государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1961

Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаоть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

тектцрования сохраняется в пределах 1-20 нг.

2. 6 Содержание дурсбана в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

Ипр’Чя'⁷

Н * ст а

С - содержание дурсбана в анализируемой пробе мг/кг (мг/л);

Н - высота пика анализируеыой пробы, мм;

Н ст f высота пика стандарта, мм;

С _ст - содержание дурсбана в стандарте, нг;

У_а - объем аликвоты, вводимой в хроматограф, мкл (2 мкл);

У - общий объем рабочего раствора, мл;

А - навеска анализируемой пробы (в пересчете на сухое вещество), г или объем воды мл.

Если при введении в хроматограф получаются слишком большие пи ни или происходи'* "зашкаливание", готовят более разбавленные растворы, добавляя к конечному раствору пипеткой известное количество гексана.

В качестве альтернативной колонки можно использовать стеклянную колонку длиной 2 м и внутренним диаметром 3 мм, заполненную хромато-ном fj АУ'-ДДС^ (0,16-0,20 .мм) с 2* полидиэтиленгликольсукцинатом.

Требования безопасности Общепринятые требования безопасности при работе с горючими растворителями и фосфорорганическими пестицидами.

ABT0PJ

Петрова Т.М., Андреев D.F. - Всесоюзный научно-исследовательский институт зац>1ти растений, Ленинград.

7<f

Стр.

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной

хроматографией -................. 93

7. Методические указания по определению матилнитрофооа,

фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

слое....................... ЮЗ

8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109

тонком слое.................... 118

2.    Методические указания но определению остеточных ко

личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком

сдое и фотометрическим методом .......... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136

5.    методические указания по опр делению ФДН    -ди-

ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной    хроматографии ........ 139

6.    Методические укззаиия по определении дитана М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149

П. Гетероциклические соединения

7.    Методические указании но определению базаграна в

воде, почве, зерне и    растительном    историале ....    152

УЪ

Cip,

6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,

плодах томатов и огурцов..........’.    .    .    159

9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10.    Методические указания по определению диквата в се

менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174

11.    Методические указания по определению метазина в во

де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной

хроматографией .................. 188

13.    Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слоо....................... 198

14.    Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок

сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205

15.    Методические указания по определению тачигьренэ в

вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209

1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214

17.    Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в

воде....................... 220

18.    Методические указании по определению остаточных ко

личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227

19.    Методические указания но определению остаточных ко

личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной    хроматографией ....    234

Прочие пеотигиды

I. Методические указания по определению остаточных.

количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ

2.    Методические указания по определению нортроаа в

ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8

3.    Методичеокие указания по определению содержания

общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J

Бактериальные пестициды

1.    ?Летодические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268

2. U*годические указания по определению виталичина А

j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276

3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260

тов в воде, почве и растительном материале ......... 289

2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика

растительной продукции, почве и воде ................. 296

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

"УТВЕРВДАЮ"

ЗАМЕСТИТЕЛЬ ГЛАВНОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО САНИТАРНОГО ВРАЧА СССР А, И.ЗАЙЧЕНКО 19 октября 19/9г    %    2С97-79

МЕТОДЧЕПКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ШРЕДОШГО ОСТАТОФЫХ КОШЧЕЕТВ ДУРСБАНА В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ, ПОЧВЕ И ВОДЕ ТОШООСЛОШОЯ И ГА30ШДК0СТН0Й ХРСЫАТОГРАШЕЙ

I. Краткая характеристика препарата

Дурсбан

О, О-диэтил-О- (3 5,6-трихлорпиридил )тиофосфат

^(С2^Н5⁰⁾2^Р-^_//Л<^    ^С^цОз^СХ₃^    Р

Мол. масса 350,59

Дауко 179, 5НТ 273II, хлорпирифос

Чистое вещество дурсбана - б^лые кристаллы со слабымС запахе-* меркаптана. Давление пара 1,9* 10 мм рт. ст. при 25°С. Растворимость в воде 0,0002 г в 100 мл. Хорошо растворим в большинстве органических растворителях.

Инсектицид стабилен длительный период при комнатной температуре в нейтральной и слабокислой среде. Скорость химического распада

увеличивается пропорционально повышению температуры и pH.

Устойчивость к воздействию УФ-света снижается при повышена влажности. Дурсбан 40% э.к. рекомендуется для испнтенлй на хлопчатнике

против хлопковой совки, карадрины и cocyn^tx вредителей (1,5-2,0 кг/га)

в борьбе с колорадским жуком на картофеле (1,2-2,0 кг/га) на плодовых культурах против яблонной плодожорки, клещей и тлей в концентрации 0,2#, на свекле в борьбе с обыкновенным свекловинным долгоносиком в дозировке I,5-2,0 кг/га.

Гранулированный дурсбан представляет интерес в борьбе с подгрызающими совками на табаке, хлопчатнике, а также с проволочниками на кукурузе, картофеле,

Дурсбан высокотоксичен для теплокровных, ДЦзд для крыс при оральном введении - 135 - IC3 мг/кг.

ПДК и ДОК дурсбана в продуктах питания, воде и почве вир не установлены.

2, Методика определения дурсбана

2.1, Основные положения 2.'1.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции дурсбана из проб смесью ацетона с 0,05 н водным раствором хлорида кальция (1:1), очистке перераспределением в н-гексан и хроматографическом (ТСХ К Г£Х ) определении.

Хроматографическое в тонком слое определение проводится на пластинках со слоем силикагеля марки КСК или на "Силуфоле - 1//254". Хроматографируют в системе н-гексан-ацетон ( 9:1 ), проявляют пластинки 2,6-дибром- fJ -хлорхшюиимином или другими пригодными для фосфорорганических инсектицидов проявителями.

Для газохроматографического определения используют детектор/»/2F// по захвату электронов (ДЭЗ) или постоянной скорости рекомбинации (ДЦР), колонка стеклянная с 5^ £-30 на хроматоне/у-    ,

длиной I м.

2.1.2, Метрологическая характеристика метода

_л тех    ГаХ

• жним&льно детектируемое количество 0,D - 3 мкг I нг

68

	тех	ш
Нижний предел определения	0,1-0,5мг/кг	0,000-0,01мг/кг
	0,1 мг/л	0,002 мг/л
Р размах варьирования, S	t 4,°	t 4,0
с среднее значение определения,	,* 96,4*	90,4*
J стандартное отклонение, &	3,3	3,3
Доверит^л^ыЛ интервал^среднего при		9о±4

2.1.3, Избирательность метода

Другие ФОН не мешают определению,

2.2. Реактивы и растворы

Ацетон, ч. ГОСТ 2603-03

Гексан, х.ч., ИРТУ 6-09-2937-06

Кальций хлористый,х.ч., ГОСТ 4IGI-07

Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4106-66

Уголь активированный марки НАД или ОУ-А

Силикагель КСК с флуоресцирующей добавкой или пластинки "Силуфол UУ -264”

Окись алюминия для хроматографии МРТУ 6-09-5290-66-4

Е-30 на хроматонеА/-АУ-Л^ (0,10-0,20)

Проявляющие реактивы:

1.    0,5%-ныЯ раствор 2,6-дибром- N -хлорхинонимина в гексане

2.    1#-ныЯ раствор 4-(р-нитробензил)пиридина в ацетоне;

Ю#-ный раствор тетраэтиленпентамина в ацетоне

3. БромфеноловыЯ синий (0,03 г бромфенолового синего раст-воряют в 10 мл ацетона, затем смесь разбавляют до 100 мл 0,596-ным водно-ацетоновым раствором азотнокислого серебра /I ч. воды: 3 ч. ацетона/); ЭД-мыв раствор уксусной кислоты

Азот особой чистоты

Стандартные растворы дурсбана: 0,1 - 1,0 мкг/мл в гексане

2* полиэтиленгликольсукцинат на хроматоье М'АУ-ДЛС^^(0,10-0,2мм. ( дяп альтернативной колонки).

69

Водород

2.3.    Приборы и посуда

Хроматограф Цвет-106 или аналогичный прибор с детектором термоионным или по захвату электронов (постоянной скорости рекомбинации)

Аппарат для встряхивания

Ротационный вакуумный испаритель _или другой прибор для отгонки растворителей под вакуумом

Хроматоскоп (хемоскоп) с излучением 250-280 нм

Колбы конические со шлифами на 250-500 мл

Колбы круглрдонные на 100 - 500 мл

Делительные воронки на 0,5 -1,0 л

Колбы мерные на 100 мл

Колонки для адсорбционной хроматографии длиной 30 см,

внутренним диаметром 16 мм

Хроматографическая камера

Камера для опрыскивания хроматограмм

Пульверизаторы

Пипетки на 0,1 ил, I мл, 5 мл, 10 мл Почвенное сито Микрошприц на 10 мкл

Центрифуга с центрифужными пробирками на 100 мл

Цилиндры мерные с притертой пробкой на 50 мл

2.4.    Отбор проб и подготовка их к анализу

Растительную пробу (картофель, лук, яолони, сено, силос ж листья зеленых растений, в тем число хлопчатника)

измельчают ножом на кусочки 0,5 см^ и отбирают среднюю пробу 25 г.

Почву в естественно-влажном состоянии или воздушно-сухую просеивают через почвенное сито и отбирают для анализа среднюю пробу 10 Проба воды - 100 мл.

5 Проведение определения

Анализируемые навески помецрют в конические колбы, пробы

воды - в делительные воронки, куда добавляют по 5 г хлористого кальция.

Из растений дурсбан экстрагируют смесью ацетона с водой (1:1) триады по 40-50 мл, из почвы - 50 мл смеси ацетона с 0,05 н водным раствором хлористого кальция (1:1). К пробам воды в делительные воронки добавляют равный объем ацетона. Экстракцию инсектицида из проб производят с помО'дью механическогг встряхивания в течение 30 мин (для воды и растений) или 1-1,5 час. для почвы при комнатной температуре. Далее пробы центрифугируют при 3000 об/мин (центрифугирование можно заменить фильтрованием). Объединенные экстракты из растительных проб, а также пробы воды охлаждают в холодильнике или в смеси льда с солью. Выпавший осадок отфильтровывают. Объем центри-фугата (фильтрата) замеряют и количественно переносят (весь или аликвотную часть) в делительную воронку, куда приливают н-гексан в количестве, составляющем меньше половины объема,находящегося там центрифугата, взбалтывают 3-5 мин. После расслоения жидкостей, нижний водно-ацетоновый слой сливают в другую делительную воронку, а гексан-ацетоновую «фракцию собирают в коническую колбу на 100 мл. Ре-0кстракцию гексаном проводят еще два раза. Объединенную гексан-ацетоновую смесь сушат над безводным сульфатом натрия и количественно переносят в колбу для отгона растворителей (с^,лиить гексановую «фракцию можно путем фильтрования через безводный сернокислый на:рий). Растворитель выпаривают на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 40°С. Дальнейшее определение проводят хроматографическими мэтодами.

3 некоторых случаях для растительных проб требуется еще дополнительная очистка. С этой целью .применяют колоночную хроматографию, а именно, пробу, сконцентрированную до 3-5 мл вносят в колонку (30 см х 1,5 см), заполненную слоем сернокислого натрия (2-Зсы), окиси алшпнкя (3 c.vj, актвирогштого угля КАЛ-мслогш! их- СУ-Х

(3 см) и снова безводного сернокислого натрия (I сы). Предварительно через колонку пропускают 30-40 ил хлороформа для уменьшения сорбционной емкости. Из колонки дурсбан элюируют 100 мл хлороформа. Хлороформ удаляют под вакуумом, остаток растворяют в гексане и определяют количество инсектицида хроматографическими методами.

2.5.1 Методы аналитического определения

Проба с помощью калиляра или микропипетки наносится на хромато-тогра^ическую пластинку со слоем силикагеля или на "Силуфол". Параллельно на пластинку наносят серию стандартных растворов с содержанием I, 5 и Ю мкг дурсбана. Хроматографируют в системе гексан-ацетон (9;1). Когда фронт растворителя поднимется от линии старта на Ю см, пластинку вынимают, проветривают и опрыскивают одним из проявляющих реагентов:

1.    Хроматограмху опрыскивают 0,5*-ным раствором 2,6-дибром-^-хлорхинонимина в гексане, затем нагревают в течение 5-7 мин в термовтате при ПО⁰. Дурсбан проявляется в виде оранжевых пятен на светлом фоне. Нижний предел обнаружения 0^5 мкг;

2.    Хроматограмку опрыскивают 1*-ным раствором 4-(р-нитробензил)-пиридине*, нагревают в термостате 3-5 мин при ПО⁰, затем снова опрыскивают 1(Ж-ным раствором тетраотиленпентамина в ацетоне. Дурсбан проявляется в виде сине-фиолетовых пятен на светлом фоне. Нижний предел обнаружения 0,5 мкг.

3.    Хроматограмму опрыскивают бром-феноловым реагентом с последующим снятием фона обработкой пластинки 5&-ным раствором уксусной кислоты. На пластинке проявляются сине-фиолетовые пятна дурсбана на светло-желтом фоне. Нижний предел обнаружения 3 мкг.

Пластинки, со слоем силикагеля, в котор^г,Л внесен флуоресцирующий граситель, или "Силуфол-^/^35*1" -можно без проявления проематривать в хемоскопе. Иноежтицид определяют по ту ению флуоресценции. Нижний предел обнаружении I мкг.

и*

для дурсбана в указанной системе растворителей на "Силу-фоле" 0,66.

Содержание дурсбана в пробе вычисляют по формуле:

, где

0 _Пр - количество препарата, найденное по хроматограмме при сравнении со стандартами, мкг;

А - навеска исследуемой пробы в иг или объем воды в мл;

С - содержание дурсбана в про> г sr/w и. i: кг /г.

Условия определения газожидкостной хроматографией После отгонки растворителя к сухому остатку .'являю? 1-2 мл гексана, колбу закрывают пробкой, тщательно обмывают внутреннюю поверхность колбы. Аликвотную часть раствора (2-5 икл) вводят в испаритель хроматографа.

Для количественного определения дурсбана используют хроматограф Цвет 106 или другой модели с детекторами ДШ или £33 (Д1Р), колонки стеклянные (1СС0х 3 мм), заполне!шые 5%/Е-ЗО на хром&то-не^ -А\аЛ-Д.1С^ (0,16-0,20 мм). Температураииспарителя 220^ (для фЗ) или 250°(дгя ДНО, температура колонки 190°(для ДЗЗ) или 210° (для ДШ), температура детектора 220°(для ДЗ3). Скорость газа-носителл при работе на ДЗЗ CZJTP) 60 мл/мин, продув детектора 150 мл/мин; скорости газов при работе на ДТП - азота 21 мл/мин, водорода 15 мл/мин, воздуха 420 мл/мин. Рабочая шкала электрометра I х 10 Скорость движения ленты самописца 240 ш/час (при работе на ДЗЗ) или бООми/час (при работе на ДШ).

Время удерживания дурсбана в указанных условиях работы ДЗЗЩ1Р)

3 мин 5 с или в указанных условиях работы ДШ 6 мин. 20 сек. Количество дурсбана в пробе проводят методом соотношения со

стандартами по высоте пиков.

3 хроматограф вводят 2 мкл рабочего раствора. Линейность де-

73