Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Сборник № 21 Часть 1-ая
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.
Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Сборник № 21 Часть 1-ая
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.
ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПЕСТИЦИДЫ
Утверждено Министерством здравоохранения ОССР
" 29"июля 1991 г JS 6072-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МВТАБОкШШДЗ яля 1,ПРОИЗВОДНЫХ ТИО-й ДИТИОФОСФОРНЫХ КИСЛО? В БИОМАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
1-Краткая характеристика препарата
Производные тка н дитиофосфорных кислот являются осадвшдои метаболитами фосфорорганических пестицидов. Характеристика метаболитов ФОП представлена в таблице 1.
Метаболиты ФОП практически нерастворимы в воде, растворимы в ацетоне да атыловом офире,втилацетате, спиртах. ДЦ для белых крыс диметилди-
50
таофосфорной кислоты -1460 мг/кг, карбофоса 2000 мг/кг (перорально).
2.Методика определения метаболитов ФОП,производных тио- и дитиофосфорных кислот в биологическом материале 2.1.Основные положения
2.1.1.Принцип метода
Методика основана на определении алкилпроизводных тио- и дитиофосфорных кислот методом тонкослойной и газо-жидкостной хроматографии после экстракции всех анализируемых соединений из биосубстратов атилацетатом (10шгхЗ).
ТСХ - определение проводят на пластинках "Силуфол” в подвижной фазе (ПФ) гексан:ацетон (3:1).В качестве проявляющих реагентов использовали:
1) 4-(п-нитробензил) пиридин + тетраотиленпентамин ( синие пятна на белом фоне );
2) Тиокетон Михлера + хлорамин (салатовые пятна на желтом фоне );
Разработчики:И.Л.Ястреб,ВНШГЙНТ0КС,М.А.Клисенко.КНИЙГТ и ПЗ,г.Киев
3)2,6-дибром N-хлорхинонимин
( красно-кирпичные пятна на белом фоне );
4 )Вромкрезоловый зеленый
(желтые пятна на зеленом фоне );
5) Нилгидрин
(красные пятна не белом фоне );
6) Диме тиламинобехгз альдегид (белые пятна на желтом фоно).
ГЖХ определение проводят на газовом хроматографе "Цвет-100",
снабженным термоионным детектором. В качество неподвижной фазы
используют У/. 0V-17 на хроматоне N-AW-HMDCS. Разделение данных
о °
метаболитов проводят в изотермическом режиме при Тк=120 С,Т ясп=160 С.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Метрологическая характеристика метода определения метаболитов ФОП при внесении веществ In vitro в оргатпгзм и ткани животных, мочу, кровь приведена в таблице П.
2.1.3. Избирательность метода
Фосфорорганические пестициды но мешают определению амиллролзводцшх тио- и дитиофосфорных кислот.
2.2.Реактивы и растворы Этилацетат, х.ч.,ГОСТ 223СО-76
Этиловый спирт, ректификат, %‘/.-ный, ТУ 6-09-1710-77 Сульфат натрия, х.ч., ГОСТ 4166-76, безводный 4-(п-Нитробензил)пиридин, ч, ТУ 6-09-1593-74 Тетраатиленпентамин, ч, ТУ 6-09-8293-73 Тиокетон Михлера Хлорамин
2,6-Hn6poM-N -хлорхинопимин, ТУ 6-09-0563-73
37
Бромкреэоловый зеленый, ТУ 6-09-4530-77
Нингидриы, ТУ 6-09-Ю-1384-79
Диме тила мяно бенз «льде гад, чда, ТУ 6-09-3272-77
Проявляющие реактивы: Jft 1 0,2X раствор 4-(п-нитробензил)пиридина
в ацетоне и 10Х раствор тетраетиленпентамиыа в ацетоне;
X 2 0,1 У. водный раствор хлорамина и 0,1 У, «отанольный раствор
тиокетона Михлера; X 3 0,5Х раствор 2,6-дибром-М-хлоргинонимкна в гексане; X 4 0,ЗХ раствор бромкреэолового зеленого в 80Х метаноле смешивают с 8 каплями 30Х раствора NaOH на 100 мл раствора; X 5 0,25X раствор нингидрцна в спирте; J* 6 10 мл 0.25Х раствора п-даме тиламинобенза льде гида в отоноле смешивают перед употреблением с 1 мл ледяной уксусной кислоты.
Ацетон, х.ч.,Г0СТ 2603-79, свежеперегнашшй Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78, свеаелерегыашшй Метиловый спирт, х.ч., ГОСТ 6996-77 Натрий гидроксид, х.ч., ГОСТ 4328-77 Уксусная кислота, осч, ГОСТ 18270-72, ледяная
Неподвижная фаза: ЗХ 0V-17 на хроматоие N'-AW-LIMDCS (0,16-0,20 мм, Хемапол, ЧСССР)
Азот особой чистоты, содержание 0^ не более 0,003Х,Г0СТ 9293-79 Водород газообразный из баллона, ГОСТ 3022-80 Воздух газообразный из баллона,ГОСТ 9-010-80 или нагнетаемый компрессором
Основные стандартные растворы метаболитов Ф0П в ацетоне по 100 мкг/мл.Хранят в холодильнике 2 мес.Рабочие стандартные растворы метаболитов Ф0П, производных тио- и дитиофосфорной кислот по 100 мкг/мл и 1 мкг/мл.Хранят в холодильнике в течение 2-х месяцев.
2.3-Приборы и посуда
Газовый хроматшфаф с тс ргю ионным детектором (ТИД) марки "Цвот-100"
Микроизмельчитель тканей РТ-2, ТУ 64-1-1505-79 Прибор для отгонки растворителей ( ротационный вакуумный испаритель) типа ИР-1-М, ТУ 25-11-917-76 или аналогичный Мнкропшрицы на 10 мкл, МПМО, ТУ 5Е-2-833.024 Механический встряхиватель, ТУ 64-1-1081-73 или аналогичный Хроматографическая камера о притертой крышкой,ГОСТ 25336-82 Мерные колбы,ГОСТ 1770-74 на 100 и 50 мл Пипетки на 1, 5. 10 мл, ГОСТ 20292-74
Пробирки о пробками па шлифах,градуированные,ГОСТ 1770-74 на 10 мл
Круглодонные колбы,ГОСТ 25336-82,на 100, 50 мл
Плоскодонные колбы,ГОСТ 25336-82,на 100 мл
Чашки Петри,ГОСТ 25336-82
Мерные цилиндры,ГОСТ 1770-74,на 100 мл
Делительные воронки на 100 , 250 мл, ГОСТ 25336-82
Воронки химические, ГОСТ 25336-82
2.4.Подготовка и определение
2.4.1.Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколияеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденными Заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 г за Л 2051-79.
2.4.2.Подготовка к определению
Хроматографические камеры за 1 час до начала хроматографирования заполняют смесью растворителей гексан-ацетон (3:1) для подвижной фазы.Обьем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше , чем 1 см от уровня дна камеры. Для ГЖХ-определения колонка заполняется общепринятым в хроматографии способом, кондиционируется в течение 48 часов при температуре
39
на 20° выше рабочей температура колонки.
2.5-Описание определения
2.5.1 .Экстракция и очистка экстракта
Органы и ткани (печева* почки, легкие, головной мозг)
Исследуемые органы и ткани тазмельчают в микроизмольчителе тканой или на мясорубке.Отбирают 2-5 г средней пробы, заливают в зависимости от взятой навески 15~50 мл этилецчтета и оставляют на 1 час периодически перемешивая пробу стеклянной палочкой или ставят на 30 мин на аппарат для встряхивания. Затеи растворитель сливают в круглодонную колбу для упаривания, фильтруя экстракт через фильтр с безводным сульфатом натрия.Заливают пробу новой порцией растворителя и экстрагируют еще 30 глин.Экстракт объединяют.
Упаривают экстракт на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 40-45°С до 1 мл.Переносят остаток в мерную пробирку со шлифом, ополаскивая колбу небольшими порциями (nq 0,3-0,4 мл) отилоцетата.Доводят обьем в пробирке отилацетатом точно до 2 мл, перемешивают и аликвоту хроматографируют.
Кровь. 2-5 мл цельной крови выливают в фарфоровую чашку.
Затем прибавляют при нопрорывном помешивании безводный сернокислый натрий ( 20 г) и тщательно растирают пестиком.Приливают?0-30 мл отилацетата и перемешивают пробу с отилацетатом в течение 10 мин. Сливают отилацотат в колбу для отх'онки растворителей,фильтруя через фильтр "красная лента ".Экстракцию повторяют еще раз.
Экстракты объединяют, упаривают на ротационном испарителе при
о
температуре бани 40-45 С до 1-2 мл.Переносят остаток в мерную пробирку и доводят обьем в пробирко этилацетятом до 2 мл.
Аликвоту хроматографируют.
Моча. 20 мл мочи переносят в делительную воронку, прибавляют 20 мл этилацетата. Осторожно встряхивают в течение 2 ?.стн. Дают отсто *
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками
Редакционная коллегия:
Новикова К.Ф.-начальник сектора ННХСЗР; Калинин В.А--к.с.н..профес сор,зав.квфедры ТСХА; Гиренко Д.Б.-к.х.н.,зав.аналитической лаборатории УКР ВНИИГИНТОКС; Борисов Г.С.-зав. КТЛ РРСТАЗР; Устинова Т.Н.-ведущий специалист КТЛ РРСТАЗР.
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве офи циальвых Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
Ответственный за выпуск - Орехов Д.А., заместитель председателя
Госхимкомиссии -тел. 207-63-90
Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией
защиты растений "Главхимзащиты" МСХ РФ
г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосьемки 11/41 тел.(246) 3-09-92
ОГЛАВЛЕНИЕ
Хлорорганические пестициды стр.
1. Методические указания по групповой идентификации хлороргашхческих пестицидов и их метаболитов в биоматериале, продуктах питания и объектах окружающей среды методом адсорбционной высокоэффективной жидкостной хроматографией.
29 июля 1991г. Л 6129-91..........9..
2. Временные методические указания по определению модауна в эфирных маслах методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г, Л 6109-91.........18..
Фосфорорганическио пестициды
3. Методические указания по определению бициклада в растительном материале хроматографией в тонком слое.
29 июля 1991г, Л 6113-91.........26...
4. Временные методические указания по определению офтанола-Т (но изо-фенфосу) в воде, почве, зерне и семенах сахарной свеклы.
29 июля 1991г. л 6Ю9-91.........31...
9. Временные методические указания по определению метаболитов ФОН, производных тио- и дитиофосфор1шх кислот в биоматериале методом тонкослойной и газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. Л 6072 -91.........36----
6. Методические указания по определению метаболитов фосфамида в биологических средах методом тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. J* 6133-91.........48----
7. Методические указания по определению этримфоса в зерновых культурах методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. J* 6129-91.........57----
8. Методические указания по гпзохроматогрзфичоскому определению остаточных количеств эталона в столовой и сахарной свекле.зеленой массе
растения и почве.
29 июля 1991г. * 6094-91.........62.....
3. Методические указания по определению эфзля (этнлфосфита алюминия и фосфористой кислоты) в растительных культурах, продуктах их перера ботки, воде, почве методой газожидкостной хроматография.
29 июля 1991г, N 6132-91..........70...
Пиретроздк
10. Временные методические указания по определению изатрина в растительном материале методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6070-91..........85____
11. Временные методические указания по огтределению пиретроидов (пермет-рина .циперметрина .фенвалерата и декаметрина )в молоке и мясе методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6093-91.........91-..
12. Временные методические указания по определению суми-о в биологическом материале методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6101-91.........ЮЗ____
Гетероциклические соединения
13. Временные методические указания по определению остаточных количеств азовитз в зерне злаковых, зеленой массе растений, сахарной свекле, яблоках, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 5371-91.........110.....
14. Методические указания по определению байфидана в зерновых и лекарственных культурах, воде и почве методами гэзо:чядкостпой и тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6131-91........123____
15. Методические указания по определению бутизанэ С в воде и почве ме
то дом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6139-91........131----
16. Временные методические указания по хроматографическому определению ивина и его метаболита, 2,6-лутидина в воде, овощах (картофель,огурцы ,томаты).
29 июля 1991г. N 6079-91.......136......
17. Временные методические указания но хроматографическому определению ивина в биологическом материале.
29 июля 1991г, N 6078-91.......143......
18. Временные методические указания по определению остаточных количеств ивина и его комплексов в воде методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6СГ/7-91.......149.....
19. Временные методические указания по определению кентавра в воде методом хроматографии в тонком слое.
29 июля 1991г. N 6100-91.......155----
20. Временные методические указания по определению лентаграна в офир-ных маслах методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6111-91.......162.....
21. Временные методические указания по определению рейсера в эфирных маслах лаванды и мяты методом газожидкостной хроматографии
29 июля 1991 г. N 6074-91.......168.....
22- Методические указания по определению топаза в сельскохозяйственных культурах газожидкостной и тонкослойной хроматографией.
8 июня 1989г. N 5009-89........174____
23. Временные методические указания по определению харалли в воде методом хроматографии в тонком слое.
29 июля 1991г. N 6102-91.......182...
24- Временные методические указания по определению экспромта в воде методом хроматографии в тонком слое.
29 июля 1991г. N 6107-91
25. Методические указания по определению эллипса в почве, зерне зерновых культур методами газожидкостной и тонкослойной грома то гра
29 июля 1991г. N 6273-91.......199...
Нитрофенолы и их производные
26- Методические указания по определению акрекса и диносеба в крови и моче тонкослойной хроматографией.
4 октября 1988т, N 4707-88......210...
27. Методические указания по определению трефлана в зеленой массе и зерне зорповых культур методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6125-91........215*.
Производные мочевины и карбаминовой кислоты
28. Временные методические указания по определению остаточных коли честв димилина в яблоках тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г, N 6075-91........222..
29. Временные методические указания по определению остаточных количеств картолина -2 в зерне ячменя, пшеницы и других злаков,гречихи, бобах сои.сухих кормовых травах, почве и воде тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 6U97-91.........228.
30. Методические указания по определению картолина-2 в биосубстра тах методом тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 6115-91........240.
Алканкарбоновые кислоты и их производные
31. Методические указания по ускоренному определению 2,4-Д и ТХА
в биоматериале (органы и ткани мелких наземных и почвенных животных) методом газожидкостной хроматографии.
32. Методические указания по определению 2,4-Д в воде методом обращению-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6127-91.......253..
Прочие пестицида
33. Временные методические указания по определению на Су в эфирных маслах методом тошсослойной хроматографии.
29 июля 1991г, N 6110-91.........260..
34. Временные методические указания по определению остаточных количеств нафталевого ангидрида в зерне кукурузы, льна и воде тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991 г, N 6096-91.......265...
Методические указания по измерению концентраций пестицидов и полупродуктов их получения в воздухе рабочей зоны
1. Методические указания по газохроматрографическому измерению концентраций Оутизана в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6138-91.........272----
2. Методические указания по хроматографическому измерению концентраций виджила в воздухе рабочей зоны.
26 февраля 1991г. N 5325-91......276----
3. Методические указания по хроматографическому измерению концентраций глина в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6134-91.........281.....
4. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций грамекса в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6082-91.........285......
5. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций гранстара в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6090-91
в- Методические указания по измерении концентраций оксима дикамбн в воздухе рабочей зоны тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 6117-91.........295.....
7. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций дгосвата и едила в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6154-91.........300.......
8. Методические указания по измерению концентраций Су- - эфиров 2,4-ДМ;
2,4-Д и 2,4,5 - ТП- кислот в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6119-91.........308......
9. Временные методические указания по измерению концентраций дуала в
воздухе рабочей зоны методом фотометрии, тонкослойной и газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991 г, N 6086-91.......314......
10 Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций кентавра в воздухе рабочей зоны
29 июля 1991 г, J* 6085-91.......323.....
11.Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций лондакса в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991 г, N 6104-91........329......
12 .Методические указания по хроматографическому измерению концентраций 4-нитро-о-ксилола и 3-нитро-о-ксилола в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6116-91 .........334.....
13. Методические указания по газохроматогряфическому измерению концентраций омайтв в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6269-91........339----
14. Временные методические указания по газохроматографическому измерению концентраций офтанола-Т (по изофенфосу) в воздухе рабочей
15. Методические указания по хроматографическому измерению концентраций 4-родан-2-нитроанилина в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6118-91......349....
16. Временные методические указания по измерению коонцентраций тиадиа-зола в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
29 июля 1991г. N 6084-91......354____
17. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций тотрила в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6089-91......358----
18. Временные методические указания по измерению концентраций фоликура в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
29 июля 1991г. N 6112-91.......362....
19-Временные методические указания по газохроматографическому измерению концентраций фюзилада в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6088-91.......369____
20. Времвшше методические указания по хроматографическому измерению концентраций харэлли в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. >1 6071-91.....373____
21. Временные методические указания по измерению концентраций экспромта в воздухе методом газожидкостной хроматографии
29 июля 1991г. Я 6081-91......378____
22. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций эллипса в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. Я 6083-91......383____
23-Методические указания по измерению концентраций эфаля в воздухе рабочей зоны фотометрическим и газохромзтографмческим методом.
29 июля 1991 г. Я 6120-91
