03..................................................................................4

Определение остаточных количеств трифлуралина в зеленой массе и зерне зерновых культур, в семенах и масле подсолнечника, сои и рапса методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1438—03,.................................. ........................................................................20

Определение остаточных количеств фснпироксимата и его метаболитов в воде, почве, винограде и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1439—03............................... 30

Измерение концентрации фенпироксимата в воздухе рабочей зоны методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1440—03 ................................. 43

Измерение концентраций флумстсулама и флорасулама в воздухе рабочей зоны

методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1441—03............................50

Определение остаточных количеств флуметсулама и флорасулама в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1442—03................................................................................59

Определение остаточных количеств флуазифоп-П-бутил по флуазифоп-П в воде, зеленой массе растений, клубнях картофеля, зерне гороха, семенах и масле сои,

подсолнечника, рапса, льна методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1443—03..................77

Определение остаточных количеств флутриафола в воде, почве, зеленой массе, зерне и соломе зерновых колосовых культур, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, винограде и

яблоках методом капиллярной газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1444—03.....................99

Определение остаточных количеств хлороталонила в зерне и соломе зерновых колосовых культур, винограде, яблоках, хлороталонила и его метаболита - SDS 3701

(R 182281) методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1445—03......................................113

Определение остаточных количеств эсфенвалерата в воде водоемов, почве, яблоках, клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом

газожидкостной хромаго1рафии: МУК 4.1.1446—03...................................................... —    128

Измерение концентраций карбосульфана в воздухе рабочей зоны методом

газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1447—03 .................................................................. 139

Определение остаточных количеств диниконазола в семенах и масле подсолнечника

методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1448—03................................................... 146

Измерение концентраций дикамбы в воздухе рабочей зоны газожидкостной и

тонкослойной хроматографией: МУК 4.1.1453—03.........................................................................153

Определению остаточных количеств имазамокса в воде, почве, зерне и масле сои

методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1454—03..........................164

Определение остаточных количеств клефоксидима в воде, почве, зерне и соломе

риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1455—03.................. 176

Определение остаточных количеств кломазона в воде, почве, зерне, соломе риса,

семенах и масле сои хроматографическими методами: МУК 4.1.1456—03..................................187

Определение остаточных количеств крезоксим-метила в воде, почве, яблоках и его

метаболита крезоксима в воде и почве газохроматографическим методом: МУК 4.1.1457—03......203

Определение остаточных количеств метазахлора в семенах и масле горчицы и рапса га-

зохроматографичсским методом: МУК 4.1 1458—03......................................................................215

Определение остатков пирипроксифена в воде, почве и яблоках методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1459—03..........................................223

Определение остаточных количеств тепралоксидима в воде, почве, сахарной свекле и

сое методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1460—03..„.............................................233

Определение остаточных количеств бромуконазола в воде, почве, зерне и зеленой массе зерновых колосовых культур, ягодах черной смородины и винограда методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1467—03........................ 245

3

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации Первый заместитель Министра здравоохранения

сой Федерации Г.Г. Онищенко

МУК4.1./Ш-93

Дата введения! CbAribfotybtoQrft&ifafal ЗР lutkj Ifrh.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методические указания по определению остаточных количеств Фенпироксимата и его метаболитов в воде, почве, винограде и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

1.ВВОДНАЯ ЧАСТЬ

Фирма-производитель: Нихон Нохияку Компани, ЛТД Япония.

Торговое название: Ортус

Название действующего вещества по ИСО: Фенпироксимат

Название действующего вещества по ИСО: трет - бутил (Е)-а-(1,3-димстил-5-фсноксипиразол-4-ил-метиленамино -р- толуат-окси) метил бензоат.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C24H27N3O4.

О СН,

и    I    ³

Н

С-О-С-СН3

30

Химически чистый Фснлироксимат представляет собой белое кристаллическое вещество, без запаха.

Давление паров - 0,0075 мПа (при 25°С).

Температура плавления 101,1-102,4 °С.

Коэффициент распределения н-октаяол-вода: К ow log Р =5,01 (20°С).

Растворимость в воде составляет при 25°С -1,46 х 10'² мг/л.

Растворимость в органических растворителях (г/л при 25°С): дихлорметан- 1307, хлороформ - 1197, ацетон - 150, метанол -15 г/л.

Краткая гигиеническая характеристика: Фенлироксимат относится к умеренноопасным по острой оральной (ЛД$о /крысы / 245-480 мт/кг) и дермальной (ЛД$о /крысы/ свыше 2000 мг/кг) токсичности веществам, но чрезвычайно опасным по ингаляционной (ЛД50 /крысы/ 4 ч. 0,33-0,36 мг/л) токсичности. Вызывает очень слабое раздражение кожи и среднее раздражение слизистых оболочек г лаз. При хроническом воздействии может оказывать слабое тератогенное действие.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0,005 мг/кг/суг,

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,05 мг/м³;

ПДК в воде - 0,001 мг/л;

ОДК в почве - 0,3 мг/кг;

МДУ (мг/кг) в яблоках, винограде - ОД.

Область применения: Фснлироксимат является контактным акарицидом из группы пираэолов, предназначенным для уничтожения различных видов клещей. Зарегистрирован в России н странах СНГ под торговой маркой Ортус, ск (50 г/л) в качестве акарицида на яблоне с нормой расхода 0,5-0,9 л/га, а также на виноградниках с нормой расхода 0,6-0,9 л/га при 2- кратной обработке.

При определенных условиях может трансформироваться в растениях и объектах окружающей среды с образованием Z- изомера и дсметилфенпироксимата.

Название действующего вещества Z- изомера по ИСО: трет бутил-(Z)-a-( 1,3-димстил-5-фенокси-1Н-пиразол-4-ил) мстиленамино- р~ толуат-окси метил бензоат.

Структурная формула:

Название действующего вещества леметилфенпироксимата по ИСО: трет - бутил-(Е)- а-(3-метнл-5-фенокси-1 Н-пиразол-4-ил) метиленамино - -р- толуат- окси метил бензоат. Структурная формула:

н

О СН₃ -С-О-С-СНз

2. Методика определения остаточных количеств Фенпирокснмата и его метаболитов воде, почве, яблоках и bhiioi рале методом высокоэффективной жидкостной хромато1рафин

2.1.    Основные положения

2.1.1.    Принцип метода

Методика основана на определении Фенпирокснмата и его метаболитов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием ультрафиолетового детектора, после экстракции ацетонитрилом (яблоки, виноград), хлороформом (вода), подкисленным 80%-м ацетоном (почва), перераспределении в гексан или хлористый метилен (почва) и очистки экстракта на колонках с силикагелем. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2.    Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при возделывании плодовых культур и виноградников (хлор- и фосфорорганические со единения, синтетические пи ретро иды, фенилмочевины, тио- и дитиокарбаматы и т.д.).

32

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Мегрологичсская характеристика метода приведена в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Метрологические параметры метода определения остаточных количеств Фенпироксимага и продуктов его трансформации в винограде, яблоках, воде

Метрологические параметры, р=0,95, п=^20

Анализи руемый объект Предел обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение, S Доверительный интервал среднего результата, %± вода 0,001 0,001 - 0,5 92.8 1,10 92,8 ±2,69 почва 0.02 0,02-0,1 78.1 3,05 78,1 ±3,85 яблоки 0,025 0,025-0,5 84,8 3,90 84,8 ±4,12 випоград 0,025 0,025-0,5 86,5 4,190 86,5 ±4,42

I аблииа 2.

Доверительный интервал и полнота определения Фенпироксимага в воде, почве, яблоках и винограде

Среда	Добавлено Фенпироксимата мг/кг	Обнаружено Фенпироксимага мг/кг	Доверительный интервал, ±	I (олнота определения, %
вода	0,01	0,0091	0.0003	91,0
	0,04	0,0373	0,001	93,2
	0.08	0,0742	0.002	93.3
	0.15	0,1407	0,002	93,8
почва	0,02	0.0147	0,0004	78,4
	0,05	0.0483	0,002	76,6
	0,1	0,0794	0,003	79,4
яблоки	0,02	0.0167	0,0008	83,5
	0,05	0,0423	0.001	84.7
	0,10	0,0857	0,004	85,7
	0,50	0.426	0,019	85,2
виноград	0,02	0,00162	0,0001	81,2
	0,05	0.0043	0,0001	86,0
	0.10	0.0088	0.0003	88,3
	0.50	0,0045	0.0002	90,2

33

2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование

2.2.1.    Реактивы, растворы и материалы

Фенпироксимаг, х.ч., аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,70 %.

Z-изомср Фенпироксимата.

Деметилфенпироксимат (производство Нихон Ножу, Япония).

Ацетонитрил, ч.,ТУ 6-09-3534-87.

.Ацетон, чщ.а, ГОСТ 2603-79.

Хлористый метилен, х.ч., ГОСТ 12794-80.

Спирт метиловый, ГОСт 6995-77. н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.

Хлорофрм, Фармакопея СССР.

Этиловый эфир уксусной кислоты, ч.д.а, ГОС Т 22300.

Кислота хлороводородная, х.ч., ГОСТ 3118-77.

Натрий сернокислый безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.

Натрий хлористый, ч.д.а., ГОСТ 4233-77.

Вода дистиллированная. ГОС Т 6709.

Вода бидистиллированная.

Силикагель для колоночной хроматографии 70-230 меш, фирма мерк, № 7734.

Вата, сухая обезжиренная, ГОСТ 5556-81.

Универсальная индикаторная бумага, TV' 6-09-1181-71.

Фильтры бумажные, ТУ-6-09-1678-86.

2.2.2.    Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф “Hewlett-Packard HP 1050^м с ультрафиолетовым детектором или аналогичный (например, “Beckman Gold System”).

Хроматографическая колонка обращении - фазовая Hypersyl RP-18. размером 200 мм х 4,6 мм или аналогичная.

Хроматографическая колонка нормально- фазовая Resolve Silica, , размером 3,9 мм х 150 мм или аналогичная.

Жидкостный хроматофаф “Милихром 4” (Россия) с ультрафиолетовым детектором Колонка аналитическая КАХ-4643, содержащая носитель Separon С18.

Встряхивагслъ механический. ТУ 64-1-1081-73.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 или аналогичный.

Насос водоструйный. ГОСТ 25336 или вакуумный насос масляный, типа ВН-461-М

зк

Мякрошприцы, ГОСТ 20292-74.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850.

Колонки для адсорбционной хроматографии, длина 35 м, внутренний диаметр 1,2 см.

Колбы конические плоскодонный на 100 и 250 мл, с притертыми пробками (шлиф № 29), КПШ-100-29/32 и КПШ-250-29/32, ГОСТ 10394-72.

Воронки для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613

Воронки делительные стеклянные на 100 и 500 мл, ГОСТ 8613.

Колбы круглодоныые на шлифах на 250 мл, ГОСТ 25336-83

Концентраторы конические НШ 19, КГУ-100-14/19, ТС, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные на шлифах, на 50 и 100 мл, КГУ 50-14/19 и КГУ 100-14/19, ТС, ГОСТ 10394-72.

Пробирки градуированные, стеклянные, на 10 и 25 мл, ГОСТ 1770-74 Е.

Пипетки мерные на 100 мл. ГОСТ 25336-82.

Стаканы стеклянные на 100 мл., ГОСТ 25336-82 Е.

Колбы мерные на 50, 100,250 и 500 мл, ГОСТ 1770-74 Е.

Цилиндры мерные на 50, 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 1770-74 Е.

Колбы Бунзена, вместимостью 500 мл, ГОСТ 6514-75.

Фильтры бумажные “синяя лента”, ТУ 6-09-2678.

Весы аналитические ВЛР-200 г, ГОСТ 24104-80.

Весы технические ВЛКТ-500 г, ГОСТ 19491-74.

Секундомер, ГОСТ 16820-71.

23.Подготовка к определению

2.3.1. Подготовка растворителей и приготовление подвижных фаз для колоночной и ВЭЖХ -хроматографии.

2.3.1 Л. Метод очистки ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентаоксидом фосфора несколько раз, до тех пор, пока ацетонитрил не перестанет окрашиваться. После этого ацетонитрил отгоняют, и перегоняют еще раз над карбонатом кашя.

2.3.1.2. Метод очистки гексана

Гексан (1 л) выдерживают 15 часов с концентрированной серной кислотой (0,1 л). Гексан аккуратно декантируют в делительную воронку и трижды промывают: дистиллированной mvlon, 2/u-iiaun U СДИим»! раствором гидроксила натрия и снова водой. Осушают гексан гидроксидом кхзия, после чего перегоняют.

3S