МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Сборник № 25

Москва 1997 г.

Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

ТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 25

Москва

Центр научно-технической информации, пропаганды и рекламы 1997г.

Хроматограмма экстракта амкнопнркмнднна «о воды с концентрацией 0,01 мгУл

Рнс.2.

1 -амннопнримиднн

Алфавитный указатель

стр.

1. 2-Амино-4,6-днмстил-1.3-пиримилнн - 9 2. 2-Амнно-4-лиметнламнно-6-хлор~1.3.5-триазин - 16.21 3. 2-Метил-4-лнметнламннометил-бензнмнлазол-5-ол-днгилрохлорнл -5 4. 2-Метокснкарбонкл-М-(4.б-лнмсткл-1.3-пирнмнлнн-2ил>-ямннокарбонкл- бензо л сульфамид - 45 5. 2-Метокснкар6оннл-М-(4.6-лнметнл-1.3-пнрнмндн11-2ил')-ами11окарбоннл- бензолсульфамнд калиевая соль - 45 6. 5-оксн-КЗ-бензоксатнолон -2 - 65 7. N - Г4-метокси-6-метнл~1.3,5-триазин-2ил)-Г'Г -42.5-днметилфенил)сульФо- ннлмочевнна - 70 8. 1Ч-окснд-2,6-лутидина и янтарной кислоты комплекс - 36.40 9. Амбиол -5 10. Аминопиримнднн -9 И. Аминофумаровой кислоты лиметнловый эфир -27 12. Анкор-5 -45 13. Анкор-85 -45 14. Грамекс.метаболит и полупродукт синтеза - 16,21 15. Лигнлроаспарагиновой кислоты лнмстиловый эфир -27 16. Днннконазол - 33 17.1-Карбамоил-3(5)-метилпнразол -51 18. Каскад -73 19. Ленок - 80.87 20. Люцис - 36.40 21- ММП -51 22. Номолт -61 23. Павстим -54 24. Препарат-1 - 80.87 25. Соналан -97 26. Спайк -57 27. Суми-8 -33 28. Тсбутиурон -57 29. Тефлубензурон -61 30. Тиолон -65 31. Утнур -70 32. Флуфеноксурон -73 33. Фосфитов смесь -77 34. Фумар - 27 35. Хардин - 80.87 36. Хлорсульфурона калиевая соль - 80.87 37. Экостим -94 38. Эталфлуралнн -97 39. Эфаль-М.промежуточные продукты синтеза -77

106

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Редакционная коллегия:

Калинин В.Л. -к.с.н., профессор, зав.кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н., Российский институт лекарственных культур; Борисов Г.С.-зав. KTJI РРСТАЗР; Федорова Н.Е.- к.х.н., МНИИГ им.Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ответственный за выпуск - Орехов Д.А., председатель Госхимкомиссии

тел. 207-63-90

Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией защиты растений Департамента химизации и защиты растений Минсельхозпрода РФ.

г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосъемки 11/41 тел.(246) 3-09-52

СОДЕРЖАНИЕ:

1.    Временные методические указания по определению остаточных количеств 2-метил-4-димстиламинометил- бензимидазол- 5 - ол- дигидрохлорида в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91 г. № 6264-91     стр.5

2.    Методические указания по измерению концентраций 2-амино-4,6 диметил-1,3-пиримидина в воде методом жидкостной хроматографии.

29.07.91 г. №6152-91     9

3.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор -

1.3.5- триазина в воде хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6161-91     16

4.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6- хлор-

1.3.5- триазина в воздухе хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6159-91     21

5.    Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии.

29.07.91    г. № 6230-91     27

6.    Методические указания по измерению концентрации диниконазола в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6156-91     33

7.    Методические указания по определению остаточных количеств N-okhch-2,6 -лутидина в воде, почве, зеленой массе люцерны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    №6179-91     36

8.    Временные методические указания по измерению концентраций М-окиси-2,6-лутидина в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6178-91     40

9.    Методические указания по измерению концентраций 2-метоксикарбонил-М-(4,6 -диметил-1,3-пиримидин-2-ил)-аминокарбонил-бензолсульфамида и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом жидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6171-91     45

10.    Временные методические указания по измерению концентраций карбамоил- метил-пиразола в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6236-91     51

11.    Методические указания по измерению концентраций павстима в воздухе рабочей зоны колориметрическим методом.

29.07.91    г.    № 6277-91     54

12.    Методические указания по измерению концентрации тебутиурона в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6199-91     57

13. Временные методические указания по измерению концентраций тефлубензурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91 г. №6234-91

14.    Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии.

29.07.91    г.    №6168-91     65

15.    Методические указания по измерению концентраций М-(4-метокси-б-метил-1,3,5-триазин^-шО-Г'Г -(2,5-диметил фенил) сульфонилмочевина в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6240-91     70

16.    Временные методические указания по измерению концентраций флуфеноксурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91    г.    № 6235-91     73

17.    Методические указания по измерению концентраций смеси фосфитов (промежуточные продукты синтеза препарата эфаль-М) в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г.    №6266-91     77

соли в воде методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6167-91     80

19.    Методические указания по измерению концентраций хлорсульфурона и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. №6170-91     87

20.    Методические указания по измерению концентраций экостима в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г. № 6276-91    ............................................ 94

21.    Методические указания по определению остаточных количеств эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6244-91    ............................................ 97

Алфавитный указатель.     106

4

Утверждено Министерством здравоохранения СССР “29”июля 1991 г.

№ 6152-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 2-АМИНО-4,6-ДИМЕТИЛ-1,3-ПИРИМИДИН А В ВОДЕ МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

1. Краткая характеристика препарата.

2-амино-4,б-диметил-1,3- пиримидин (а ми но пиримидин) - является полупродуктом получения препаратов “Анкор-5” и “Анкор-85”, рекомендуемых в качестве гербицидов, и представляет собой тонкодисперсный порошок светлосерого и белого цвета.

Структурная формула

N    С    Н    з

Эмпирическая формула Сб Ш N3 .

Молекулярная масса 123,0

Растворяется в воде, метаноле, этаноле, метиленхлориде и хлороформе.

ЛД50 для крыс - 970 мг/кг.

ОБУВ аминопиримидина для воды - 20 мкг/л.

2. Методика определения аминопиримидина.

2.1.    Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода.

Определение основано на извлечении анализируемого вещества из воды, насыщенной NaCI, экстракцией метиленхлоридом, концентрировании вещества упариванием растворителя и последующем определении его методом жидкостной хроматографии с УФ-детек-гором (226 нм) на колонке, заполненной насадкой Силасорб-600.

2.1.2.    Избирательность метода.

Метод обеспечивает полную селективность. Определению не мешают полупродукты получения.

2.1.3.    Метрологическая характеристика метода.

Диапазон измеряемых концентраций аминопиримидина в воде от 10 до 50 мкг/л.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 2 мкг.

Разработчики: Лузянин В.П., Петров В.В., Корноухова Н.М., НИИХСЗР, г.Москва.

Нижний предел измерения в воде 10 мкг/л.

Суммарная погрешность не превышает 11,40%.

Время выполнения определения (включая отбор образца) а мин о пиримидина в одной пробе при одновременной подготовке двух параллельных образцов 3 часа.

2.2.    Реактивы, растворы и материалы.

Ацетон, ос.ч., ТУ 6-09-3513-82.

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263-76.

Метилен хлористый, техн., ТУ 6-09-2662-77.

Спирт этиловый, ГОСТ 5963-67.

Спирт изопропиловый, х.ч., ТУ 6-09-402-81.

Гептан нормальный, эталонный, ГОСТ 5.395-70.

Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.

Кислота уксусная, ледяная, ГОСТ 61-75.

Раствор 1:10 в изопропиловом спирте.

Бумага индикаторная, универсальная.

Окись бария, ч., ГОСТ 10203-78.

Натрий хлористый, ч.д.а., ГОСТ 4233-77.

2-амино-4,6-диметил-1,3- пиримидин с установленным содержанием не ниже 98%.

2.3.    Приборы, аппаратура, посуда.

Жидкостной хроматограф Милихром с УФ-детектором, ТУ 25-05-2095-77. Потенциометр ЛКСУ-003, ТУ 25-05-2095-77.

Колонка металлическая 6,3 см, с внутренним диаметром 2 мм, заполненная силикагелем Силосорб-600, с размером частиц 5 мкм.

Цилиндр 4-50, ГОСТ 1770-74.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл, 50 мл и 25 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10, 5, 2 мл с делениями.

Делительные воронки,ГОСТ 25336-82, вместимостью 1000 мл.

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.

Колбы грушевидные, ГОСТ 9737-70, вместимостью 50 мл.

Воронка В-36-50 ХС, ГОСТ 25336-82.

Чашка фарфоровая, ГОСТ 9147-73, вместимостью 250 мл.

Холодильник XI11-1-200-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82.

Линейка измерительная, цена деления 1 мм, ГОСТ 4272-75.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Регулятор температуры УКТ-4 У-2, ТУ 25-111378-77.

Термометр контактный типа ТПК, ГОСТ 9871-61.

Термометр, ГОСТ 215-73, ТЛ-2, цена деления 1 гр.С.

Секундомер механический СОП-пр.2аЗ-000, ГОСТ 5072-79.

Барометр БК-75, ТУ 35-04-223-75, цена деления 0,1 кпа.

Весы аналитические, лабораторные, общего назначения, тип ВЛА-200М, ТУ 25-06-1049-

72.

Весы лабораторные, технические ВЛКТ-500М, 4-ый класс, ГОСТ 24104-80.

Набор разновесов Г-2-210, ГОСТ 7328-82.

Насос водоструйный, ГОСТ 25336-82.

Шкаф сушильный,электрический 2В-151 ,ТУ 64-1-1411-76.

Бюксы СН-60/14 или СН-85/15, ГОСТ 7148-70.

2.4.    Отбор пробы.

Отбор пробы воды производится в соответствии с “Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов”, утвержденными Зам. Главного

Государственного санитарного врача СССР от 21.08.79 г., № 2051-79. Объем средней пробы должен составлять 2 л.

2.5. Подготовка к определению.

2.5.1.    Подготовка колонки и элюента.

Для кондиционирования колонки через нее пропускают 6 мл элюента со скоростью 200 мкл/мин.

Для приготовления элюента смешивают гептан, метанол, изопропанол, хлороформ и уксусную кислоту (1:10 в изопропиловом спирте) в соотношении 60:5,5:3,5:1,5:0,1 по объему Метанол перед употреблением сушат окисью бария (0,5 л метанола - 50 гр. окиси бария); фильтруют и перегоняют.

2.5.2.    Подготовка стандартных и градуировочных растворов.

Стандартные растворы аминопиримидина 500 мкг/мл - раствор №1.

Стандартный раствор используют для приготовления из него градуировочных растворов. Для этого 25 мг аминопиримидина взвешивают в мерной колбе вместимостью 50 мл на аналитических весах, записывая результат до четвертого знака.

После растворения аминопиримидина в хлористом метилене доводят объём до метки, тщательно перемешивая содержимое колбы, и расчитывают концентрацию стандартного раствора с учетом чистоты вещества.

Стандартный раствор № 1 используют для приготовления стандартного раствора № 2. Для этого 10 мл раствора № 1 помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем до метки хлористым метиленом.

Концентрация раствора № 2 соответствует 50 мкг/мл.

Для приготовления воды с известным содержанием аминопиримидина готовят стандартный раствор № 3. Для этого 1 мл раствора № 1 помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем до метки этанолом. Концентрация раствора № 3 соответствует 10 мкг/мл.

Затем, используя стандартный раствор № 2, готовят градуировочные растворы в хлористом метилене:

№4 - 10 мкг/мл №5 - 20 мкг/мл №6 - 30 мкг/мл №7 - 40 мкг/мл №8 - 50 мкг/мл

Стандартные растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 1 месяца при условиях, исключающих испарение раствора.

Способ приготовления градуировочных растворов из стандартного раствора № 2 представлен в таблице I.

11

2.5.3. Построение градуировочного графика.

Для градуировки прибора вводят в хроматограф по 10 мкл каждого градуировочного раствора не менее 3-х раз, измеряют высоту пика линейкой и строят градуировочный график зависимости высоты пика от массовой концентрации аминопиримидина в градуировочном растворе. При данной градуировке необходимо провести измерение коэффициента экстракции аминопиримидина из воды. Коэффициент экстракции определяют по соотношению высоты пика аминопиримидина (экстракт из воды с дозированным количеством аминопиримидина - раствор №3), к высоте пика аминопиримидина градуировочного раствора с той же концентрацией. При использовании градуировочного графика, построенного на основании данных, полученных после экстракции, вводить коэффициент экстракции в расчетную формулу не требуется.

2.6. Описание определения.

2.6.1. Экстракция.

500 мл анализируемой воды помещают в делительную воронку вместимостью 1000 мл, насыщают ее NaCI (150 гр.). Проводят экстракцию 3x50 мл хлористым метиленом в течение 1 мин. Объединенные экстракты переносят в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл, фильтруя через бумажный фильтр, смоченный хлористым метиленом. Раствор упаривают порциями в круглодонной колбе вместимостью 50 мл с дефлегматором (10-12 см) при температуре бани 60±5° С (рис.1). Затем баню убирают и проводят охлаждение установки до комнатной температуры. Через дефлегматор в колбу наливают 0,5 мл хлористого метилена. Колбу снимают, сушат образец на воздухе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл хлористого метилена, тщательно ополаскивая стенки колбы. Полученный раствор хроматографируют.

2.6.2. Условия хроматографирования.

Анализируемый экстракт, подготовленный как было изложено выше, в количестве 10 мкл вводят с помощью дозирующего устройства в колонку хроматографа и записывают хроматограмму не менее 3-х раз.

Проводят определение высоты пика и фиксируют среднюю из трех определений. Хроматограмма ацетонового экстракта представлена на рис.2.

Длина колонки, см.........................................................................................6,3

Внутренний диаметр колонки, мм.................................................................2,0

Насадка колонки.................................................. силосорб-600

Скорость потока элюента через колонку, мкл/мин......................................200

Скорость диаграммной ленты, мм/час............................................................600

Диапазон чувствительности........................................................................0,4-0,8

Объем вводимой пробы, мкл............................................................................10

Объем удерживания, мкл..................................................................................1000

Линейный диапазон определения, иг.....................................................20,0    - 100,0

Длина волны УФ-детектора, нм.......................................................................226

2.7. Обработка результатов анализа.

Перед проведением измерений ежедневно по градуировочному раствору с массовой концентрацией 30,00 мкг/мл проводят коррекцию градуировочной прямой.

Расчет содержания анализируемого вещества в пробе воды проводится по высоте пика методом соотношения со стандартом по формуле:

12

X=CxhxvxKxa hrp x V x в

где:

X - содержание аминопиримидина, мкг/л

С - концентрация анализируемого вещества в градуировочном растворе, мкг/мл

hrp и h - высоты пиков на хроматограммах градуировочного раствора и экстракта, мм

v - объем экстракта после растворения остатка, мл

а - объем градуировочного раствора, введенного в хроматограф, мкл

в - объем пробы экстракта, введенный в хроматограф, мкл

V - объем пробы воды, взятой для анализа, л

К - коэффициент, учитывающий потери при концентрировании

Примечание:

Коэффициент К находят после анализа проб воды, содержащих определенное количество анализируемого вещества по формуле:

А внесено К= Аобиаружено

3. Требования безопасности.

При проведении анализов необходимо выполнять правила техники безопасности при работе со стеклом, электрооборудованием, ЛВЖ, кислотами, а также соблюдать правила производственной санитарии и личной гигиены при работе в химической лаборатории.

13