9

Приложение 2

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Главного государственного

санитарного врача СССР

А.И.Ваиченко

Mr 1875 05*06*78 г*

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению хлорорганических пестицидов (гексахяорцикло-гексана, гептахдора, альдрине, ДДЭ, ДДД, ДДТ) в растительных маслах и животных ..прах, фосфатидных концентратах, лузге, жмыхе и шроте методом газожидкостной хроматографии

Физико-химические свойства хлорорганических пестицидов изложены в сборнике “Методы определения ыикроколичеств пестицидов в пред. дтах питания, кормах и внешней среде”, часть УХ, том I, сгр. 6-10.

Принцип метода

Метод основан на экстракции хлорорганических пестицидов из исследуемых объектов Н-гексаном (жидким или парами) и последующей колоночной очистке иЬлучеаных экстрактов»

Идентификация и количественное определение проводится с помощью метода газо-жидкостной хроматографии.

Реактивы и растворы

Н-гексан, х.ч., перегнанный дважды; диэтиловый эфир, ч_м перегнанный; кислота серная, х*ч,, уд. вес 1,84;

натрий сернокислый, х.ч; безводный; смесь дизтилового эфира с Н-гексаном 15:85; кремний окись для люминофоров, ч., растирают в ступке; стекловата, очищенная концентрированной серной кислотой и промытая дистиллированной водой, высушенная;

стандартные растворы х,ч, месгжцидоз л й~гвксяле 0,04 икг/нд и 0,1 мкг/мл;

газ-носитель - азот особой ;истоты;

твеодый носиа ль - хроматом ‘ /Jq.W - ,.iC^ , 10-100 мег с 5; неподвижно** фазы - метилсилоксан $£ -30,

Для приготовления насышанниго рас 'пора безводного сернохис-

ю

лого натрия в сорной кислота навеску 100 г безводного,сернокислого натрия растворяют в I л серной кислоты*

Для приготовления окиси кремния, пропитанной серной кислотой, 2 весовые части окиси кремния помещают в фарфоровую ступку и при растирании заливают одной объемной частью серной кислоты* Пропитку кислотой производят непосредственно перед употреблением,

Приготбвление хроматографической колонки

1.    Для анализа шрота и луаги колонку заполняют на высоту

I см стеклянной ватой, затем вносят на высоту В,5 см окись кремния, после чего колонку заполняют, не утрамбовывая, еще па зысо-ту 2,5 см окисью кремния, пропитанной серной кислотой*

2.    Для анализа жмыха и шрота, обогащенного липидами, растительного масла, животного жира и фосфатидного концентрата нижний сухой слой окиси кремния - 6 см, верхний слой окиси кремния, пропитанный серной кислотой - В см*

При заполнении колонки каждый слой последо зтелъно промывают гексаном (всего 20-30 мл)*

Приборы и посуда

Хроматограф серии "Цвет*¹ (или другой марки) о детектором по захвату электронов;

колонка хроматографическая стеклянная длиной Z м и внутренним диаметром В мм;

микрошприц на 10 мкл; аппарат для встряхивания; ротационный испаритель ИР-1; терыостатируемый экстрактор (см* схему); термометры контактные;

колонки стеклянные хроматографические, диаметр Х5 мм, высота 150 мм;

колбы кпугдодонные на 100 и 250 мл;

колбы конические с нормальными шлифами 250 и 100 мл;

воронки Вюхнера Щ 2 и $ В;

ступки и пестики фарфоровые, диаметр ступь., II0-140 ни; цилиндры мерные; пикнометры на 5 мл и 10 мл;

II

бюксы стеклянные на 20 ил;

пипетки на 5 т; I мл$

шприцы медицинские на X мл;

воронки химические*

Описание определения

I* Экстракция и очистка экстрактов I* Шрот, жмых, лузга*

Навеску шрота (обогащенного липидами 10 г, необогащенного 20 г), жмыха (10 г) или лузги (20 г) делят на две равные части и помещают в колбы (емкостью 100-250 мл) о притертыми пробками* заливают пробы гексаном из расчета 3-х объемов на I весовую часть, попе чего перемешивают на приборе для встряхивания 30 мин * Полученный экстракт фильтруют через воронку Бюхнера, не перенося осадок на воронку* В те же колбы заливают повторно такое же количество гексана, встряхивают еще ВО мин, фильтруют, количественно перенося осадок на воронку Бюхнера с помощью 30 мл гексана (3 раза по 10 мл).

Полученные экстракты, упаренные на ротационном испарителе до 30 мл, подвергают колоночной очистке на окиси кремня (см* приготовление колонки), после чего колонку промывают 50 мл смеси диэтилового эфира с гексаном. Очищенные экстракты объединяют и упарившот досуха на ротационном испарителе, после чего немедленно пипеткой вводят I мл к-гексана, распределяя его тонкой пленной по поверхности колбы, начиная от ее горлышка.

2. Растительное масло, фосфатидный концентрат, животный жир*

Из тщательно перемешанного растительного масла или расплнв-ленноо на водяной бане животного жира отбирают медицинским шприцем 2,5 мл, переносят в пикнометр на 5 мл, доводят Объем до 5 мл л-гексаном в пикнометре и энергично перемешивают*

Навеску фосфатидного концентрата 5 г, помещенную в стеклянный бюкс, количественно переносят в пикнометр на Ю мл с помет ъю 5 мл, гексана и тщательно перемешивают.

I мл исследуемого раствора медицинским шприцем на I мд медленно вводят через инжектор в термоствтируемый экстрактор, ш*г-рихый до 24Ь°С, при одновременном поступлении в него паров гек-

/2

сана* Одновременно в место ввода пробы в ту же экстракционную трубку подаются пары гексана со скоростью 2 мд/мин (в пересчете на жидкость)* Выходящие из экстракционной трубки пары конденсируются в приемнике, охлаждаемом льдом, предварительно заполненном на 1/3 обьема я-гексаном* Экстракция длится 16 минут, после чего полученный конденсат (около 100 мл), собранный в круглодонной колбе, концентрируют на ротационном испарителе до объема ВО мл, пропускают через колонку (см* приготовление колонки), которую затем промывают с помощью 50 мл смеси н-гексана и днелилового эфира*

Из очищенного экстракта растворитель досуха отгоняют на ротационном испарителе* После чего в отгонную колбу немедленно пипеткой вводят' I мл н-гексана, распределяя его тонкой пленкой по поверхности колбы, начиная от ее горлышка*

П* Идентификация и количественное определение

5 мкл полученного раствора вводят в инжектор газового хроматографа*

Условия хроматографирования;

Стеклянная хроматографическая колонка Z и х В ии;

Носитель - хроыатон    ДМС£**    ,    пропитанный S% <?Е-80,

80-100 меш*

Температурные режимы: испарители - 240°С, колонки - 200°С, детектора - 250°С*

Скорость газа-носителя - 80 ыл/ыин;

Рабочая шкала электрометра - 2,5 * 10"*^1А

Напряжение, подаваемое на детекторную систему - 120 в.

Скорость протяжки ленты 10 мм/мин.

Времена удерживания хлорорганических пестицидов при данных условиях хроматографировали^:

<£- изомера гексахлорциклогексана - 3 мин.10 сек;

J - "зомера гексахлорциклогексана - 3 мш AS сек; гептахлора - 6 мин*0,5 сек; альдояна - 7 мин.ВО оек; д*д* - ДДЭ - 13 ы§ш»2Ь сек;

)h

п.п, - ДДД - I? мин.20 сек; п,п. - ДДТ - 22 мин,15 сек.

Количественное определение проводят истодом соотношения оо стандартами по общепринятым формулам»

Минимальное детектируемое количество в хроматографируемом объеме (5 мкл): JL$ ~ ГХЦГ - ОД иг, гептахяор - ОД яг, аяьдрия-

- ОД иг, п.п* ~ ДДТ - ОД нг, п.п^х - ДДД - 0,2 яг, я,п^х - ДДЭ ~

-    ОД нг.

Линейность детектирования соблюдается в пределах от 0,1-5,0 нг.

Чувствительность метода;

1)    д.*я растительных масел, животных жиров я фосфатидных концентратов: альдрин и оСД - гексахлордикдогексан - 1Д0"®иг/Л* п.п¹ - ДДэ, п.л¹ - ДДД, п.л¹- ДДТ, гептахяор - 2 . М~® мг/л*

2)    для шрота, жмыха, лузги:

альдрин, ДДЭ, д.п* - ДДТ, ~ гексахлорциклогексан -

I . I0"³ мг/л, гептахлор и п.п* - ДДД - 2 . 10"® мг/л.

Процент определения пестицидов составляет 78-82%,

Методические указания подготовлены А.Б.Беяовой, Д.В.Нови-ковой, Г.А.ЛужниковоЙ, Н.И.Шадриной (ВНИЙжиров, г. Ленинград).

плры Решена

Схема экстрактора для извлечения хлорорганичсских пестицидов из пищевых продуктов:

I - алюминиевая трубка; 2 - терморегулятор; В - термометр;

А “ тонкий асбест; 5 - стеишкпая вата; 8 - спираль нихром;

7 - экстракционная трзока; 3 - сборник паров гексана с пестицидами .