МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Сборник № 25

Москва 1997 г.

Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

ТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 25

Москва

Центр научно-технической информации, пропаганды и рекламы 1997г.

---- -ТТЛ I : | Т I : ' V : : • 1 £-. . ; : 1.1. . . ■ —-- / 7 - 1 / . / / / - - / / / / I \т гг. ъ ' —

I I •    I C. _ M- _ Z - -0 -

Рис, £ «. Хроматограммы образцов хлопкового масла: соыален (стандарт) - ОД мкг/мл; контроль (без внесения); внесено в образец - ОД мг/кг.

Усилитель 16x10-^. Непод. фаза ОУ-17    3%,    3    м.    Цвет    550.

102

Рис. Ч , Хроматограммы образцов семян хлопчатника: сонален-ОД мкг/мл; контроль (без внесения); внесено в образец- 0,2мгА Усилитель 16x10¹. Неподш. фаза ОУ-17 3%, 3 м. Цвет-550.

104

Алфавитный указатель

стр.

1. 2-Амино-4,6-днмстил-1.3-пиримилнн - 9 2. 2-Амнно-4-лиметнламнно-6-хлор~1.3.5-триазин - 16.21 3. 2-Метил-4-лнметнламннометил-бензнмнлазол-5-ол-днгилрохлорнл -5 4. 2-Метокснкарбонкл-М-(4.б-лнмсткл-1.3-пирнмнлнн-2ил>-ямннокарбонкл- бензо л сульфамид - 45 5. 2-Метокснкар6оннл-М-(4.6-лнметнл-1.3-пнрнмндн11-2ил')-ами11окарбоннл- бензолсульфамнд калиевая соль - 45 6. 5-оксн-КЗ-бензоксатнолон -2 - 65 7. N - Г4-метокси-6-метнл~1.3,5-триазин-2ил)-Г'Г -42.5-днметилфенил)сульФо- ннлмочевнна - 70 8. 1Ч-окснд-2,6-лутидина и янтарной кислоты комплекс - 36.40 9. Амбиол -5 10. Аминопиримнднн -9 И. Аминофумаровой кислоты лиметнловый эфир -27 12. Анкор-5 -45 13. Анкор-85 -45 14. Грамекс.метаболит и полупродукт синтеза - 16,21 15. Лигнлроаспарагиновой кислоты лнмстиловый эфир -27 16. Днннконазол - 33 17.1-Карбамоил-3(5)-метилпнразол -51 18. Каскад -73 19. Ленок - 80.87 20. Люцис - 36.40 21- ММП -51 22. Номолт -61 23. Павстим -54 24. Препарат-1 - 80.87 25. Соналан -97 26. Спайк -57 27. Суми-8 -33 28. Тсбутиурон -57 29. Тефлубензурон -61 30. Тиолон -65 31. Утнур -70 32. Флуфеноксурон -73 33. Фосфитов смесь -77 34. Фумар - 27 35. Хардин - 80.87 36. Хлорсульфурона калиевая соль - 80.87 37. Экостим -94 38. Эталфлуралнн -97 39. Эфаль-М.промежуточные продукты синтеза -77

106

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Редакционная коллегия:

Калинин В.Л. -к.с.н., профессор, зав.кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н., Российский институт лекарственных культур; Борисов Г.С.-зав. KTJI РРСТАЗР; Федорова Н.Е.- к.х.н., МНИИГ им.Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ответственный за выпуск - Орехов Д.А., председатель Госхимкомиссии

тел. 207-63-90

Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией защиты растений Департамента химизации и защиты растений Минсельхозпрода РФ.

г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосъемки 11/41 тел.(246) 3-09-52

СОДЕРЖАНИЕ:

1.    Временные методические указания по определению остаточных количеств 2-метил-4-димстиламинометил- бензимидазол- 5 - ол- дигидрохлорида в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91 г. № 6264-91     стр.5

2.    Методические указания по измерению концентраций 2-амино-4,6 диметил-1,3-пиримидина в воде методом жидкостной хроматографии.

29.07.91 г. №6152-91     9

3.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор -

1.3.5- триазина в воде хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6161-91     16

4.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6- хлор-

1.3.5- триазина в воздухе хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6159-91     21

5.    Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии.

29.07.91    г. № 6230-91     27

6.    Методические указания по измерению концентрации диниконазола в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6156-91     33

7.    Методические указания по определению остаточных количеств N-okhch-2,6 -лутидина в воде, почве, зеленой массе люцерны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    №6179-91     36

8.    Временные методические указания по измерению концентраций М-окиси-2,6-лутидина в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6178-91     40

9.    Методические указания по измерению концентраций 2-метоксикарбонил-М-(4,6 -диметил-1,3-пиримидин-2-ил)-аминокарбонил-бензолсульфамида и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом жидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6171-91     45

10.    Временные методические указания по измерению концентраций карбамоил- метил-пиразола в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6236-91     51

11.    Методические указания по измерению концентраций павстима в воздухе рабочей зоны колориметрическим методом.

29.07.91    г.    № 6277-91     54

12.    Методические указания по измерению концентрации тебутиурона в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6199-91     57

13. Временные методические указания по измерению концентраций тефлубензурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91 г. №6234-91

14.    Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии.

29.07.91    г.    №6168-91     65

15.    Методические указания по измерению концентраций М-(4-метокси-б-метил-1,3,5-триазин^-шО-Г'Г -(2,5-диметил фенил) сульфонилмочевина в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6240-91     70

16.    Временные методические указания по измерению концентраций флуфеноксурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91    г.    № 6235-91     73

17.    Методические указания по измерению концентраций смеси фосфитов (промежуточные продукты синтеза препарата эфаль-М) в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г.    №6266-91     77

соли в воде методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6167-91     80

19.    Методические указания по измерению концентраций хлорсульфурона и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. №6170-91     87

20.    Методические указания по измерению концентраций экостима в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г. № 6276-91    ............................................ 94

21.    Методические указания по определению остаточных количеств эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6244-91    ............................................ 97

Алфавитный указатель.     106

4

Утверждено Министерством здраво охранения России “29” июля 1991 г.

№ 6244-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЭТАЛФЛУРАЛИНА В СЕМЕНАХ ХЛОПЧАТНИКА И ХЛОПКОВОМ МАСЛЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ.

Настоящие методические указания являются дополнением к временным методическим

указаниям по определению соналана в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами (№ 3200 от 03.01.85).

1. Краткая характеристика препарата.

Торговое наименование: соналан.

Фирма-производитель: ДауЭланко (США).

Действующее вещество: эталфлуралин.

2,6-динитро-4-трифторметил-1Ч-этил (2-метил-З-пропенил) анилин.

NOz

Мол. масса 333,26.

Брутто-формула: C13H14F3N3O4.

Химически чистый эталфлуралин представляет собой кристаллическое вещество желто-оранжевого цвета с температурой плавления 55-56°С и давлением паров 0,11 мПа ( при 25°С).

Растворимость в воде - 0,3 мг/л при 25°С. Хорошо растворяется в жирах, органических растворителях, в том числе в ацетоне (500 г/л), ацетонитриле, хлороформе, метаноле (82 г/л), метиленхлориде, ксилоле (500 г/л), бензоле.

Период полураспада в почве составляет 25-46 дней. Стабилен в воде при значениях pH 3-9 свыше 33 дней. Быстро разрушается под действием ультрафиолетового излучения.

Малотоксичен для теплокровных. ЛД50 более 2000 мг/кг.

МДУ в плодах арбуза - 0,05 мг/кг, в хлопковом масле, сое, подсолнечнике - не допускается.

Разработчики: Калинин В.А., Калинина Т.С., Довгилевич А.В., Довгилевич Е.В., Сельхозакадемия им. К.А. Тимирязева (г. Москва).

Применяется для борьбы с сорняками на посевах сои, хлопчатника, подсолнечника, рапса, клещевины в виде 33% концентрата эмульсии при норме расхода 2,0-4,0 л/га.

2. Методика определения эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии.

2.1.    Основные положения

2.1.1.    Принцип метода.

Метод основан на извлечении эталфлуралина ацетонитрилом, очистке экстракта путем перераспределения в концентрированную серную кислоту с последующей перегонкой с водяным паром и экстракции из дистиллята в гексан с последующим газохроматографическим определением с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов. Минимально детектируемое количество - 0,1 мкг в пробе. Нижний предел обнаружения -0,01 мг/кг масла и 0,02 мг/кг семян.

2.1.2.    Избирательность метода.

Определению не мешает присутствие в пробах трефлана, имеющего близкое время удерживания.

2.1.3.    Метрологическая характеристика метода.

Таблица 1.

Анализнруе мый объект и Метрологические параметры, р=0,95 Предел обнаруж. мг/кг (л) Диапазон определяемых конц. мг/кг (л) Среднее значение определ. % Стандартн. отклонение S,% Доверит, интервал среднего результ. % Семена хлопчатни ка 15 0,02 0,02-0,5 83,4 2,53 ±4,5 Хлопковое масло 15 0,01 0,01-0,5 78,8 2,00 ±3,4

Полнота определения соналена в семенах и масле хлопчатника (5 повторностей для каждой концентрации)

2.2. Реактивы и материалы.

Эталфлуралин с содержанием д.в. 99,8%. Н-гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-74.

Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-76.

Кислота серная, концентрированная, ч, ГОСТ 4204-77.

Насадки для колонки: 3% OV-17 на Инсртоне-супср, размер частиц 0,16-0,20, Хсмапол ЧСФР.

5% ХЕ-60 на Инсртоне-супер, размер частиц 0,12-0,16 , Хемапол ЧСФР.

2.3.    Приборы и посуда.

Газовый хроматограф Цвет-550 с детектором постоянной скорости рекомбинации.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 или аналог.

Микрошприц МШ-ЮМ ТУ 2.833.106,

Колбы грушевидные на шлифах КШ50 29-32 ТС, ГОСТ 10384-72.

Колбы конические на шлифах KLU500 29/32 ТС, ГОСТ 10384-72.

Воронки делительные ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.

Воронки конические, диаметр 5 см.

Прибор для перегонки с водяным паром.

Встряхиватель механический ,ТУ 64-1-1081-73.

Водоструйный насос, ГОСТ 10696-75.

2.4.    Отбор проб.

Отбор проб производится в соответствии с “Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и обьектов окружающей среды для определения микроколичсств пестицидов” (№ 2051-79 от 21.08.79). Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Перед анализом семена измельчают на мельнице.

2.5 Подготовка к определению.

2.5.1.    Подготовка и кондиционирование колонки.

Готовую насадку (5% ХЕ-60 или 3% OV-17 на Инертоне-супср) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 240°С или 280°С в течение 8-10 часов.

2.5.2.    Приготовление стандартных растворов.

Взвешивают 50 мг зталфлуралима в мерной колбе на 50 мл, растворяют навеску в гексане и доводят обьем до метки гексаном (стандартный раствор №1, концентрация 1 мг/мл). Стандартный раствор №1 можно хранить в холодильнике в течение 1 месяца. Методом последовательного разбавления готовят стандартный раствор №2 с концентрацией 10 мкг/мл.

Для построения калибровочного графика из раствора с концентрацией 10 мкг/мл готовят последовательным разбавлением стандартные растворы с концентрациями:

0,1; 0,05; 0,025 и 0,01 мкг/мл соответственно.

2.6. Описание определения.

2.6.1.    Экстракция и очистка экстракта.

2.6.1.1.    Семена хлопчатника.

Навеску 5 г семян заливают 50 мл ацетонитрила, встряхивают 2 часа и оставляют на ночь. После выстаивания встряхивают еще 1 час, затем фильтруют методом декантации не

99

перенося массу на фильтр. Навеску семян заливают еще раз 50 мл ацетонитрила, встряхивают 1 час и фильтруют, тщательно отжимая массу стеклянной палочкой. Объединенные фильтраты упаривают при температуре не свыше 35°С (!).

К сухому остатку в концентраторе добавляют 10 мл концентрированной серной кислоты. В перегонную колбу прибора для перегонки с паром помещают 50 мл дистиллированной воды, добавляют сернокислотный раствор, ополаскивают концентратор два раза водой общим объемом 50 мл и водные объемы собирают вместе в перегонной колбе. Далее отгоняют с паром 200 мл дистиллята. Дистиллят переносят в делительную воронку, экстрагируют гексаном 3 раза (50: 50: 30 мл), встряхивая воронку не менее одной минуты. Гексановые фракции объединяют и промывают дистиллированной водой 3 раза но 100 мл. Отмытую гексановую фазу пропускают через безводный сульфат натрия в концентратор и упаривают при температуре не свыше 35°С. К остатку в концентраторе добавляют 10 мл гексана и вводят в хроматограф 5 мкл пробы.

2.6.1.2.    Хлопковое масло.

Навеску 10 г масла помещают в делительную воронку и экстрагируют четыре раза ацетонитрилом (порциями 50, 25, 25 и 25 мл соответственно). Объединенный ацетонитрильный экстракт упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре бани нс выше 35°С.

Далее сухой остаток обрабатывают как указано в разделе 2.6.1.1.

2.6.2.    Условия хроматографирования.

Газовый хроматограф Цвст-550 с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов. Рабочая шкала электрометра 16 х Ю¹⁰ . Скорость движения ленты самописца 240 мм/час.

Колонка стеклянная длиной 3 м и внутренним диаметром 3 мм с 3% OV-17 на Инсртонс-суиер.

Температура: термостата колонок - 160°С, термостата детекторов - 300°С, термостата испарителя - 200°С.

Расход газа-поситсля (азот марки ОСЧ) 30 мл/мин.

Абсолютное время удерживания - 5 мин 10 сек.

Альтернативная фаза: 5% ХЕ -60 на Инсртоне-супер. Длина колонки 2 м, внутренний диаметр 3 мм.

Температура: термостата колонок - 190°С, термостата детекторов - 300°С, термостата испарителя - 230°С.

Абсолютное время удерживания - 3 мин 52 сек.

Объем пробы, вводимой в испаритель - 5 мкл. Линейная зависимость сигнала детектора от количества вводимого вещества сохраняется в диапазоне 0,05-0,10 нг.

2.7. Обработка результатов анализа.

Содержание эталфлуралина в пробе расчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

Х= Hi. А. V.P Но . m . 100

где:

X - содержание гербицида в пробе, мг/кг;

Но - высота пика стандарта, мм;

Hi - высота пика образца, мм;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования (мл); ш - масса анализируемого образца, г;

Р - содержание эталфлуралина в аналитическом стандарте.

100

3. Требования техники безопасности.

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными прибора

101