ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ

БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ ж ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть I

Москва - 1980

- зв-

УТВЕРЖДАЮ:

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР А,И. Зайченко

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПИКЛОРАМА В ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ГД301ИДК0СТН0Й ХРОМАТОГРАФИИ.

I. Характеристика анализируемого пестицида,

Пиклорам - название по номенклатуре МОС 4-амино-3,5,<$-три-хлорпикс типовая кислота

Молекулярная масса - 2’41,5

На её основе выпускается препараты под коммерческими нязвани-

ями: тордон -(ш) хлорамп -(СССР^

4-амиио-3,5,6-трихлорпиколиновая кислота-бесцветное крчстял-

лическоо вещество с лёгким запахом хлора. Температура пларвения-

20$,5 - 215^С. Разлагается при 215-230°С. Упругость паров при О    -.7

35 С- 6*10 мм рт. ст, Слабо растворяется„в воде и хорошо в диэтиловом эфире, ацетоне, метаноле и этаноле. При 25^С в1 литре воды растворяется 430 мг кислоты. Она легко образует водорастворимые соли с одновалентными катионами.

Острая оральная токсичность ЛД^₀ для крыс - 8200 мг/кг. Кумулятивными и тератогенными свойствами не обладает.

Азотсодержащие пестициды    стр.

11.    Методические указания по определению остаточных

количеств анилата в растительных пробах пшеницы....... 63

12.    Методические указания по определению базаграна в

воде методом газо-жидкостной хроматографии............ 66

13.    Методические указания по определению остаточных

количеств БМК и бенлата по БМК в растительных объектах, почве и воде тонкослойной хроматографией............... 70

14.    Методические указания по определению остаточных

количеств    -лиметилгидраэина янтарной кислоты в

тканях растений фотометрическим методом............... 77

15.    Методические указания по определению димила в

почве,табаке и табачном дыме методом газожидкостной хроматографии.......................................... 81

16.    Методические указания по определению которанз и

диур на в зфирных маслах и в маслосодержащем сырье метолом газо-жидкостной хроматографии.................. 85

17.    Методические указания по определению которана в

воде и почве методом хроматографии в тонком слое.......^0

18.    Методические указания по спектрофотометрическому

фотохимического окисления.............................. 94

19, Методические указания по определение пиклорамо в воде и почве метолом газожидкостной хромэтогра |>ии.....    °9

2О₀ Методические указания гго определению тербачила в продуктах растительного происхождения,рине.виноградном соке,почве,воде,хроматографическими⁰ методами....... 107

2[. Методические указания по определению гербицидов производных тиокарбаминовой кислоты (верном,ронит, сутан ,тиллам,эптам,я.!!зн' л годе,почве,растительном материале,биосубстрэтвх и воздухе гэзо-хроматографическим методом....................................... [17

графией ............................................... Т 28

23. Методические указания по определению фенотиазина в меде методом тонкослойной хроматографии.............. 133

Прочие пестициды

24. Методические указания по определение осте точных количеств формальдегида в почве,воде,продуктах и отхо

дах сахарного производства............................. Г36

25.    Методические указания по определению хлорхолия-

хлорида в растительной продукции,воде и почве методом тонкослойной ионообменной хроматографии,................14Г

Бактериальные пестициды

26.    Методические указания на метод определения трихсте-

иияе в воздухе........... ..154

27.    Методические указания на микробиологический метод

определения гризина в воздухе...........................157

28.    Методические указания по определению полиздров ви

руса ядерного поливдроза непарного шелкопряда в воде, почве,на растительных объектах и в воздухе иммунофлхо-ресцентным метопом..................................... Г61

Препарат приценяется в качестве арборицида и гербицида,

Пиклораы относится к

гербицидам сплошного действия и рекомендуется для уничтожения мвоголетних корнеотпрысковых сорняков в дозе 0,5-3,0 кг/га по действующему веществу. Он обладает длительным отрицательным последействием на культурные растения.

т для боды и почвы не разработаны.

2. Методика определения пиклорама в воде и почве методом газожидкостной хроматографии.

1.1 Методика основана на газохроматографическом определении пиклорама с детектором по вахвату электронов на неподвижных фазах 0V-I7 и 6Е-30 после щелочной экстракции 0,01 н. КОН, перераспределения в диэтиловом эфире и метилирования сухого остатка диазометаном.

Минимально детектируемое количество 0,075 мкг. Линейный динамический диапазон детектирования    12    мкг.

Среднее значение определения стандартных количес:ъ пиклорама в воде - 90-95$, в почве 80-95$ при ГЪ =5.

Метод селективен.

Таблица

Внесено пиклорама мкг !Число парал-! Найдено ! !лельных опре+ пиклора-1 ! делениМИЛ! ма.м*г1 ! 6 1 ! 1 А / »*4?,05- ! 1 10,0 5 8,9 0,34 0,04 8,9+-0.АА 25,0 5 23,1 0,72 0,03 23,110,90 50,0 5 45,1 2,88 0,06 A5.ll3.60

Д.2ЬРе^а' Тивы и материалы. 4-амино-3,5,6-трихлорпиколиновая кислота, х.ч. 98,6$; Ортофосфорная кислота, х.ч.;

Хлористый натрий, х.ч.;

Диавометан;

Метанол, х.ч.;

Диэтиловый эфир, х.ч»;

Нитро8ометилыочевина;

Гидроокись калия, х.ч»;

Бензол, х.ч»;

Н-гексан, х.ч.;

Солянокислый метиламин, х.ч.;

Нитрит натрия, х.ч.;

Серная кислота, х.ч.;

Дистилированная вода;

Окись алюминия;

Флоризил;

Ацетон, х.ч.;

Соляная кислота, х.ч.;

Бикарбонат натрия, х.ч.;

Безводный сульфат натрия, х.ч.

Z.5 Приборы, аппаратура, посуда.

Хроматограф "Цвет" с детектором по захвату электронов; Пенный расходомер;

Механический встряхиватель;

Холодильник;

Роторный испаритель;

Делительные воронки на 250-1000 мл;

Колбы конические на 250-500 мл Химические стаканы;

Прибор для метилирования;

Вакуумный насос;

Обратный холодильник;

Концентраторы;

Нагреватель;

Бумажные фильтры;

Воронки Бюхнера;

Микрошприцы Ш1-1, Ш1-10;

Сито с отверстиями I мм;

фарфоровая ступка и пестик;

Центрифуга;

Стеклянная коленка длиной 180 см, диаметром 3 мм;

Твердый носитель;

Фазы 0V -17 и SE-3G;

Баллон с азотом особой чистоты;

Редуктор кислородный;

Стеклянная колонка длиной 20 см, диаметром 10 мм.

I. Отбор пробы

Образцы почвы отбираются с определенной площади. Высушиваются. Для анализа берут средний образец не менее двукратной повторности.

Аналиэ почвы лучше проводить сразу после отбора образца. Если нет такой возможности, то образцы хранят в холодильной установке при температуре (-10 —20^С).

Перед экстракцией необходимо определить влажность почвы и вести пересчет на абсолютно сухую почву.

Воздушно-сухие образцы почвы тонко измельчают и пропускают через сито с отверстиями I мм.

Д , 4. Подготовка к определению.

1М. Стандартные образцы готовят из химически чистой 4-амкно-3,5,6-тряхлорпиколиновой кислоты с последующим метилированием или из химически чистого метилового эфира этой кислоты. Концентрации пик;.эрана 0,04; 0,1; 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0

- юз -

микрограмма на миллилитр диэтилового эфира* Образцы можно хранить в теином шкафу в течение продолжительного времени (1-2 года).

Длв перевода 4-амино-3,5,6-трихлорпикриновой кислоты в метиловый эфир, сухой остаток метилируют диазометаном.

& Получение нитрозометилмочевины.

£ стеклянную колбу помещают 1,5 моля солянокислого метиламина, 5 молей мочевины и растворяют в 400 мд дистилированной воды. Соединяют колбу с обратным холодильником и нагревают в течение 3 часов. После этого колбу отсоединяют и содержимое переносят в химический стакан на 2000 мл. Добавляют 1,6 моля нитрита натрия. Смесь охлаждают до -10° в емкости со смесью льда и поваренной ооли. Медленно, при постоянном перемешивании переносят в стакан НО г концентрированной серной кислоты. Выпавшее в виде сметанообразной наосы нитросоединение помещают ва бумажный филтр воронки Бюхнера и промывают ледяной водой. Продукт без дальнейаей очистки может быть использован для получения диазометана. Диазометан является ядовитым и взрывоопасным газом с температурой плавления -145° и температурой кипения -23°С. Сосуды с диаэометаном нельзя хранить плотнозакрытыми. Работать с ним необходимо обязательно под тягой.

ХМ Ъ. Условия хроматографирования.

Скорость газа-носителя (азот особой чистоты) через колонку 40 мл/мин, через детектор - 160 мл/мин. Температура испарителя 250°С, температура термостата колонок - 200°С, температура детекторов - 250°С. Шкала электрометра I х    Скорость    дви

жения диаграмной ленты самописца - 820 мм/час. Объем вводимого в испаритель экстракта 2-5 мкл. Относительное время удерживания метилового эфира 4-ау*шо-3,5,6-трихлорш1колиновой кислоты в

этих условиях - 18 сек. Абсолютное вреия удерживания - I мин.

50 с Линейный динамический диапазон детектирования - не более 12 мкг/мл. Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки по высоте пиков.

Я,. 5. Проведение определения.

Почву растирают в фарфоровой ступке и пропускают через сито о отверстиями I мм. Средний образец (50 г) почвы помещают в плоскодонную колбу ёмкостью 250-500 мл, заливают 100 мл 0,01 н. раствором гидроокиси калия, перемешивают на механическом ьстрп-Х*вателе в течение 20 минут. Центрифугируют 10 минут при 50С0 оборотах в минуту. Супернотант декантируют, к осадку прибавляет 50 мл 0,01 н. раствора гидроокиси калия и повторяют экстракцию* Объединенный супернотант подкисляют ортофосфорной кислотой до pH 1-2, прибавляют 40 г хлористого натрия. Затем с помощь» делительной воронки на 250 мл пиклорам трижды экстрагируют из супернотанта (100, 100 и 50 мл) диэткловым эфиром, тщательно перемешивая на механическом встряхивотеле по 20 минут каждый раз. Эфир упаривают на водяной бане или с помощь» роторного испарителя при температуре 40° до объема 20 мл и нриступают к очистке. Почву с низким содержанием органического вещества можно анализировать без очистки. Очистку экстракта проводят на стеклянной колонке, заполненной I г окиси алюминия. Колонку промывают смесью 20 мл ацетона и 20 мл диэтилового эфира. В промытую колонку переносят упаренный экстракт (20 мл). Отмывают его на колонке 20 мл диэтилового эфира, 10 мл подкисленного ацетона (10 мл ацетона + I мл 0,1 н. НС-d- ) и еще раз 10 мл ацетона. После этого 4-амино-3,5,6-трихлорпиколинояуы кислоту элюируют ия колонок 0,25 М раствором бикарбоната натрия. Собирают 20 мл порцию элюата в делительную воронку, подкисляют до pH 1-2 добс шпот 4 г хлористого натрии. Экстрагируют

дважды по 20 мл и один раз 10 мл диэтилового эфира. Объединенный экстракт сушат над I г безводного сульфата натрия. Растворитель удаляют, сухой остаток метилируют диазометаном. Для этого сухой остаток растворяют в смеси метанола - 0,5 мл и свежеприготовленного диэтилового эфира. Все операции проводят в концентраторе (он же является приёмником прибора), который с единяют с реакционной емкостью прибора для метилирования. В реакционную ёмкость прибора помешают 0,5 г нитрозометилмочевинм_# 5 мл диэтилового эфира, 6 мл метанола и хорошо перемешивают. Выходную трубку прибора погружают в раствор, находящийся в приёмнике-концентраторе. В реакционную колбу по каплям приливают I мл 60/6-ноЙ гидроокиси калия. Образующийся диазометан в течение 10 минут пропускают через раствор, который находится в приёмнике. Пожелтевший раствор выдерживают при закрытой пробке концентратора в течение 30 минут.

Растворитель удаляют, оставшийся метиловый эфир 4-амино-3,5,6-трихлорпиколиновой кислоты растворяют в I мл бензола, метанола или н-гексана и аликвот (2-5 мкл) вводят в испаритель хроматографа.

А.,6. Обработка результатов анализа.

Для определения содержания 4-амино-3,5,6-трихлорпиколиновой кислоты методом абсолютной калибровки пользуются формулой:

где J. - содержание пиклсрама, мг/кг

А - количество пиклорама, введенное в хроматограф, мкг V - общий объём экстракта, приготовленного для определения на хроматографе, мл

У - объём экстракта, введенного в хроматограф, мкл Р - навеска анализируемого вещества, г.

ft .7. Требования безопасности.

Все операции с растворителями обязательно проводить под тягой.

3 Настоящие методические указания составлены Поповым В.Г. и единым Б.И., кафедра химических средств защиты растений, ТСХА, _г# Москва.

- m-

СОДЕРМНИЕ

Хлорсодержащие пестициды    стр.

I. Методические указания по определение хлороргани-чесиих пестицидов ( гексахлорциклогекса на .гептахлора, альдрина.ДДЭ.ДДЛ.ЛЛТ) в растительных маслах и животных жирах,фосфатидных концентратах,лузге,жмыхе и шроте методом газожидкостной хроматографии...................I

2». Методические указания по определение гексахлорбутя-диена в почве газохроматографическим методом ......... 7

3.    Методические указания по определению тиодака

■ продуктов его превращения в растительном материале и почве хроматографическими методами........... 10

4.    Спектрофотометрический метод определения остаточных

количеств афоса в зерне и полове пшеницы................17

Фосфорсодержащие пестициды

5, Методические указания по определению базу дина и оксибазудина в растительном материале,почве и воде тонко

слойной и газожидкостной хроматографией........... 23

6.    Методические указания по определению гардоны и его

продуктов превращения в растительном материале я почве хроматографическими методами........................... 31

7.    Методические указания погазохроматографическому

определению 0,0,5-триметнлтиофосфата в растительном материале......................... 40

8.    Методические указания по определению фталофоса в

почве и смывах методом тонкослойной    хроматографии...... 44

9.    Методические указания по определению остаточных

количеств этафоса в воде,почве и растительном материале методом газожидкостной хроматографии.............. 47

10.    Методические указания по определению остаточных