ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХЕ-я

Москва - 1983

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХШ

Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками

при МСХ СССР

Москва-1983

-259-

ССДБРЖАНИЕ

ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ

I.Временные методические указания указания по

определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.

2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*

3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и

^яблоках методом ТСХ.

ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ

1.    Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.

2,    Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.

3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,

4.    Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности

и биосредах методом ТСХ.

5.    Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,

260-

6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ.    67

7.    Временные методические указания по определению о<$у-

нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов.    76

8.    Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами

ГКХ и ТСХ.    82

9.    Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ

и ГЖХ.    91

10.    временны» методические указания по определению хлоро

фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной.    90

11.    Методические указания по определению в зерне и про

дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами.    ₁₀₅

АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]

1.    Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.

и растительном материале    хроматографическими методами. цу

2.    Временные методические указания по определению байгой*

методом ГЗКХ в молоке.    138

3.    Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.

- 261 -

4.    Методические указания по определению кронетона

в воде,почве,корнеклубнеплодах и растительном материале ТСХ,    *54

5.    Временные методические указания по определению ридо-

кила методой хроматограмм в воде,почве,растительном материале,    *50

6.    Временные методические указания по определению ров-

роля методом ТСХ в поде,почве,томатах,картофеле,винограде, виноградном соке и ринэ.    I6S

7.    Временные методические указания ронилана в растительной продукции,почве и воде ТСХ и    ГЖХ.    175

8.    Временные методические указания по определению эвисех-

та в растительной продукции,почве и в воде ТСХ,    182

9.    Временные методические указания по определению эти-

римала в растительной продукции,почве и воде ТСХ,    188

ПРОЧИЕ ПЕСТИЦИДЫ

I* Времонние методические указания по определению гора-нилбутирата методом ГИХ и ТСХ в почве,воде,корнеплодах и листьях сахарной свеклы.    *^5

2.    Временные методические указания по определению бром-

пропилата(неорона) в яблоках и цитрусовых методом газовой хроматографии.    206

3.    Временные методические указания по определению иллокса-на в воде и печво методом ГП.

4.    Временные методические указания по хроматографическому определению иэатрина в печво    и    воде.    217

5.    Временные методические указания по определению омаЯта методами Г££Х и ТСХ в почве,в воде и растениях.

6.    Методические указания по определению хлората магния в почве,воде,растениях(подсолнечнике,луке) и в воздухе полярографическим и хроматографическим (ТСХ) методами.

7.    Временные методические указания по определению оста точных количеств некоторых аналогов ювенильного гор иона (алтосида.алтозара и п-<5ром*енилового эфира гераниола) в растениях картофеля и почве методами ТСХ и Ш.

Дополнения

Л- 71938 от 20Л«СЗгТирах 2000 экз. .заказ Н» шз Типография ВАСИ:ИЛ

Настоящие методические указания предназначены для

санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарных_вагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.

-17 5-

УТВЕРАДАЮ

Заместитель Главного Государетаенного санитарного врача СССР

А.й. Зайченко

б августа 1981 г, » 2429-81

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РОНИЛАНА В РАСТИТБЛЫЮИ ПРОДУКЦИИ, ПОЧВЕ И ВОДЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ.

I. Краткая характеристика препарата

1.1.    Ронилан.

1.2.    ь-винил-5-метил-З-(3,5-дкхлорфени л j -1,3-оксазолидиидион - 2,4.

1.3.    Структурная формула

* 1.4. ьАС 35200

1.5. Хкмичеоки чистое вещество представляет собой криотал-лрчсокий«порошок без запаха с температурой плавления 108°С.

Плохо растворим в поде, хорошо в ацетоне, хлороформе, оеязоле, этаноле. Препарат молотокончен для теплокровных животных. ЛДзд для крыо составляет 9875' ^м^/кг, Выпускается в форме 50 и ?5£-го смачивающегося порошка,

2, Методика определения ронилаиа.

2.1. Оонишшв положения.

2 А.J. принцип метеча,

.«'.•тод основан но извлечении оошлана из «анализируемой про-

-176-

бы органическим растворителем, очистке экстракта о последующим определением тонкослойной или газокидкостной хроматографией.

2,1.2. метрологическая характеристика метода

тех Ш Минимальное детектируемое количество 1-2 мкг I нг Нижний предел определения U,05 мг/кг 0,00ь мг/кг Р - размах варьирования, % в растениях 70,0-90,0 75,0-90,0 в почве 80,0-95,0 90,0-95,0 в воде 81,0-100,0 81,0-100,0 С - среднее значение определения, % в растениях 78,6 93,0 в почве 87,5 97,0 в воде 89,Ь 89,0 S - стандартное отклонение, % в растениях ±3,0 ±о,0 » почве ±8,7 ±3,3 в воде -7,9 ±7,9

2.2. Реактивы и растворы Ацетон, х.ч, ГОСТ 2600-79 н-Гексан, ч, МРТУ-6-09-3375-78 (перегнанный) Хлороформ, х.ч. ТУ 6-09-4263-76 Этиловый спирт, х.ч. ТУ 6-09-7710-77 Натрий сернокислый безводный, ч.д.а. ГОСТ 4X66-76 Пластинки "Jiti'fct -254" ^n'OfJXr- (ЧССР) Азот особой чистоты

3* ХВ-60 на хроматоне V'ftWi(0,20 0,25 v..i) Натрий азотнокислый, ч. ГОСТ 4197-66 Кислота соляная, х.ч. ГОСТ 3118-67

-177 -

<*6- нафггиламчн, ч. ГОСТ 8827-74

О-толидин, ч. ТУ МХЛ 2626-51

Калий марганцевокислый, ч. ГОСТ 20490-76

Цинк сернокислый, х.ч. ГОСТ 4174-77

калий железистосииеродистый, х.ч, ГОСТ 4207-75

Ронилан

Стандартный раствор ронилана в ацетоне - I мкг/мл для ГЖХ и 7.00 мкг/мл для ТСХ. Срок хранения I месяц.

2.2.1. Проявлямцие реагенты

1.    Свежеприготовленный Г^-пый раствор -нафгиламина в этиловом спирте.

2.    160 мг 0-то шдина растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты, доводит дистилтированной ведой до 500 мл и прибавляют 1 г йодистого калия; срок хранения проявляющего реактива не ограничен.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда Ротационный испаритель ИР-IM, ТУ 25-11-917-74 Мерные колбы на 100 мл ЮСТ 1770-74 Делительные воронки ГОСТ 8613-75 Водяная баня ТУ 46-22-603-75 Аппарат для встряхивания ТУ 64-21-1081-73 Микропипетки ГОСТ 1770-74 Круглодонные колбы на 250 мл оо шлифом, lOCT 10394-72 Колбы конические со шлифом на 250 и 500 мл ТС ГОСТ 10394-72 Хроматограф "Цвет-106" или другой марки с детектором постоянной скорости рекомбинации.

Пробирки с делениями и шлифами на 10 мл.

Баллон

Секундомер

Микрошприц на 10 мкл 0-10 ТУ ЬБ-2.833.0.24 Кам'ра для хроматографирования ГОСТ 10565-63 Камгра для опрыскивания ГОСТ 10565-73 Воронки химические ГОСТ 8613-64 Пу/ьверизатор стеклянный ГОСТ 1770-74 Источник Уф-света типа IIPK-4

Хроматографические стеклянные колонки длиной 1.м и внутренним диаметром 3 мм.

-178-

2.4.    Отбор проб.

Отбор проб производится в соответствии с Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды, утвержденными Заместителем Главного Государственного санитарного врача иССР № 2051-79.

2.5.    Проведение определения

2.5.1.    Экотракция

пода. 200 мл воды помещают в делительную воронку. Ронилан экстрагируют тремя порциями хлороформа по 50 мл каждый раз в течение 5 минут. Объединенные экстракты фильтруют через слой безводного сернокислого натрия, отгоняют растворитель при температуре 40°0 до объема 0,2-0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

Почва. 100 г почвы помотают в коническую колбу с притертой проОкой и приливают 100 мл хлороформа, препарат экстрагируют путем энергичного встряхивания колбы в течение одного часа. Растворитель отфильтровывают через слой безводного сернокислого натрия, колбу и фильтр трижды промывают по 25 мл растворителя Экстракт удаляют в токе воздуха.

Растительный материал. Лзмельченную навеску (25г) растительного материала помещают в коническую колбу, приливают 150 мл ацетона и помещают на аппарат для встряхивания на i час. Ацетоновый экстракт отделяют от массы фильтрованием через бумажный фильтр со слоем оезводного сульфата натрия, колбу и фильтр трижды промывают по 25 мл ацетона. Объединенный экстракт упаривают до объема 20 мл. Затем в колбу приливают 80 мл дистиллированной воды и далее поступаг * так, как это описано при определении в почве.

Семена подсолнечника. 5 г измельченных семян помещают в коническую колбу, заливают 50 мл хлороформа и экстрагируют встряхиванием в течение одного часа. Экстракт отфильтровывают через слой безводного сернокислого натрия, пробу промывают трижды хлороформом по 20 мл. Растворитель отгоняют под вакуумом,

2.5.2.    Очистка экстракта

К оухому остатку из почвы прилиьают 20 мл ацетона и 80 мл

-179-

дястилдированноМ воды, к ацетоновому раствору из растительного материала также приливают 80 мл воды. К сухому остатку из семян подсолничнека приливают 20 мл этанола, хорошо перемешивают отеклянной палочкой в течение 10 минут и приливают 80 мл воды.

Для осаждения коэкстрактивных веществ в полученные растворы приливают I мл 30%-ного раствора сульфата цинка и I мл 15%-ного раствора железиотосинерсдкетого калия, тщательно перемешивают и через 5-7 минут отфильтровывают через плотный бумажный фильтр в делительную воронку. Остаток на 1-ильтре из семян подсолнечника промываюг трижды по 10 мл водного раствора этанола (1:1 по объему). Пробы из почвы я растительного материала промываюг 10 мл воды.

Ронилан экстрагируют хлороформом трижды по 5 минут, порциями по 50 мл. Экстракт объединяют, сушат безводным сернокислым натрием и концентрируют до объема 0,2-0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

2.5.3. Идентификация и количественное определение ронилана

2.5.3.1. .условия хромато графи сования в тонком слое.

Экстракты с помощью пипетки наносят на пластинку "Силуфол". Рядом с пробой наносят стандартные растворы ронилана содержанте I, ь, 10 мкг препарата. Хроматографируют в системе растворителей н-гексан - ацетон - петролейнпи эфир (2:1:1) или н-гексан -ацетон (2:1 по объему), после того, как фронт растворителя поднимется на 12 см, пластинку вынимают из камеры, отмечают линию фронта растворителя и оставляют на несколько минут на воздухе для удаления паров растворителя. Далее пластинку выдерживают в УФ-свете в течение 20 минут, после чего ее помещают в камеру, на дно которой в стаканчик внесено 4-5 г кристаллического нитрита натрия. В стаканчик осторожно приливают 20 мл 20%-ной соляной кислоты. Камеру закрывают крышкой и зыдеркияают пластинку в течение 5 минут. Далее ее осторожно опрыскивают овежеприго-тсьленнмм 1%-ным раствором*^- нафг.ламина. при наличии ронилана в пробе на хроматограмме проявляются четкие малиново-красные пятна на белом фоне с величиной//= 0,55*0,05 в системе н-ге-ксак-анчтон-пеТролейный эфир (2:1:1), а в оиотеме н-гексан-апе-тон (2:1) - с величиной^/ =0,75-0,05. Возможно проявление хроматограмм также следующим образом:    после    хроматографирования

и высушивания пластинку в '.течение 20 минут облучают Уф-светом,

-ieo-

а затем хроматограмму на b-7 минут помещают в камеру, насыщенную парами хлора.

Для получения хлора на дно эксикатора насыпают 7-10 г перманганата калия и добавляют 15-20 мл концентрированной соляной кислоты. После улетучивания паров хлора пластинку опрыскивают раствором 0-толидияа. При этом ронилан обнаруживается в виде синих пятен на светло-желтом фоне.

2.5.3.2. Условия газожидкостного хроматографирования.

Ронилан можно определить на хроматографе с детектором по захвату электронов (постоянной скорости рекомбинации). Для этого может быть использована колонка с ХЕ-6и на хроматоне (0,20-0,25 мл) длиной 100 см и внутренним диаметром 3 мм. Температура колонки 1У0°С; детектора - 190°С; испарителя - 220°0. Расход газа носителя ^азот) - 40 мл/мин; воздуха - 200 мл/мин. Рабочая шкала электрометра - I х 10”    ,    скорость    протяжки    ленты

- 200 мм/час. Время удержания - 6,25 мин.

Очищенный сухой остаток растворяют в з-х мл ацетона, переносят в градуированную пробирку и доводят объем ацетона до 10 мл. В колонку вводят микрошприцем 2-5 мкл раствора.

2.6 Обработка результатов.

Содержание пестицида в пробе при определении методом ТСХ расчитывают по формуле:

где X - содержание препарата в проое, мг/кг, мг/л;

А - количество препарата, найденное в пробе, мкг;

Р - навеска или объем пробы, г, мл.

Содержание пестицида в пробе при определении методом ГЕХ расчитывают по формуле:

х = JlzZiJh'li__

W^p

где X - содержание препарата в пробе, мг/кг, мг/л;

Cj- концентрация стандартного раствооа, мкг/мл; bj и hg “ высоты шшов стандартного и анализируемого растворов, мм;

--Г.8Г,-

/j ^и ^2 ~ ^0(5ъсмы стандартного и анализируемого растворов вводимых в хроматограф, мкл;

- ооъем экстракта пробы, мл;

F - навеока или объем анализируемой пробы, г, мл,

3.    Требования безопасности.

Соблюдать треоования безопасности обычно рекомендуемые для работы в химических лабораториях о органичеокими растворителями и УФ~светом.

4,    Настоящие методические указания подготовлены:

Кандидатом с.-х. наук Красных А.А,

Кандидатов о.-х. наук Шустрозым З.С.

Кулинцовой Э.В,

(Всероссийский НИИ защиты растений, поо Рамонь Воронежской обл., ВНИИЗР).