Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Сборник № 23
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ информации, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1995 г.
Государственная комиссия пс химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Сборник № 23
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1995 г.
ло объема l мл. На хроматографическую пластинку наносят 0.1 мл полученного растзора.
2.6Л.2. Почва. К 10 г почзьг. растертой з фарфоровой ступке. добазляют 2 мл дистиллированной волы. Почву тщательно увлажняют. Экстракцию охсллик-cxta проводят этнлапетатом три раза порциями до 50 мл при механическом встряхивании колбы в течение 30 мин. Дальнейшее определение проводят согласно раздела 2.6.1.1.
2.6.1.3. Зола. 500 мл золы помешают з делительную воронку зместимоетью 1 л. лобазляют около 5 г хлорида натрия и 50 мд хлороформа. Смесь з течение нескольких минут энергично зстряхизают. Посте разделения слоез нижний хлороформный стой сливают в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл. Экстракцию оксаликсила повторяют erne дважды тем же количеством растворителя. Объединенный экстракт сушат над беззодкым сульфатом натрия (-10-12 п.
Растзор сливают через бумажный фильтр порциями з грушевидную колбочку вместимостью 50 мл. Концентрируют каждую порцию с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема -2 мл. Постелнюю порцию растворителя отгоняют полностью. К сухому остатху пипеткой добавляют 2 мл апетона, колбочку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем. В хроматограф вводят 3 мял. На хроматографическую пластинку наносят 0.1 мл подученного раствора.
2.6.2. Условия хроматографирования.
2.6.2.1. ГЖХ.
Хроматограф Цзет 106 с ТИД.
Насадка колонки 2% карбовакса 20 М на хроматоне N’-AW-H.\QS '0.20-0:25).
Длина я внутренний диаметр колонки 65 см хЗ.О мм.
Скорость потока газа-носителя азота 100 мл/мин.
Скорость потока водорода 20 мл/мин.
Скорость потока воздуха 300 чд/мин.
Температура термостата колонки 240u С.
Температура испарителя 240* С.
Рабочая шкала электтэометпа 5 . 10 а.
Скорость псотяжки ленты самописца 240 мм / 'ч:с
Объем вводимой лпобы J мкл.
Зремя *-*дсо;кнвания окслликсхча 3 мин. ЗМ с.
Линейны;! диапазон определения 3-130 кг.
2.0.2.2. ГСХ.
На хроматографические пластинки д помощью миксосппзипд на М)0 чкл или микропипетхи на ОЛ мл наносят хтикзотнуга часть полученного по п. 2.7. раствора. Справа и стева таким же способом наносят серию стандартных растворов оксадиксила с содержанием 0,2; 0.3; 0.4: 0,5........1.0 мкг Градуировочные
ьн
растворы готовят з градунрованных пробирках зместимостью 10 мл с пробками на шлифах согласно таблице 2.
|
Таблица 2.
Шкала стандартов. |
|
1 |
|
|
Номеэ стандаота |
|
|
1
t |
|
|
1 |
л |
3 |
i |
5 |
; |
i |
Q |
|
Внесено |
2 i |
3 |
4 |
5 ; |
6 |
i |
I |
io i |
|
стан- ! | |
|
|
i
; i |
|
1 |
1 |
t
{ |
|
даотного ! j |
|
|
! I
! i |
|
1
I |
T
i
| |
t
» |
|
растзора ; | |
|
|
: г |
|
I
i |
i |
t
* |
|
оксадих- |
|
|
i i
■ i |
|
I |
! |
1 |
|
с;1ла N 2 |
|
|
i i |
|
i
j |
i |
t |
|
ПО |
|
|
|
! | |
|
1 |
i |
|
|
мкг/МЛ), |
|
|
t |
! : |
|
i
i |
i
l |
|
|
МЛ : i |
|
\ |
• t |
|
i |
I
t |
|
|
Добавле |
8 1 |
7 : |
1 6 |
i 5 i |
4 |
i
.... |
1 |
0 |
|
но гекса |
[ |
|
1 1 |
|
1 |
I
1 |
|
|
на. мл |
1 |
1 |
i 1 |
|
I |
1 |
1 |
|
Кон- |
\ 2 I |
! з |
! ^ |
i 5 |
6 |
i .... |
1
t |
1° |
|
центрациэ j |
1 |
j |
i
I |
|
t
I
I |
!
1 |
i
1 |
|
оксадих- j |
|
|
t
i |
|
t
j |
1
1 |
I |
|
сила в | |
|
j |
i |
|
\ |
!
i
i |
1 |
|
пал учен- ; |
|
i |
I
i |
|
• |
i
l |
1
i |
|
ном ' |
|
i
i |
1 |
i |
t
t |
i |
\ |
|
растворе. |
|
t |
I |
j |
| |
j |
|
|
мкг/ мл |
|
i |
|
|
|
|
i |
|
Со- |
Г1
О |
; 0.3 |
i 0.4 |
; 0i |
| 0.6 |
|
|
0,1 ; |
|
держание |
j |
- |
|
|
|
; |
i |
|
оксадих- |
[
! |
, |
|
<
J |
|
' |
! |
|
сила в |
|
|
|
|
|
|
t |
|
хромато- |
|
|
|
|
|
• |
i |
|
графируе- ■ |
1
1 |
• |
j |
1 |
|
i |
|
|
мой |
j |
|
|
|
|
|
|
|
пообе. мкг ■ |
* |
|
|
|
|
|
|
|
Хроматограмму развивают з системе сначала хлороформ, а затем посте высушивания хроматограммы - гексан: ацетон *3: 2). Посте развития высушенную хроматограмму помешают под лампу '/Фсзета на 10 мин. а затем на 10 мин з свежеприготовленную хлорирующую камеру. Посте удаления избытка хлоса пластинку обрабатывают из пульверизатора проявляющим реагентом. Оксддик-сил проявляется в зиле темных пятен на остом фоне с Rf 0,30 г 0.05. Линейный диапазон определения 0,2 - 1,0 мкг. Пятна стабильны в течение длительного времени.
2.6.3. Обработка результатов анализа.
2.6.3.1. ГЖХ.
Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом. по высоте пика. Стандартный раствор с содержанием Юмкг/мл оксддиксила вводят до л после введения рабочей пробы.
Содержание оксадиксила з анализируемой пробе ( X ) з мг/ :<г или мг/л вычисляют по формуле:
Ccvn-ЯПО- V
Hcm.Va.P ’
С - количество стандарта, введенного в хроматограф, нг,
Нпр - зысота пика рабочей пробы, мм;
Нет - зысота пика стандарта, мм;
V - общий объем рабочего раствора, мл;
Va - объем аликвоты, вводимой в хроматограф, мхл;
Р - навеска анализируемого образца в г или объем пробы зоды з мл.
Если при введении в хроматограф получаются стишком большие пики или происходит wзашкаливание” к рабочему раствору пипеткой добавляют замеренное количество ацетона и анализируют более разбавленный раствор.
2.6.3.2. ТСХ.
Количественное определение оксадиксила проводят путем сравнения площади и интенсивности окраски пятен рабочей пробы я серии стандартов.
Содержание оксадиксила в анализируемой пробе ( X ) мг/кг ( мг/мл ) вычисляют по формуле:
С - содержание оксадиксила, найденное з хроматографируемой пробе, мкп V - общий объем раствора, мл;
Va - объем аликвоты, нанесенной на пластинку, мл;
Р - навеска или объем анализируемой пробы в г или мл.
3. Требования техники безопасности.
При работе соблюдать требования безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и пестицидами.
20
I. Ахйл- оропаквизафоп.
2-Берет-спеаиаль- фенпиклонил + имазалкл.
3. Берет-фенпиклонил.
4. Длкуран- хлортолурон. о.Лограя- триасульфурон.
б.Маврюс- флювалинат.
7*Рубиган- фенарямол.
8. Сандофан- оксадиксил.
9. Сатис- триасульфурон + флюглшсофен. Ю.Телл- примисульфурон.
11-Тилт- пропихоназол.
12. Топик- хлодинафоп + пропаргял.
13. Фронгьер- диметенамид.
14.ЭЙМ- клорфлуазурон.
Указатель химических названий по ИЮ ПАК.
L.Диметенамид- стр. 3, 7
2.0ксадиксил- 11
3. Примисульфурон- 19, 24
4. Пропаквизофоа- 28,33
5-Попиконазол- 40
6. Триасулъфурон- 45,51
7. Хлодинафоп-пропаргил- 56,62
8. Хлортолурон- 67
9. Хлорфлуазурон- 71
Ю.Фенаримол- 76
11 .Фенпиклонил + имазалил- 79 12.Флюгликофен- 93.98
13 .Флювалинат- 37
Псиме^ание
На странице 1С4 а указателе химических названий по ИЮ ЛАК надо учесть, что номера страниц сдвигаются на 2 згесед.
Заказ 838. Типография, Ветошный пер.. 2. Тираж 1000.
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Редакционная коллегия:
Калинин В.А.- к.с.н., профессор, зав.кафедры ТСХА; Пушкина Г.П.- к.б.н.. Российский институт лекарстр°ичы* (л/пьтуо: Борисов Г.С.-заз. КТЛ PPC7A3P;
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательсхих учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических , контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов а продуктах литания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
Ответственный за выпуск - Орехов Д.А.. заместитель председателя Госхимкомиссии тел. 207-63-90
Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией зашиты растений ТлавхимзащигъГ МСХ РФ
г. Раменское Московской обл., ул. Нефтегазосъемки 11/41 тел. (246) 3-09-52
ОГЛАВЛЕНИЕ: стр.
1. Методичесхие указания по определению лим стенам ил а з золе, зеленой массе, почве а зерне метолом тзо;кллхостной хроматографии.
N 6232-91 29 июля 1991 г.................................... 5
2. Методические указания по определению диметенамила з зоз-лухе рабочей зоны метолом газожидкостной хроматографии.
N 6231-91 29 июля 1991 г.................................... 9
3. Методические указания по определению оксадикслла в картофеле, огурцах, томатах, сахарной сзехле. зинограде, почве и золе методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.
N 6270-91 29 июля 1991 г.................................... 13
4. Методические указания по определению примисульфурона в золе, почве, растительном материале методами тонкослойной и газожидкостной хроматографии.
N 6210-91 29 июля 1991 г.................................... 21
5. Методические указания по определению примисульфурона в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.
N 6211-91 29 июля 1991 г.................................... 26
6. Методические указания по определению пропаквизафопа s воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонхослойяой х ро матограсЬии.
N 6250-91 29 июля 1991 г.................................... 30
7. Методические указания по определению пропаквизафопа в растительном материале, волокне и семенах хлопчатника, воде и почве: методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.
N 6251-91 29 июля 1991 г.................................... 35
8. Методические указания по определению пропиконазола в воздухе рабочей зоны методами газожидхостной и тонкослойной хроматографии.
N 6246-91 29 июля 1991 г.................................... 42
9. Методические указания по определению триасульфурона з растительном материале, соломе, зоде и почве методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.
N 6177-91 29 июля 1991 г.................................... 47
10. Методические указания по определению триасульфурона в зоздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.
N 6158-91 29 июля 1991 г.................................... 53
11. Методические указания по определению хлодинафоп - пропар-гила в растительном материале, зерне, почве и воде методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.
N 6253-91 29 июля 1991 г.
гила з воздухе рабочей зоны методами газожпдхостной и тонкослойной хроматографии.
N 6252-91 29 июля 1991 г.................................... 64
13. Методические указания по определению хлортолурона з зоз-духе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.
N 6184-91 29 июля 1991 г.................................... 69
14. Методические указания по определению хлорфлуазурона в растительных объектах, воде и почве методом жидкостной хроматографии.
N 6150-91 29 июля 1991 г.................................... 73
15. Методические указания по определению фенаримола з воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.
N 6275-91 29 июля 1991 г.................................... 78
16. Методические указания по определению фенпиклонила и има-залкла при совместном присутствии з воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.
N 6157-91 29 июля 1991 г.................................... 81
17. Методические указания по определению фенпиклонила в зерне, почве и воде методом газожидкостной хроматографии.
N 6175-91 29 июля 1991 г.................................... 85
18. Методические указания по определению флувалината в меде и воске методом газожидхостной хроматографии.
N 6223-91 29 июля 1991 г.................................... 89
19. Методические указания по определению флюгликофена в воде, почве, растительном материале методом газожидкостной хроматографии.
N 6247-91 29 июля 1991 г.................................... 95
20. Методические указания по определению флюгликофена з воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.
N 6213-91 29 июля 1991 г.................................... ИЮ
21. Предметный указатель. 104
12. Методические уазания по определению хлодияафоп - пропар-
“Утверждено*' Министерством Здравоохранения СССР
**27" июля 1991 г N 6270-91
Методические указания по определению охсадиксила в картофеле, огурцах, томатах, сахарной свекле, винограде, почве и воде методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.
1. Вводная часть.
Сандофан, 25% с.я.
ф.'Сандоз", Шзейпария.
Оксадихсил. 2-метокси - N -(2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил)ацет-2.6-ксл-лидин(ИЮПАК)*
C14H13N2O4
М.м.278,3
В чистом виде белые кристаллы с Тол 104-105Q С. Растворимость з % при 25° С: в воде - 0,34, адетоне - 34,4, диэталовом эфире - 0,6, диметалсульфоксиде - 39, этаноле - 5, ксилоле - 1,7.
Сандофан - фунгицид, эффективный против грибковых заболеваний фруктовых и овошных культур. Л До 0 хтя крыс 1860-3480 мг/хг. МДУ оксадикслла в картофеле, свекле сахарной - 1 мг/хг, в яблоках, томатах, винограде - 0.5 мг/кг. ОБУВ в золе санитарно-бытового водопользования - 0,05 мг/л. ОДХ з почве -0,5 мг/кг. ДСД - 0,017 мг/ кг веса человека в сутки.
2. Методика определения.
2.1. Основные положения.
2.1.1. ГГриншт метода.
Метод основан на извлечении оксадиксяла из анализируемого объекта эти-лапетатом, очистка экстракта на колонке с оксидом алюминия и определении газожидкостной хроматографией. При определении методом ТСХ дополнительно проводится очистка микросублимацией в вакууме.
Разработчики: ВНИИХСЗР, Ф.Р.Мельцер, К.Ф.Новикова.
13
2.1.2. Избирательность метода.
Метод селективен, фосфооорганические пестициды, симм-триазиновые гербициды, байлетон. байтан. ридомил определению не мешают. Селективность обеспечивается сочетанием метода ГЖХ и ТСХ.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода Метрологическая характеристика метода представлена з таблице I.
|
Объект |
Диапазон
из
меряемых
кон
центраций.
мг/кг |
Предел обнаружения, нг |
Среднее I значение ] опеделе- | ниа С при
в-15,% |
Стандартное отклонение S при гг-15,±
V
/о |
Ловери- | тельный ин-! | те рвал | среднего \ определения при FMJ.95 гг-5 V
____л» |
Размах варьирования Я
э/
! /о |
|
ГЖХ |
|
Картофель 1 |
Г 0.04-2.4 1 |
i 3 |
1 88.9 ! |
1 7.1 i |
1 88.9=8.8 1 |
1 80.2-100 |
|
Сахарная
свекла |
0,04-2,4 |
3 |
j 78,1 |
7,3 |
78 Д ±9,1 |
70.0-91,6 |
|
Огурцы 1 |
1 0.04-2.4 1 |
1 3 |
! 86.9 1 |
1 7.4 | |
1 86.9ДЯ.2 V 73.9-98.3 |
|
Томаты 1 |
1 0.04-2.4 1 |
1 3 |
1 81.9 1 |
1 9.9 1 |
1 81.9=12.2 1 |
I 70.5-98.0 |
|
Виноград 1 |
1 0.04-2.4 1 |
1 3 |
1 88.0 < |
1 6.5 ! |
1 88.0±S.I 1 |
i 70.0-95.0 |
|
Почва i |
1 0.2-12.0 1 |
1 3 |
1 83.8 |
i 9.3 1 |
1 83.8=11.6 ! |
! 70.5-98.0 |
|
Вода |
1 0.002-0.12 ! |
! 3 |
1 81.5 i |
I" 9.2 i |
1 81.5=11.4 ■ |
70.0-98.0 |
|
ТСХ |
|
О во ши |
1 0.04-0.20 |
1 0.2 |
i 81 |
> (2 |
го
Н |
1 60-100 |
|
Почва |
! 0.1-0.5 |
i 0.2 |
i 78 |
t 11 |
! 78-16 i |
i 70-100 i |
|
Вола |
1 0.004-0.020 |
' 0.2 |
1 81 |
! 13 |
зо
I* |
70-100 * |
2.2. Реактивы и растворы.
Гексан, хч., ТУ 6-09-3375-78.
Адетон, хч.. ГОСТ 2603-79.
Этил ацетат, хч., МРТУ 6-09-6515.
Хлороформ, чда., ГОСТ 20015-74.
Оксид алюминия 2 степени активности по Брокману, нейтральный, производства ВНР. Р ел нал или отечественный, для хроматографии. МРТУ 6-09-5296-68.
Хроматон N-AW-HMDS (0,20-0,25 мм>. ЧССР, Хемапол.
Карбовакс 20М, лолизтиленгликоль 20000-
Сульфат натрия, хч., ТУ 6-09-3675-74, безводный.
Азот газообразный из баллона с редуктором, ГОСТ 9293-74.
Водород из баллона с редуктором, ГОСТ 3022-80. или подучаемый из генератора водорода.
Воздух из баллона с редуктором, ГОСТ 11882-73, или нагнетаемый компрессором.
14
о-Толидин, ТУ 6-09-2232-75.
Хлороводородная кислота. НС1. я., ГОСТ 3118-77, концентрированная.
Перманганат калия, ч., ГОСТ 20490-75.
Уксусная кислота, ч.. ГОСТ 18270-72. ледяная*.
Иодид калия, KI, ч., ГОСТ 4232-74.
2.3. Приборы и посуда.
Хроматограф иЦзет-106” или аналогичный прибор с термоионным детектором.
Хроматографическая колонха стеклянная, длиной 65 см. внутренним диаметром 3 мм.
Хроматографическая камера с пришлифованной крышкой, ГОСТ 25336-
82.
Хроматографическая колонка с краном и оттянутым носиком, длиной 10 см, внутренним диаметром 1 см.
Микросублиматор, рис. 1.
Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73 или аналогичный.
Пульверизатор, ГОСТ 25336-82.
Лампа УФ -света, ТУ 16-535-280-74, или аналогичная.
Эксикатор, ГОСТ 25336-82.
Чашка Петри, ГОСТ 25336-82.
Градуированные пробирки, ГОСТ 1770-74, с пробками на шлифах, вместимостью 10 и 5 мл.
Микрошприц на 100 мкл или микропипетка, ГОСТ 20292-74, на 0,1 мл.
Делительные воронки, ГОСТ 25336-82, вместимостью I л.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.
Колбы плоскодонные, ГОСТ 9737-70, вместимостью 500 и 250 мл.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.
Колбы грушевидные, ГОСТ 9737-70, вместимостью 50 мл.
Воронки химические, ГОСТ 25336-32.
Пластинки хроматографические “Siluroi” или “SorbfiT, ТУ 26-11-L7-89, производство ПКБ Пласгмаш, ИВС АН СССР, г.Краснодар.
2.4. Отбор, хранение и подготовка проб.
2.4.1. Отбор проб.
Отбор проб хтя анализа проводят з соответствии с “Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микрохоличеств пестицидов”,утвержденными Минздравом СССР 21 августа 1979 г. S 2051-79.
2.4.2. Подготовка проб к анализу.
Для анализа картофеля, томатов, огурцов, сахарной свеклы из отдельных клубней или плодов ножом вырезают сектора толщиной 2-J мм и измельчают их на мелкие дольки. Для анализа винограда отбирают 2-3 ягоды из каждой грозди и также измельчают ножом.
15
Подготавливают по 3-5 параллельных навесок анализируемых образцов, массой 50 г. Почву просеивают через почвенное сито и отбирают назесхл массой Юг.
2.5. Подготовка х определению.
2.5.1. Приготовление стандартных растворов.
Стандартный растзор оксалихсила из очищенного препарата с содержанием действующего вещества не менее 95,0% - в ацетоне с концентрацией 100 (раствор N 1) и 10 (растзор N 2) мхг/мл. Стандартные растворы стабильны при хранении в темяом месте при температуре 22-24° С з течение 6 месяцев.
2.5.2. Приготовление проявляющих реагентов.
Проявляющий реагент. Растворяют 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной зоды я прибавляют I г иодида калия. Растзор хранят в темной склянке. Годен к употреблению в течение длительного зремени.
2.5.3. Подготовка газохроматографической колонки.
Для приготовления насадки колонки для хроматографического анализа жидкую фазу карбовакс 20 М в количестве 2% от веса хроматона помешают в круглодонную колбу и растворяют в хлороформе. Объем хлороформа должен быть в два раза больше насыпного объема сорбента и должен занимать не более 1/3 объема круглодонной колбы.
В полученный раствор при постоянном перемешивании насыпают хрома-тон. Колбу подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и перемешивают содержимое колбы без подогрева в течение нескольких минут. Затем колбу помешают в горячую водяную баню и отгоняют растворитель полностью с подсоединением слабого вакуума. Сорбент с нанесенной фазой высыпают в фарфоровую чашку и нагревают в сушильном шкафу при 80-100 3 С в течение 30 мин, охлаждают на воздухе, перемешивая стеклянной палочкой. Подготовленный таким образом носитель хранят в стеклянной склянке с притертой пробкой.
Хроматографическую колонку заполняют насадкой с подсоединением слабого вакуума. Колонку кондиционируют при скорости азота 70-80 мл/мин з режиме программирования температуры от 50 до 240° С со скоростью нагрева 2е С в мин, а затем в изотермическом режиме при 240° С з течение 6-8 час без подсоединения колонки к детектору.
2.5.4. Приготовление колонки с оксидом алюминия
В стеклянную хроматографическую колонку помешают затный тампон, затем суспензию 4 г оксида алюминия в 15 мл хлороформа <при открытом кране колонки). Когда сорбент заполнит всю колонку, дают возможность стечь избытку растворителя, оставляя маленький, слой его <0,2-0.3 cmi на поверхности оксида алюминия. Кран закрывают.
2.5.5. Подготовка хроматографических камер.
Хроматографическую камеру за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей: хлороформ и гексан: ацетон <3:2)
L6
для насыщения камеры парами подвижного растворителя. Объем ползижного растворителя з камере должен по высоте находиться не выше, нем на 0.7-1.0 см от уровня дна камеры.
2.5.6. Подготовка хлорирующей камеры
Камеру для хлорирования готовят следующим образом: на дно эксикатора помещают чашку Петри с 5 г КМп04 , а затем к ее содержимому осторожно приливают 15 мл концентрированной HCI. Эксикатор закрывают пр и шлифе ванной крышкой. Камера может быть использована через 10-15 мин.
2.6. Описание определения
2.6.1. Экстрахпия и очистка экстрактов
2.6.1 Л. Картофель, .томаты, огурцы, виноград, сахарная езекла.
Назеску анализируемой пробы (50 г) помешают в плоскодонную колбу, вместимостью 500 мл, заливают 100 мл этил ацетата и проводят экстракцию оксалихсила при помощи механического встряхивания колбы з течение 30 мин. Экстракт фильтруют з круглодонную колбу вместимостью 500 мл. Экстракцию оксадихсяла повторяют еще дважды тем же количеством растворителя. Этила-аетат удаляют с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью. Сухой остаток с помощью 2-3 мл хлороформа количественно переносят на колонку с оксидом алюминия.
Каждый раз дают возможность раствору впитаться в сорбент, открывая кран колонки, но не допуская ее осушения. Во всех случаях над сорбентом должен оставаться небольшой слой растворителя (2-3 мм). Оксадиксил элюируют с колонки 10 мл хлороформа, собирая элюат в круглодонную колбу. Элюирование проводят со скоростью 1 кап/сек. Равномерность потока растворителя обеспечивается вакуумом, регулируемым водоструйным насосом.
Из приемной колбы вместимостью 20-25 мл с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл ацетона. Колбочку закрывают пришлифованной пробкой и ее стенки тщательно обмывают растворителем. В хроматограф вводят 3 мкл полученного раствора.
При определении методом ТСХ очистки экстракта на колонке с оксидом алюминия, как правило, недостаточно. Для этого дополнительно вводится очистка михросублимадией з захууме. Для этого из колбы, после отгона растворителя с помощью ацетона оксадиксил количественно переносится з патрон сублиматора и растзоритель ари нагревании патрона сублиматора на горячей водяной бане полностью удаляется. Необходимо стелить, чтобы остаток равномерно распределялся по дну патрона. В патрон сублиматора вставляют "палец" сублиматора, подсоединяют водяное охлаждение и сублимируют оксадиксил при 0.3 мм рт.ст. на кипящей водяной бане з течение 40 мин.
Посте охлаждения сублиматора и снятия вакуума “палец" вынимают из патрона и смывают оксадиксил с “пальца" в градуированную пробирку вместимостью 5 мл ацетона. В пробирку вставляют заставленный а верхней части стеклянный капилляр и концентрируют ее содержимое на горячей водяной бане
17
