МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

по профилактике и оздоровлению неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота стад, ферм, хозяйств, населенных пунктов и административных территорий с применением живой вакцины из слабоагглютиногенного штамма В. abortus 82 и антигена живого из инагглютиногенного штамма В. abortus R-1096

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ по профилактике и оздоровлению неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота стад, ферм, хозяйств, населенных пунктов и административных территорий с применением живой вакцины из слабоагглютиногенного штамма В. abortus 82 и антигена живого из инагглютнногенного штамма В. abortus R-1096

Москва 2016

Контроль благополучия стада осуществляется по результатам бактериологических исследований абортированных плодов и серологических исследований на бруцеллез в РА и РСК или РА и РИД, или в РИГА, или в ИФА, или в других реакциях.

При сохраняющейся угрозе заноса возбудителя инфекции стадо реиммунизируют антигеном R-1096 нс ранее чем через год, три года подряд. В случае отсутствия в течение этого времени больных бруцеллезом животных, иммунизацию крупного рогатого скота противо-бруцеллезными вакцинами в этой местности прекращают.

2.2. Мероприятия в неблагополучных оздоравлеваемых стадах (рис. 2)

2.2.1.    Всех животных иммунизируют антигеном R-1096.

2.2.2.    Первое исследование проводят через 15 суток в РСК с R-антигеном.

2.2.2.1.    При отсутствии положительной РСК с R-антигеном сыворотку крови такого животного сразу же псреисслсдуют в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном или РА и РИД, или в РИГА. Животных. давших положительный ответ с единым бруцеллёзным антигеном. считают больными и удаляют из стада.

2.2.2.2.    Отрицательно реагирующих по всем реакциям допривива-ют антигеном R-1096 и через 20-25 суток проверяют иммунный ответ в РСК с R-антигеном.

Если обнаруживаются отрицательно реагирующие по веем реакциям животные после допрививки. то их выбраковывают как имму-нотолсрантных животных и нс используют для воспроизводства.

2.2.3.    Положительно прореагировавших в РСК R-антигеном животных исследуют через 30 дней после введения антигена R-1096 в РСК с R-антигеном.

2.2.3.1. При отсутствии положительной РСК с R-антигеном сыворотку крови такого животного псреисслсдуют в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном или РА и РИД. или в РИГА. Животных, давших положительный ответ с единым бруцеллёзным антигеном, считают больными и удаляют из стада.

2.2.4.    Положительно прореагировавших в РСК R-антигеном животных иммунизируют вакциной из шт.82.

2.2.5.    Через 1,5 и 3 месяца после иммунизации вакциной из шт. 82 проводят серологическое исследование животных в РИД с О-ПС антигеном.

2.2.5.1.    При положительной РИД все положительно прореагировавшее поголовье удаляют из стада (5.1.1), а остальных животных ежемесячно исследуют в РИД (5.1.2) с интервалом нс менее месяца. В случае двукратной положительной РИД исследуют и в РА, РСК с единым бруцеллезным и РИГА, и РСК R-антигеном до получения двух подряд отрицательных результатов на бруцеллёз по всему стаду. Положительно реагирующих удаляют из стад (5.1.1).

2.2.6.    После получения отрицательного результата у всего стада (5.2), всю группу животных оставляют под контрольным наблюдением в течение 6 месяцев. За этот период проводят два исследования на бруцеллез по РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном (РСК R-антигсном и РИД) с промежхтками в 3 месяца.

2.2.6.1.    В случае выделения положительно реагирующих животных проводят ежемесячные исследования поголовья по РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном или РИГА, для дифференциации характера реакции РСК R-антигсном. до получения двукратных отрицательных результатов серологического исследования с интервалом нс менее месяца.

2.2.7.    При отс\тствии в течение этого времени абортов бруцеллезного происхождения и при отрицательных результатах контрольных исследований на бруцеллез, группу животных считают благополучной по бруцеллезу.

2.2.8.    Антиген из штамма R-1096 применяют в течение трех лет ежегодно. В случае отсутствия в течение этого времени больных бруцеллезом животных вакцинацию крупного рогатого скота противо-бруцеллезными вакцинами прекращают.

12

Внедрение в ветеринарную практику усовершенствованной системы специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота с применением живой вакцины из слабоагглютиногсиного штамма В. abortus 82 и антигена живого из инагглютиногенного штамма В. abortus R-1096 позволит упростить проблему дифференциальной серологической диагностики в иммунизированных стадах, предотвратить возникновение новых очагов и ускорит оздоровление неблагополучных хозяйств от этой инфекции.

13

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ......................................................................................................3

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ .............................................................................4

2. МЕРОПРИЯТИЯ ПО ПРОФИЛАКТИКЕ В БЛАГОПОЛУЧНЫХ.

НО УГРОЖАЕМЫХ ПО ЗАНОСУ ВОЗБУДИТЕЛЯ ИНФЕКЦИИ СТАДАХ И ОЗДОРОВЛЕНИЮ СТАД. ФЕРМ. ХОЗЯЙСТВ. НАСЕЛЕННЫХ ПУНКТОВ И АДМИНИСТРАТИВНЫХ ТЕРРИТОРИЙ, НЕБЛАГОПОЛУЧНЫХ ПО БРУЦЕЛЛЕЗУ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА....................8

2.1. Мероприятия в благополучных стадах, в которых существует угроза заноса возбудителя инфекции и поголовье отрицательно реагирует по серологическим реакциям на бруцеллез, не регистрируются аборты бруцеллезной этиологии и которые не применяют противобруце.иёз-

14

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ но профи, тактике и опоров, iciiiiio неблагополучных но бруцеллезу крупною рогатого скот а стад* ферм, хозяйств, населенных пунктов и административных территорий с применением живой вакцины нз слабоап.тют иногенного штамма В. abortus 82 н антигена живого из инап .пот иногенного ш гамма В. abortus R-1096

I lucmрукт и в но -мет од ическое издание

Редактор НА. Буцко Обложка художника П.В. Жукова Компыо горна нередка ТВ. Морозовой Корректор В А. Белова

fgnu® rosin formagrotech. ru

11одписано к печат ь 07.06.2016 Форма т 60x84/16 Печать офсетная Бумага офсетная Гарнитура шрифта Times New Roman Печ. л. 1.0 Тираж 500 экз. Изд. заказ 57 Тип. заказ 225

Отпечатано в типографии ФГБНУ "Росинформагротех”. 141261.1кк. Прандинский Московской обл.. ул. Лесная. 60

УДК 619:616.98:579.841.93:636.2 ББК 48 М 54

Авторы:

М. А. Косарев, зав. сектором, канд. биол. наук;

А. М. Фомин, глав. науч. сотр., д-р вет. наук, проф.;

К. М. С а. таков, глав. науч. сотр.. д-р вет. наук, проф.;

А. И. Ники I им. директор, канд. вет. наук; Г.М. Сафина, вед. науч. сотр..

канд. вет. наук (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (г. Казань);

О. Д. Скляров, зав. лабораторией, д-р вет. наук (ФГБУ «ВГНКИ» (Москва)

Ответственный за выпуск:

В.Н. Боровой, директор Дспвстсринарии Минсельхоза России

Рснен тенты:

Р. А. Хамзин, директор ассоциации ветеринарных врачей Республики Татарстан, д-р вет. наук;

Д. А. Хузнн, зав. лабораторией биотехнологии, д-р биол. наук, доцент (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (г. Казань)

Методические рекомендации но профилактике и оздоровлению М 54 неблагополучных но бруцеллезу крупного рогатого скота стад, ферм, хозяйств, населенных пунктов и административных территорий с применением живой вакцины из слабоап лгатиноген-но1 о штамма В. abortus 82 и антигена живого из ннагглкггнно-генного штамма В. abortus R-109: инструктивно-мстод. издание. -М.: ФГБНУ «Росинформагротсх». 2016. - 16 с.

ISBN 978-5-7367-1155-0

Представлена усовершенствованная система специальных противоэпизооти-ческих мероприятий по профилактике бруцеллеза и оздоровлению от него спи. ферм, хозяйств, населенных пунктов и административных территорий с применением специальных средств и методов диагностики и профилактики болезни.

Предназначены хзя специалистов государственной ветеринарной службы субъектов Российской Федерации, ветеринарных лабораторий, научных сотрудников, специализирующихся в области инфекционной патологии, студентов и слушателей курсов повышения квалификации.

Рекомендовано к изданию секцией ветеринарии Научно-технического совета Минсельхоза России (протокол №7 от 15 февраля 2016 г.).

УДК 619:616.98:579.841.93:636.2 ББК 48

ВВЕДЕНИЕ

На современном этапе при проведении противобруцеллезных мероприятий актуальной остаётся специфическая профилактика болезни. При этом ветеринарной практике требуются высокоэффективные иммуногенные вакцины и разные схемы их применения, удобные для реализации, в том числе в комплексе с другими иммунобиологическими препаратами.

В последнее десятилетие ситуация по бруцеллезу крупного рогатого скота в России по разным причинам осложнилась, ежегодно увеличивается количество неблагополучных пунктов. Анализ показывает. что обострение ситуации по бруцеллез) во многом обусловлено отсутствием точного учета поголовья в личных подсобных и крестьянских хозяйствах, несанкционированным перемещением животных из неблагополучных по бруцеллез)' территорий в благополучные; также отсутствием должного специфического иммунного фона среди животных в неблагополучных и угрожаемых по бруцеллезу хозяйствах. При этом нс анализируются данные о заболевании бруцеллезом иммунизированных и не иммунизированных животных, не проводится контроль иммунного ответа на введение вакцины и серологическая дифференциация иммунизированного скота.

Принцип системы специфической профилактики заключается в том, что животным вначале вводят антиген из штамма Brucella abortus R-1096 для выявления латентных форм бруцеллеза крупного рогатого скота, который позволяет выявлять скрыто больных животных и предотвращать поствакцинальные осложнения при последующем введении вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота из слабоагглютиногснного штамма Brucella abortus 82, что способствует быстрому удалению больных животных из стада и созданию иммунного фона у всего поголовья.

3

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Бруцеллез (лат. brucellosis) - острое инфекционно-аллергическое, зоонозное заболевание с высокой потенциальной возможностью перехода в хроническую форму.

Для диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота применяются бактериологический (бактериоскопия; выделение культуры бруцелл на питательных средах; биологическая проба на морских свинках) и серологический методы (реакция агглютинации в пробирках (РА); реакция связывания комплемента (РСК) или реакция длительного связывания комплемента (РДСК). пластинчатая реакция агглютинации с Роз-Бенгат антигеном - роз-бенгат проба (РБП); кольцевая реакция с молоком (КР); реакция иммунодиффузии с О-ПС антигеном (РИД); реакция непрямой гемаглютинации (РИГА); иммуно-ферментный метод (ИФА), в необходимых случаях молскулярно-гснстичсскис (полимеразная цепная реакция - ПЦР) и другие методы исследования с учетом эпизоотологичсских данных, а также клинических и патологоанатомических признаков болезни.

Бактериологическое и серологическое исследования материала от животных и молекулярно-генетические исследования проводят согласно действующему наставлению по диагностике.

Заболевание бруцеллезом считается установленным:

•    при выделении культуры бруцелл из биоматсриата или положительной биопробы, а также при положительных результатах серологических исследований нсиммунизированного скота - с наличием антител 200 МЕ/мл и выше в РА. кроме того, при положительных результатах в РИД; в РСК в разведении сыворотки 1:5 и выше;

•    при выявлении среди нсиммунизированного противобруцеллез-ными вакцинами крупного рогатого скота только в РА с содержанием антител 50-100 МЕ/мл. их обследуют повторно через 15-30 дней. При повышении титров заболевание считается установленным, при сохранении реакций проводят дополнительные исследования по дифференциации их согласно утвержденным методикам;

•    при выявлении в стадах крупного рогатого скота, ранее подвергавшегося вакцинации против бруцеллеза, положительно реагирующих животных только в РА нс выше 200 МЕ/мл и РСК в разведении сыворотки крови нс выше 1:10 проводят повторное исследование через 15-30 дней с дифференциацией поствакциназьного характера рс-

4

акции от постинфскционного в стадах крупного рогатого скота, иммунизированного вакциной из штамма В. abortus 82. При повышении титров РА и/или РСК и отрицательными результатами поствакци-н&тьных реакций заболевание считается установленным;

•    при выделении в неблагополучных по бруцеллезу стадах крупного рогатого скота, ранее нс вакцинированных против бруцеллеза животных, положительно реагирующих в РА в титре ИХ) ME и выше или (и) РСК (РДСК) в разведении 1:5 и выше, признают больными.

В зависимости от эпизоотического состояния поголовья животных по бруцеллезу с целью определения комплекса профилактических и оздоровительных мероприятий стада животных, фермы, хозяйства, населенные пункты и административные территории (районы, области, края, республики) подразделяют на три категории:

•    свободные от бруцеллеза, в которых более десяти лет нс было выделений больных животных и нс проводилась иммунизация против этой инфекции;

•    благополучные, но угрожаемые по заносу возбудителя инфекции, в которых поголовье животных отрицательно реагирует по серологическим реакциям на бруцеллёз, нет абортов бруцеллезной этиологии, но есть опасность заражения со смежных (граничащих) неблагополучных стад животных, ферм, хозяйств, населенных пунктов и административных территорий;

•    неблагополучные, в которых выявлены больные животные.

Благополучие по бруцеллезу животноводческих ферм, хозяйств, населенных пунктов, районов, областей, краев и республик обеспечивается:

•    охраной ферм, стад животных в населенных пунктах от заноса в них возбудителей болезни с животными или через предметы внешней среды путем осуществления комплекса организационно-хозяйственных, зоогигис-ничсских и ветеринарно-санитарных профилактических мер. проведением плановых диагностических исследований на бруцеллез животных, а также обязательным карантинированисм всех посту пающих в хозяйство животных в течение 30 дней:

•    оздоровлением неблагополучных по бруцеллезу ферм, хозяйств, населенных пунктов и предотвращением распространения возбудителя болезни из очагов инфекции.

5

В качестве средства специфической защиты от бруцеллеза в комплексе ветеринарных мер по профилактике и ликвидации этой болезни применяются противобруцеллезные вакцины для иммунизации крупного рогатого скота.

В усовершенствованной системе специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота применяются иммунобиологические средства и компоненты.

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из слабо-агглютиногенного штамма Brucella abortus 82 живая сухая (далее - вакцина из шт. 82). Организация-производитель: ФГУП «Щелковский биокомбинат».

Биологические свойства: вакцина вызывает формирование иммунного ответа у крупного рогатого скота против бруцеллеза через 3 недели после введения продолжительностью не менее 12 месяцев. Вакцинный штамм 82 находится в SR-форме. Агглютинины и компле-мснтсвязывающис антитела, синтезированные в ответ на введение вакцины, сохраняются в организме животных в течение 6 месяцев. Вакцина безвредна, лечебными свойствами нс обладает.

Назначение: иммунизация в общем комплексе мер борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота в неблагополучных и благополучных (угрожаемых) по бруцеллезу хозяйствах.

Набор для дифференциальной серологической диагностики бруцеллеза и контроля иммунного ответа крупного рогатого скота, иммунизированного вакциной из штамма В. abortus 82 (далее -набор). Организация-производитель: ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (г. Казань).

Биологические свойства компонентов, входящих в набор:

•    бруцеллезный R-антигсн взаимодействует в РСК со специфическими R-антитслами сыворотки крови животных, иммунизированных вакциной из штамма 82, и не взаимодействует с S-антителами сыворотки крови животных, иммунизированных вакциной из штамма 19 или больных бруцеллезом;

•    бруцеллезная R-сыворотка содержит специфические R-антитсла, взаимодействующие только с R-антигсном;

•    бруцеллезная S-сыворотка содержит специфические S-антитсла,

6

дающие положительную РСК только с единым бруцеллезным антигеном для РА. РСК и РДСК.

Назначение', набор предназначен для дифференциальной серологической диагностики бруцеллёза и контроля иммунного ответа у крупного рогатого скота, привитого вакциной из шт. 82. или антигеном из штамма Brucella abortus Я-1096.

Антиген из штамма Brucella abortus R-1096 для выявления латентных форм бруцеллеза крупного рогатого скота (далее - антиген R-1096). Организация-производитель: ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (г. Казань).

Биологические свойства антигена R-1096:

•    вызывает сенсибилизацию крупного рогатого скота к бруцеллам через две недели после однократного введения продолжительностью до 6 месяцев;

•    синтезированные в организме сенсибилизированных животных R-агглютинины и комплемснтсвязывающис антитела сохраняются в течение нс менее 2 месяцев;

•    антиген провоцирует синтез S-бруцеллёзных антител у инфицированных бруцеллами животных с латентной или скрытой формой болезни, предотвращает абортогсннос действие вакцины из шт. 82 при введение его стельным, ранее не иммунизированным животным, и пролонгирует иммунитет при введении животным, иммунизированным вакциной из шт. 82;

•    антиген безвреден, лечебными свойствами нс обладает.

Назначение'.

•    провокация синтеза S-бруцеллезных антител у инфицированных бруцеллами животных с латентной или скрытой формой болезни с целью выявления и удаления их из стада;

•    сенсибилизация не иммунизированного против бруцеллеза крупного рогатого скота в неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах или в благополучных хозяйствах, в которых существует угроза заноса возбудителя инфекции перед иммунизацией вакциной из шт. 82, с целью профилактики вызываемых сю абортов;

•    поддержание перманентного иммунитета без поствакцинатьной ссропозитивности путём ежегодного, в течение двух-трех лет. введения коровам, иммунизированным вакциной из шт. 82.

7

2. МЕРОПРИЯТИЯ ПО ПРОФИЛАКТИКЕ В БЛАГОПОЛУЧНЫХ, НО УГРОЖАЕМЫХ ПО ЗАНОСУ ВОЗБУДИТЕЛЯ ИНФЕКЦИИ СТАДАХ И ОЗДОРОВЛЕНИЮ СТАД, ФЕРМ, ХОЗЯЙСТВ, НАСЕЛЕННЫХ ПУНКТОВ

И АДМИНИСТРАТИВНЫХ ТЕРРИТОРИЙ, НЕБЛАГОПОЛУЧНЫХ ПО БРУЦЕЛЛЕЗУ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Мероприятия по профилактике и оздоровлению от бруцеллеза крупного рогатого скота проводятся в благополучных, но в которых существует угроза заноса возбудителя инфекции, и в неблагополучных стадах, фермах, хозяйствах, населенных пунктах и административных территориях на взрослом скоте и молодняке 10-15-месячного возраста.

2.1.    Мероприятия в благополучных стадах, в которых существует угроза заноса возбудителя инфекции и поголовье отрицательно реагирует по серологическим реакциям на бруцеллёз, не регистрируются аборты бруцеллезной зтиологии и которые не применяют противобруцеллёзные препараты (рис. 1):

2.1.1.    Всему поголовью вводят антиген R-1096.

2.1.2.    Через 20-25 дней после введения антигена R-1096 исследуют иммунный ответ в РСК R-антигсном.

2.1.2.1.    При отсутствии положительной РСК с R-антигсном, сыворотку крови такого животного сразу же псрсисследуют в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном или РА и РИД, или в РИГА.

2.1.2.2.    Животных, давших положительный ответ с единым бруцеллёзным антигеном, считают больными и удаляют из стада, вес стадо переводится в неблагополучную категорию и с ним проводят мероприятия как в неблагополучных оздоравлеваемых стадах.

2.1.2.3.    Отрицательно реагирующих по всем реакциям допривива-ют антигеном R-1096 и через 20-25 суток проверяют иммунный ответ в РСК с R-антигсном.

Если обнаруживаются отрицательно реагирующие по всем реакциям животные после допрививки. то их выбраковывают как имму-нотолсрантных животных и нс используют для воспроизводства.

2.1.3.    Положительно прореагировавших в РСК R-антигсном животных через 25-30 дней, иммунизируют вакциной из шт. 82.

2.1.4.    Следующее исследование проводят спустя 6 месяцев.