ГОСУДАРСТВЕ ЛАМ КОМИССИЯ ПО ИШИЧЕОШ СРЕДСТВАМ ВОРЬВМ С ШЗДШВЯШ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й (ГОРШКАМИ ПШ ЙСХ СССР

МЕТОДЫ

ап издал ш я вдеотшчЕств весящов

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ* КОРМАХ й ВНЕСШЕЙ СРЕДЕ

Ятт>Т

в в в, 19?! г,

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ

ас яшчесш средствам борьбу с

ВРЕДИТЕЛЯМИ.БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

Утверждено

Заиестителеу Главного cauuTapuoi-o врача Союза ССР

Д.Н.Лоранешш 1971 г.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ иИКРОКППИЧЕСТВ ПЕСТИЦДДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть У,

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкоуиссии по химический средствам борьбы с вредителями.болознями растений и оорнякауи при МСХ СССР

Москва 1971 г.

Определение трихлориетафооа-3 в молоке в молочных    &

продуктах с помощью тонкослойной хроматографии авторы: Молочников В.В., Серебренникова' В.А., Мочалов В,И.

Определение фоофамида, антио и карбофооа в воздухе    ЮЗ

методом газо-жидкоотной хроматографии авторы: Клиоенко М«А*, Гиренко Д.Б.

Определение сайфооа в воде, продуктах питания рао-    1°7

тительного происхождении, почве г. биологическом материале

авторы: Клисенко М*А«« Письменная М«В.

Определение оойфооа в воздухе методом хроматографии    П*

п тонкой слое

авторы: Клиоенко М.А,, Письменная М<В»

Определение остаточных количеств фталофооа и фона-    120

лона в_#растительном материале, почве и воде авторы: Новикова К.Ф», Мельцер Ф.Р»

Качественный и количоотвошшй методы определения    Г?.о

фозалона в яблоках» Яблоновых лйотш» почва и вода автор: Вндвпавняа Г.Ф»

ОпределеНИа фталофооа в молоке и мясе методом    133

тонкоовойной хроматографии

авторы: Заболотный К.Ф., Метелица в.К., Пспоклонои А.А.

Количественное колориметрическое опредоление хлорофооа    137

в молоке

автор: СтемпковокаН Л,А.

Определение емндофоов в молоке и *яое авторы: Непоклонов А. А.» Метелица В.К.

Определение байтокса в молоко и мной    jcjft

авторы: Ролз А.П., Непоклонов А.А,

;i9

Ьнаиматический агар-диффуаный метод о ирода ланий    156

фосфороргаанчеоких инсектицидов в продуктах пииотого происхождения авторы: Неиокдонов А.А., Метелица В.К.

Производные карбаматов

Колориметрический метод опредепааиа вупрацшш~1 _э    162

купрьцина-Н, Манеоа, Маркина» ХМТД в воадухе» продуктах питания растительного происхождения и биологических средах авторы: Клисонко М*А«, Векатейн Л.Ш„,

Экспрессное определенно тетраизтилтяураидиоуаьфада    164

(ТМТД) в зерне и зернопродуктах автор: Николаев А.В*

Определение остаточных количеств дикреаила в биодо-    16?

гических средах методом тонкослойной хромалографин автор: Сивохин И.А.

Прочие соединения

Определение 2-*мвтокси-3,6~дихлорбензойной кислоты    172

методом газо~кидкостной хроматографии авторы: Рыжков А*А., Гейд Ю.П,_В Бабин Е.П., Свнри • денко А»С«» Чекавская Л,А.

Количественное определение дикеибы (дианаха,    179

беявеиа~Л) в растениях и в почве методой хроматографии в тонком слое

авторы: Березовский Ч.Я., Самоовах Л.С., Никотин В.В.

Определение диурона, ллнурона, монуронв, проланида,    184

солана, фалорана в воде, почве, овощах методом хрома -тографяи в тонком слое евтор: Оаыосват I.C.

Колориметрический метод определения которая* (пахтаройa)    JH8

в хлопковом масле

аяторц: Новикова К.Ф., Меивцер Ф.Р., Алдомнкч Т*В.

Качественное я количественное определение каптала и    193

фталаиа в лине, виноградном соке, листьях и ягодах винограда, в почве и воде авторы: Вайптрауб Ф.П., Дронь Л,Л,

Определение мельпрокса в воздухе    199

авторы: Сорокина Л.В*, Клнсопго М.А.

Определение прометриня в почве, воде и растительном    203

материале методом хроматографии в тонком слое автор: Дроздова О-А.

Определение фенаэона в свекле, почве и воде    207

авторы: Эгерт В.9., Лиелгалве А.А.

Определение хлората иагиня в препарате-дефолианте,    2.ТЗ

хлопковом масле, ироте, жмыхе, османах, ядрах оемян и волокне хлопчатнике

авторы: Талипов II). Т., "жиппбяова Р.Х., Халимова УЛ*₉ Белобородова Н.Ф.

ЬУКААИ! -АКИШЫ'РАЯ!ЧЫЖИН КАЧВПНЕННиИ и коло-гММКГРИЧИЖИИ ЮШЧЕПТЬШШК ИЕ'ЮДЫ 011РВДEflЕНИЯ 11Ш1-iMtJOeOOA В РЙЛИТЙЯСШЙ ГиГ'БЕ И ПОЧВЕ *>

Характеристика препарата Метилиитрофос, О 0-диметил-0-(3-метил-4-нитрофенил)-тмо-фоофа? (I),

Мол. вес 277,2Ц

Синонотл: метатиои, оуыитион, фолитион, фенитро-гион. Технический продукт метилнитрофоса содержит в качестве примеси нетоксичный иэоиер - 0,0-дииетил-0-(3-иетил-4-нитрофенил)~тио-фосфат (П , который является синергистом для I изомера, В чи-отом виде иетклнитрофос представляет собой жидкость оветло-йелто го цвета о темпера урой кипения 145-147°С при 0,15 мм рг. ст.,    1,5475, dj}° «1,3060. Метилннтрофос нерастворим

в воде, растворим в органических растворителях - ацетоне, бев золе,метаноле, петролейном эфире. Для оельского хозяйства выпускается 30%-ный концентрат эмульсии.

ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ МЕТОД Принцип метода

Метод ооно ван на экстракции метилнитрофпса из раотений и почвы петролеяным эфиром, очистке экотракта с помощьо микро-сублимации и колоночной хроматографии на смеси из целита 545, окиси магния и активированного угля КАД-молотый, хроматографи ронанви на бумаге и качественной идентификации по величине Rf Реактивы и растворы

Петролейный эфир (теши кип. 40-70°0>, очи ценный серной кислотой.

Ацетон, очищенный перманганатом калия.

Неподвижная фаза: 2%-ное вазелиновое масло в диэтиловом эфире.

Подвитая фаза: смесь ацетон-метанол-вода (30:32:36) по объему.

х ^

' Разработан Ф .И .Патрчюку ^ 1И1ИИ био «готических методов защиты ряптенип, • . Кипияев.и

Активированный уголь, КАД-молотый.

Целит 545.

Окись магния, промытая водой, выоушенная при Ю5-130°С и просеянная через сито 0,25 мм.

Бром: 10#-ный раствор в четыреххлористои углероде.

Метилоранж: 0,2#-ный раствор в 50#-ном этиловом спирте.

Стандартный раствор ыетилнитрофоса: растворяют ОД г ме-тилнитрофоса в 100 мл бензола в мерной колбе;из этого раствора отбирает 2 мл и разбавляют до 100 мл петролейным вфиром. Полученный раствор содержит 20 шег препарата в1 мл.

Посуда и оборудование

Сосуд для хроматографии высотой 30 см и диаметром 20 см.

Эксикатор большой.

Колбы Эрле.?мейера на 50 и 100 мл и па 0,5 и 1,0 л.

Аппарат для микросублимации.

Хроматографические колонны 2 х 30 см.

Хроматографическая бумага Ленинградской фабрики, медленная , дважды промытая водой.

Пульверизатор.

Аппарат для перегонки.

Центрифужные пробирки.

Водяная баня.

Описание определения

Экстракция и очистка экотрактов Для экстракции метилнитрофоса из растительной массы л почвы используют петролейный э$ир. Почву (100 г) смешивают с 30 г б/в №_tS'0^ и экстрагируют ъ а парате Со колета в течение 2-х часов. Ветки и листья яблони экотрагируют на холоду в течение 18-20 часов (через ночь). Перед экстракцией измеряют площадь листьев по шаблону, а боковую поверхность веток определяют но формуле:

S - 3,55 WT.

где

V - объем веток (определяют по объему вытесненной воды после экстракции); ё «*- длина веток.

Экстракты готовят из представительной проб*¹ (около

-31-

1500 cu^), а я анализа берут аликвот экстракта, соответствующий 250 ои поверхности.

Очнотку экстрактов проводят иикросублимацией в вакууме н колоночной хроиатографией. Аликвот экстракта (250 см^) упаривают до объема 10-15 ил и переносят его в патрон аппарата для микро сублимации. Орг нический растворитель упахжвают досуха и сублимируют метилнитрофос при 2 мм рт.ст. и 130-135°С в течение 30 минут. Сконденсировавшийся на "холодном пальце" метил-нитрофоо смывают 20 мл петролейного эфира (лучше теплого), и этот экстракт используют для очистки на колонке.

Петролейный эфир упаривают дооуха, остаток растворяют в ацетоне (около 10-15 мл$. Колонку готовят из Эг целита 545,

3 г окиси магния и 0,5 г активированного угля КАД-молотый в виде 3-х яоев. Перед тем как залить экстракт, колонку промывают 30 мл чистого ацетона. Затем переносят количественно на колонку ацетоновый экстракт и промывают ее еще 60 мл ацетона.

Хроматографирование

Апетоновый элюат упаривают до объема 5 мл в аппарате для перегонки и переносят его в центрифуянjo пробирку, откуда ацетон упаривают до объема 0,5 мл. Этот концентрированный экстракт и чистый препарат наносят на хроматографическую бумагу на растоянии 2,7 см от нижнего края бумаги, 1,5 см от боковых ее краев и 2,5 ом друг от друга¹. Бумагу протаскивают через неподвижный растворитель и дают высохнуть в течение 5-10 минут, затем помещают в хроматографический сосуд, куда за час до этого был налит подвижный растворитель таким образом, чтобы нижний край ее погружался в подвижный растворитель па глубину 1^2 см. Сосуд плотно закрывают крышкой и дают подвижному растворителю подняться на высоту 20 см [около 1,5 часов), хроматограмму вынимают из сосуда и сушат на воздухе в

течение 20-30 минут. Затем ее подвергают действию паров брома, для чего ее помещают в эксикатор, на дне которого находится ХО^-ный раствор брома в четыреххлористом углероле, на 10-15 оек’/нд. Избытку брома дают испариться с бумат ч течение 20-30 минут, и хроматограмму опрыскивают хромо генным реактивом (0*2%~ным раствором метилоранжа) из пульверизатора. Изомеры метилнитрофоса проявляются в виде красных пятен на желтом Фоне. Значения Uf равны 0,55 для первого изомера и 0,65 для |* oi*»nv. Другое Феофороргаяическпе инсектициды (тиофос, три-

• 91-

хлориетафоо-Э) также разделяются друг от друга и не мешают идентификации метилнитрофоса.

КОЛОРИМЕТРИЧНЖИЙ МЕТОД

Принцип метода

Метод основан на извлечении препарата из определяемых материалов, очистке экстрактов, мокром ооянении до <уртофосфорной кислоты и определении последней в виде фоофорномолибденовой "сини" на фотоэлектроколориметре ФЭК-И-56 с красным светофильтром.

Реактивы и растворы

Петролейный эфир (темп. кип. *Ю-70°С), очищенный оерпой кислотой.

Соляная кислота (1:1).

Аммиак ко нцентриро ванный.

Серная кислота. IO^-ный раствор.

Смесь для сожжения - смесь концентрированных серной н азотной кислот (1:1).

Молибденовый реактив. Готовят следующим образом: а) растворяют 25 г молибдата аммония в 200 мл воды; б) смешивают 280 мл концентрированной серной кислоты с 520 мл воды. Раствор "а" вливают в раствор "б", переносят в литровую мерную колбу и доводят объем жидкооти до метки водой*

0,1^-ный раствор Jf-динитрофенола в воде.

2,5^-ный раствор^в соляной кислоте. Готовят свежим ежедневно.

Стандартный раствор метилнитрофоса в петролейнои эфире о содержанием 20 икг препарата в I »”».

Приборы и посуда

Фотоэлектроколориметр ФЭК-И-56 .

Аппарат для микро сублимации.

Алг. .рат для перегонки.

Колбы коничеокие на 50, 500 и 1000 мл.

Колбы мерные на 50 мл.

Колбы Кьельдаля на 100 мл.

Электроплитки.

Водяная баня.

-93-

Описание определения

Экстракция и очистка экотрактов

Экотракцию ыетиднитрофоса из растительной наосы и почвы проводят, как описано в хроматографической методе. Для колориметрического определения достаточна очиотка иикрооублииацией в вакууме. Поэтому сконденсировавшийся на "холодном пальце" метилннтрофоо омывают петролеяныи эфиром прямо в колбу Кьель-даля.

Построение калибровочных графиков

Для построения калибровочных графиков на чистом препарате задают аликвоты стандартного раствора в серию колб Кьельдачя

0    разным содержанием метиляитрофоса от 20 до 200 мкг. Органи-чеокий растворитель упаривают досуха на водяной бане, причем последние капли его удаляют вращением колбы с отсасыванием паров насосом Комовского. ^п колбу наливают Ч мл смеси серной и азотной кислот (1:1) и содернииое сжигают на электроплитке до появления белых паров. Колбу снимают с электроплитки и после охлаждения добавляют 3 мл концентрированной азотной кислотой продолжают сжигание до появления белых паров. Затем в охлажденную колбу добавляют 15-20 мл дистиллированной воды и нагревают до появления белых паров.

Содержимое колбы разбавляют 10 мл воды, колбу охлаждают под краном и переносят в мерную колбу на 50 мл, куда предварительно внооят 3 капли 0,1#-ного раствора j>-динитрофенола. Колбу дважды ополаскивают Ю мл воды, которые такие переносят в мерную колбу. Кислый раствор в мерной колбе нейтрализуют аммиаком, добавляя его по каплям при непрерывном перемешивании, до появления желтой окраски.

1елтую окраску -динитрофенола затем снинаюч добавлением

1    ил Ю^-ного раствора серной кислоты. Колбу охлаждают до комнатной температуры, в нее добавляют 2 мл молибденового реактива, и содернииое хорошо перемешивают.

Для восстановления фосфорномолибденовой кислоты добавляют Ч капли свежеприготовленного раствора хлорида олова, жидкость хорошо перемешивают и оставляют па ГО минут. Окрашенный в синий или голубой KBe* раствор колориметрируют на фото электро ко -лоряметре с красным светофильтром, используя кюветы с толщиной поглощающего «ноя в 30 мм. Полученное значение оптической

плотности за вычетом пуотой реактивов откладывает по оои ординат, а по оси абсциос откладывают мкг метилнитрофоса. В указанном интервале концентраций зависимость оптической плотности от концентрации метилнитрофоса являетоя прямолинейнойч Для построения калибровочных графиков на растительном материале или почве аликвоты стандартного раствора задают в готовый экстракт. Экстракт упаривают, очищают микросублимацией в вакууме, сжигают и определяют фосфор как обычно. Параллельно проводят определение фосфора в экотракте без метилнитрофоса. Значение оптической плотности пуотой пробы вычитают из значения оптической плотности отдельных определений'. Значение оптической плотности пустых проб равно обычно 0,045 для реактивов и 0.070 для растителышх материалов и почвы.

Определение метилнитрофоса в растительной пробе ft ..полно При определении метилнитрофоса в указанных материалах экстрагируют представительную пробу, а часть экотрактат под« вергают очистке и анализу, как опиоаио выше. Сущность анализа ничем на отличается от поотрооиия калибровочных графиков.

Расчот анализа

Количеотво препарата в мг/кг для почвы и роотительных материален, образцы которых взвешивают, инчиоляют по форму, з:

§• •

где

0- количество препарата, пай донное по калибровочному графику, мкг;

р -I навеска обраоца, г.

Количество препарата а мг/м² для растительных материале)), образцы которых измеряют по занимаемой площади (например, лм-‘ етья), вычисляют по формуле*

X **    * 10,

где    ^р

G - количество препарата, найденное по калибровочному графику, мкг;

р - площадь образца, ом®*

- 95'-

СОДЕРЖАНИЕ

Методические указания по разработке газо-хрома-тографичеоких методов анализа остаточных коли-чеотв пестицидов составлено Пивоваровым Г.А.

ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Определение хлорорганических ядохимикатов салдрина,    II

гексахлорана, гептахлора, ДДТ, ДДД,ДДЭ и д_г.) в воде, овощах, фруктах и биологических средах методом газовой хроматографии- авторы: Гиренко Д.Б., Клисенко М.А.

Определение ДДТ, ДДЭ.ДДД, линдана и ТХМ-3 в молоке и    18

молочных продуктах методом газовой хроматографии авторы: Молочников В.В., Мочалов В.И., Моргунова А.П.

Колориметрический метод определения ДДТ в молоке и    23

молочных продуктах

авторы: Молочников В.В., Мочалов З.И.

Определение остаточных количеств гекоахлорбутадиена    27

в вине, соке и воде методом гаэо-кидкоотной хроматографии о использованием детектора по захвату электоронов авторы: Пивоваров Г.А*, Гар К.А., Алексеева Е»М«, Тимофеева 0,Н., Шварцман Г.А.

Спектрофотометрическое определение гекоахлорбутадиена    33

(ГХБД) в воздухе

авторы: Гулько А.Г., Драновокая Л.М.

Определение в растительных ыаолах ДДТ, Гамиа-1ХЦГ и    36

др. хлорорганических пестицидов авторы: Клиоенко М.А., Юркова З.Ф_М

Определение ДДТ,ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола    38

в хлопковых шротах, обогащонннх и иеобогагдинных липидами авторы: Белова А,Б., Новикова Л.В.

Определение ДДТ,ГПХ и у -ГХЦГ в почве, сахарной овекла и 47 картофеле методом тонкослойной хроматографии авторы: Косматый Е.С., Грицаенко Н*Н._в

Колориметрический экспресс-метод определения ДДТ в    49

корне- и клубнеплодах автор: Стеилковская ЛоАо

Определение полихлорпинена в воде* почве, картофеле    58

свекле, ее ботве, мясе в присутствии ДДТ и других ялорорганкческих пестицидов и лсшшслоркамфена в почве авторы: Клисепко М,А., Верблюдова Н.Й., Косматый «ѻ,

Грицианко НоИ.

Определение остатков Ш в растениях методом тонко-    68

одойной хроматографии

авторы: Косматый 2*0*, Полонская ФЛ!._# Тверская Б*Ы«.

Определение кельтана в огурцах методой тонкослойной    66

хроматографии

авторы: Фомичева Л*Г., Ефимова Л.И.

Определение эфирсульфоната в винограде, соке, воде    71

вине методом ТСХ

авторы: Голубев Т«Й₀, Владимирова Л*Г._С Колобродова Ю»И.

Фосфороргаяические соединения

Определение апрекса и каратана в растительных продуктах 74 н воде

авторы: Клисепко М*А*, Им и гида на А„М*

Определение бутифооа в продуктах промышленной лереоа-    80

ботки хлопка-сырца измена» хлопчатника методом тонкослойной хроматографии

авторы: Талипов ШДа, Дзиянбаева Р.Х., Халимова У До,

Шейнина Р„И., Белобородова Н*Ф«

Полярографический метод определения метилнитрофооа    86

в растительной пробе и почве авторы: Патваыку Ф#И._# Сороковая ЛоВ*

З^ыашо-хроиатохтрафичеокий качественный s колоримотрмческиН 90 ноли явственный методы определения дояиашззрофооа в расти-яельяой пробе и почве автор: Иатраику ®д*