ГОСУДАРСТВЕ ЛАМ КОМИССИЯ ПО ИШИЧЕОШ СРЕДСТВАМ ВОРЬВМ С ШЗДШВЯШ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й (ГОРШКАМИ ПШ ЙСХ СССР
МЕТОДЫ
ап издал ш я вдеотшчЕств весящов
В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ* КОРМАХ й ВНЕСШЕЙ СРЕДЕ
Ятт>Т
в в в, 19?! г,
ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ
ас яшчесш средствам борьбу с
ВРЕДИТЕЛЯМИ.БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР
Утверждено
Заиестителеу Главного cauuTapuoi-o врача Союза ССР
Д.Н.Лоранешш 1971 г.
МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ иИКРОКППИЧЕСТВ ПЕСТИЦДДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Часть У,
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкоуиссии по химический средствам борьбы с вредителями.болознями растений и оорнякауи при МСХ СССР
Москва 1971 г.
Колориметрический экспресс-метод определения ДДТ в 49
корне- и клубнеплодах автор: Стеилковская ЛоАо
Определение полихлорпинена в воде* почве, картофеле 58
свекле, ее ботве, мясе в присутствии ДДТ и других ялорорганкческих пестицидов и лсшшслоркамфена в почве авторы: Клисепко М,А., Верблюдова Н.Й., Косматый «ѻ,
Грицианко НоИ.
Определение остатков Ш в растениях методом тонко- 68
одойной хроматографии
авторы: Косматый 2*0*, Полонская ФЛ!.# Тверская Б*Ы«.
Определение кельтана в огурцах методой тонкослойной 66
хроматографии
авторы: Фомичева Л*Г., Ефимова Л.И.
Определение эфирсульфоната в винограде, соке, воде 71
вине методом ТСХ
авторы: Голубев Т«Й0, Владимирова Л*Г.С Колобродова Ю»И.
Фосфороргаяические соединения
Определение апрекса и каратана в растительных продуктах 74 н воде
авторы: Клисепко М*А*, Им и гида на А„М*
Определение бутифооа в продуктах промышленной лереоа- 80
ботки хлопка-сырца измена» хлопчатника методом тонкослойной хроматографии
авторы: Талипов ШДа, Дзиянбаева Р.Х., Халимова У До,
Шейнина Р„И., Белобородова Н*Ф«
Полярографический метод определения метилнитрофооа 86
в растительной пробе и почве авторы: Патваыку Ф#И.# Сороковая ЛоВ*
З^ыашо-хроиатохтрафичеокий качественный s колоримотрмческиН 90 ноли явственный методы определения дояиашззрофооа в расти-яельяой пробе и почве автор: Иатраику ®д*
Определение трихлориетафооа-3 в молоке в молочных &
продуктах с помощью тонкослойной хроматографии авторы: Молочников В.В., Серебренникова' В.А., Мочалов В,И.
Определение фоофамида, антио и карбофооа в воздухе ЮЗ
методом газо-жидкоотной хроматографии авторы: Клиоенко М«А*, Гиренко Д.Б.
Определение сайфооа в воде, продуктах питания рао- 1°7
тительного происхождении, почве г. биологическом материале
авторы: Клисенко М*А«« Письменная М«В.
Определение оойфооа в воздухе методом хроматографии П*
п тонкой слое
авторы: Клиоенко М.А,, Письменная М<В»
Определение остаточных количеств фталофооа и фона- 120
лона в#растительном материале, почве и воде авторы: Новикова К.Ф», Мельцер Ф.Р»
Качественный и количоотвошшй методы определения Г?.о
фозалона в яблоках» Яблоновых лйотш» почва и вода автор: Вндвпавняа Г.Ф»
ОпределеНИа фталофооа в молоке и мясе методом 133
тонкоовойной хроматографии
авторы: Заболотный К.Ф., Метелица в.К., Пспоклонои А.А.
Количественное колориметрическое опредоление хлорофооа 137
в молоке
автор: СтемпковокаН Л,А.
Определение емндофоов в молоке и *яое авторы: Непоклонов А. А.» Метелица В.К.
Определение байтокса в молоко и мной jcjft
авторы: Ролз А.П., Непоклонов А.А,
;i9
Ьнаиматический агар-диффуаный метод о ирода ланий 156
фосфороргаанчеоких инсектицидов в продуктах пииотого происхождения авторы: Неиокдонов А.А., Метелица В.К.
Производные карбаматов
Колориметрический метод опредепааиа вупрацшш~1 э 162
купрьцина-Н, Манеоа, Маркина» ХМТД в воадухе» продуктах питания растительного происхождения и биологических средах авторы: Клисонко М*А«, Векатейн Л.Ш„,
Экспрессное определенно тетраизтилтяураидиоуаьфада 164
(ТМТД) в зерне и зернопродуктах автор: Николаев А.В*
Определение остаточных количеств дикреаила в биодо- 16?
гических средах методом тонкослойной хромалографин автор: Сивохин И.А.
Прочие соединения
Определение 2-*мвтокси-3,6~дихлорбензойной кислоты 172
методом газо~кидкостной хроматографии авторы: Рыжков А*А., Гейд Ю.П,В Бабин Е.П., Свнри • денко А»С«» Чекавская Л,А.
Количественное определение дикеибы (дианаха, 179
беявеиа~Л) в растениях и в почве методой хроматографии в тонком слое
авторы: Березовский Ч.Я., Самоовах Л.С., Никотин В.В.
Определение диурона, ллнурона, монуронв, проланида, 184
солана, фалорана в воде, почве, овощах методом хрома -тографяи в тонком слое евтор: Оаыосват I.C.
Колориметрический метод определения которая* (пахтаройa) JH8
в хлопковом масле
аяторц: Новикова К.Ф., Меивцер Ф.Р., Алдомнкч Т*В.
Качественное я количественное определение каптала и 193
фталаиа в лине, виноградном соке, листьях и ягодах винограда, в почве и воде авторы: Вайптрауб Ф.П., Дронь Л,Л,
Определение мельпрокса в воздухе 199
авторы: Сорокина Л.В*, Клнсопго М.А.
Определение прометриня в почве, воде и растительном 203
материале методом хроматографии в тонком слое автор: Дроздова О-А.
Определение фенаэона в свекле, почве и воде 207
авторы: Эгерт В.9., Лиелгалве А.А.
Определение хлората иагиня в препарате-дефолианте, 2.ТЗ
хлопковом масле, ироте, жмыхе, османах, ядрах оемян и волокне хлопчатнике
авторы: Талипов II). Т., "жиппбяова Р.Х., Халимова УЛ*9 Белобородова Н.Ф.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРОРГАНИЧВЖИХ ЙДСШШИКАТОВ / АЛДРИНА. ГЕКСАХЛОРАНА, ГЕПТАХЛОРА, ДОТ. ДДЦ, ДДЭ и др./ В ВОДЕ. ОВОЩАХ„ ФРУКТАХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Принцип метода
Метод основан на извлечении препаратов экстракцией органа ческами растворителями, очистке экстрактов путем распределений между двумя неомешивающиыися жидкостями: гексан-ацето-нитрид или гекоан-диметидформамид о последующей очисткой на колонке на окиси алюминия* Конечное определение производится г\ хромате, графе о детектором по эахвату электронов,,
Применимость метода
Метод был проверен на пробах воды, картофеля, яблок, биологических средах: кровь, печень, сердце, хир ■ др.,
Реактивы и растворы
Для экстракции и очистки экотракта Н-гекоин, х.ч. перегрей-
ный:
Ацетон, х«ч«, перегнанный ;
Ацетонитрил ч., насыщенный н-гексанон;
Диметнлфорыаиад, ч,, насыщенный н-гекоаном;
Натрий хлористый, насыщенный водный раствор ;
Натрий сернокислый ч,д,а** безводный, свежвяроваленный
и 2% водный раствор.
I/ Раяработан Д,Б. Гиренко, М.А.Клиоеяко, ВНИВГИИТСКС,Киев
//
Окно* алюминия, безводная или II степени активности.
Перед употреблением окись алюминия заливают на 2 часа водным раствором ооляной кислоты I-I; затем отмывают дистиллированной водой до pH суспензии 4-5* Высушивают при 80°С.
Стандартные раствори х.ч. пропаратов в н-гексане, 5 икг/ил.
Носитель хромосорб 60-80 меш., обработанный соляной кислотой.,
Нидкая фаза - силиконовое масло ДС-20 или другая неполярная кремнаорганичеокяя фаза, / Е - 301; Е-30, ДС-П/, СКТВ, в коли
честве 10% /веоовнх/ от веса носителя.
Хлороформ, ч., очиненный концентрированной серной кислотой.
I л хлороформа встряхивают на аппарате для встряхивания 3-4 чаоа о 0,5 л концентрирован*эй серной кислоты* Отделяют сернокислотный слой, промывают хлороформ дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, осушают безводным хлористым кальцием* Перегоняют. Азот газообразный, 99,97%чистоты. Перед введением в хроматограф азот пропускают через колонку с индикаторным силикагелем.
Стекловата,
Приборы и посуда
Хроматограф о детектором по захвату электронов или о пламенно-ионизационным детектором
Кпллон о азотом, содержание 02 менее 0,003%
Колонки стальные или стеклянные, диаметр 3,4,6 мм, длине -1,5-2 м.
Шприц 1,5 или 10 мкл.
Сушильный шкаф
Центрифуга, окорость оборотов 2500 об/мин.
Делительные воронки, 500 мл.
Прибор для отгонки растворителей
Колонки стеклянные хроматох'рафичеокие диаметр 18-20 мм, длина 20 ом.
-/г-
Колонка заполнился адсорбентом следующим образом; в у аква конец колонки вкладываетоя ватный тампон и наливается ваввоь окиси алюминия о н-гексаноы в таком количестве, чтобы иосло оседания адсорбента висота его олоя достигала 7-8 см. На окись алюминия насыпается слой 3-Л см. безводного сернокислого натрии,
Баня водяная
Прибор для встряхивания.
Опиоанае определения
Экстракция препаратов и очистка экстрактов.
Вода: 500 мл воды после фильтроваг я через ваткыГ тампон встряхивают на аппарате для встряхивания с 25 мл.н-гексана в течение 30 мин.Экстракцию повторяют трижды, экстракты объединяют, сушат над беэводным сегнокиолым натрием и отгоняют растворитель до небольшого объема, переносят в мерную пробирку? несколько рае смывают колбу для отгона растворителя небольшими порциями н-гек-оана» смывы объединяют. Конечный объем раотвора не должен превышать I—Iв5 ил. 2~5^этого раотвора вводят в газовый хроматограф.
Картофель. 50 г картофеля измельчают* заливают 100 мл. н-гексана, встряхивают в течение 15-20 мин. Отгоняют экстракт в делительную воронку, встряхивают о 20 мд. концентрированной серной кислота, гексановый слой осушают безводный сернокислым натрием, упаривают раствор как оиисано для воды и хроматографируют.
Яблоки. 50 г яблок измельчают на аппарате для встряхивания в течение 15 мин. Отделяют эвотракт в колбу для отгонки и упаривают досуха. В эту колбу прибавляют предварительно охлааденную до + 5® - 0° С сиеоь ацетон-вода / 4 : I/, быотро фильтруют раствор я к фильтрату прибавляют 25 мл,гексана. Отбрасывают водный слой осушают,гексановый слой беэводным сернокислым натрием, испаряют до 1-2 мл,, которые количественно вносят в хроматографическую колонку с о.киоью алюминия. Дают раствору впитаться и элюируют ядохимикаты ТОО мл. смеси, состоящей ив ТО мл. эфира и 90 мл.
- /J-
к-гекоана со скоростью 3-4 капли в секунду.Элюат упаривают как описано выше и хроматографируют.
Биологические среды
Кровь.О,2-0,3 мл.цельной крови трижды экстрагируют по 5 мл.н-гексана. Экстракты объединяют и дважды встряхивают с 20 мл концентрированной серной кислоты.Гексановые экстракты объединяют,сушат над безводным сернокислым натрием,переносят в прибор для отгонки растворителя и далее поступают так, как описано для воды.
Печень.сердце.почки.жир. 5 г измельченной ткани заливают 25 мл концентрированной сорной кислоты, встряхивают 5 мин,, прибавляют 25 ил н-ге:сана и оставляют на 30 мин. Гексановый слой отделяют,а пробу заливают свежей порцией н-гекоана и повторяют экстракцию.
Экстракты объединяют переносят в прибор для отгонки растворителя,отгоняют растворитель до 5-10 мл.Переносят раствор количественно в делительную воронку,прибавляют 15-30 мл диме-тилформамида или ацетонитрила,насыщенных гексаном. Необходимо, чтобы соотношение раствора гексана и демитилформамида было не менее 1:2.
Встряхивают воронку I мин.дают разделиться слоям и переносят демитилфорнамидлый или ацетонитрильный слой в другую де лительную воронку, в которой находится 350-400 мл 2% раствора сернокислого натрия и 50 мл гексана в случае диметилформамида или 350-400 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 50 нг гексана в случае ацетонитрила.
Переворачивают воронку 3-4 разе и дают разделиться слоям.
Отделяют слой гексана, водный слой экстрагируют ете раз 50 мл гексана. Объединяют гексановые фракции,промывают ХСОмл дистиллированной воды,упаривают до небольшого объема 2-3 мл вносят в колонку с окисью алюминии и далее поступают так, как описано для яблок.
Подготовка хроматографической колонки
Нанесение жидкой фазы. 2 г силиконового масла растворяют
в небольшом количестве органического растворителя,чаще всего хлороформа, и приливают в фарфоровую чашку, в которой находится 18Г носителя,залитого полностью тем же растворителем. Тщательно перемешивают всю массу и выпаривают раствор на водяной бане. Досуха упаривают остаток растворителя на воздухе,сухой остаток подеушивам 4-5 часов в сушильном шкафу при температуре 80°. Приготовленный но-* ситель хранят в склянке с притертой пробкой.
Заполнение колонки. Один конец колонки закрывают стеклянной ватой, а в другой через воронку засыпают носитель. Заполняют колонку постукиванием,закрывают второй конец тампоном из стеклянной ваты и через переходы соединяют до длины 180-200 см.Колонку загружают в ка меру нагрева,отключают детектор и продувают 2-3 дня при температуре 220-250°С. Перед началом анализа подсоединяют детектор,проверяют герметичность и утечку газа-носителя.
Хроматографирование. Устанавливают температуру колонки и детектора 200^0 камеры испарения - 220°С. Скорость азота 120 мл/мин. Напряжение и чувствительность устанавливают таким образом, чтобы сила тока в ячейке детектора составляла 1,6-10-10-а.
Вводят определенное количество /0,1-0,01 икс/ стандартного раствора препарата в гексане. Записывают его время удерживания,т.е.время от момента ввода раствора до появления вершины пика. Время удерживания проверяется каждый день перед началом анализов. Установив время удерживания /несколько раз вводят один и тот же раствор/, вводят дозу конечного экстракта пробы - 2-3 мкп. Для количественного расчета ядохимиката вслед за пробой вводят такое количество стандартного раствора,площадь пика которого соответствует примерно площади пика анализируемой пробы.
В табл.1 для примера приведены чувствительность определения и время удерживании /Т-уд/, наиболее распространенных хлорорганичес-ких ядохимикатов, а также относительный удерживаемый объем /Иотн/, число теоретических тарелок / / и высота эквивалентная теоретической тарелке / II / , которые характеризуют размывание
полосы в котике, очной из иопольэоваиных колонок.
Таблица I
• - —----t ----- — •
Препарат * Чувотвительиооть : мкг/нл экстракта
|
^аЖ-иаомар ГХЦГ |
0,5
0*5 |
5,2
2> |
2.0
9,4 |
780
250 |
0,21
0,72 |
|
Геш 'хлоран /1,4% дуо*/ |
0,5 |
1,2
2,0 2 4
з!о |
|
|
|
|
Гептатлор |
0,5 |
4,0 |
15,2 |
760 |
0,21 |
|
,1ЩТ; 4,4 - наонвр |
0,1 |
15,6 |
63,0 |
480 |
0,38 |
|
ДДТ} 2,4 - иаоивр |
2,0 |
13,0 |
- |
- |
- |
|
ДДТ; 5 % дуох |
1,0 |
2:3
12$
15,6 |
|
|
|
|
ДТП |
0,5 |
12,4 |
50,0 |
304 |
0,61 |
|
ДДЭ |
0,5 |
9,6 |
38,5 |
260 |
0,72 |
|
Метоксшхяор |
2,0 |
20,0 |
80,0 |
195 |
0,96 |
|
миллбвко^ |
2,0 |
14,4 |
55,8 |
НО |
1,7 |
|
Пвртав |
2,0 |
7,2 |
28,0 |
210 |
0,89 |
|
Вфироулвфовах |
2,0 |
10,4 |
42,5 |
145 |
1,3 |
|
1/ 4~хлорфвн*л 2,4,5 хритлорФа |
ооульфид |
|
|
|
-16-
у . i__• V 2 : Y? . где
к, • л • к,
А ~ количество ДДТ в стандартном растворе, введенное в хроматограф, в мкг;
J! ~ площадь ника стандартного раствора ДДТ, введенного в хроматограф, в шг;
S2 - площадь пика пробы, в мы2; у - объем экстракта, введенный в хроматограф, ь мд;
Уа - общий объен экстракта после упарнванин, в ил;
У - объем апяляэируемой пробы ыолока, в мл;
X - количество препарата, в мг/л;
СОДЕРЖАНИЕ
Методические указания по разработке газо-хрома-тографичеоких методов анализа остаточных коли-чеотв пестицидов составлено Пивоваровым Г.А.
ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Определение хлорорганических ядохимикатов салдрина, II
гексахлорана, гептахлора, ДДТ, ДДД,ДДЭ и дг.) в воде, овощах, фруктах и биологических средах методом газовой хроматографии- авторы: Гиренко Д.Б., Клисенко М.А.
Определение ДДТ, ДДЭ.ДДД, линдана и ТХМ-3 в молоке и 18
молочных продуктах методом газовой хроматографии авторы: Молочников В.В., Мочалов В.И., Моргунова А.П.
Колориметрический метод определения ДДТ в молоке и 23
молочных продуктах
авторы: Молочников В.В., Мочалов З.И.
Определение остаточных количеств гекоахлорбутадиена 27
в вине, соке и воде методом гаэо-кидкоотной хроматографии о использованием детектора по захвату электоронов авторы: Пивоваров Г.А*, Гар К.А., Алексеева Е»М«, Тимофеева 0,Н., Шварцман Г.А.
Спектрофотометрическое определение гекоахлорбутадиена 33
(ГХБД) в воздухе
авторы: Гулько А.Г., Драновокая Л.М.
Определение в растительных ыаолах ДДТ, Гамиа-1ХЦГ и 36
др. хлорорганических пестицидов авторы: Клиоенко М.А., Юркова З.ФМ
Определение ДДТ,ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола 38
в хлопковых шротах, обогащонннх и иеобогагдинных липидами авторы: Белова А,Б., Новикова Л.В.
Определение ДДТ,ГПХ и у -ГХЦГ в почве, сахарной овекла и 47 картофеле методом тонкослойной хроматографии авторы: Косматый Е.С., Грицаенко Н*Н.в
