МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Сборник № 25

Москва 1997 г.

Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

ТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 25

Москва

Центр научно-технической информации, пропаганды и рекламы 1997г.

Уст - объем воздуха, отобранного для анализа, приведенный к стандартным условиям по ГОСТ 12.1.005-76, при температуре 20°С и атмосферном давлении 101 кПа (760 мм.рт.ст.) в литрах и вычисляемый по формуле:

Уст= Vt х 293 х Р (273 +0x101,3

гле:

Vt - объем воздуха, взятый для анализа при температуре t в месте отбора пробы, л; Р - атмосферное давление, кПа; t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

3. Требования безопасности.

При проведении анализов необходимо выполнять правила техники безопасности при работе со стеклом, электрооборудованием, ЛВЖ, кислотами, а также соблюдать правила производственной санитарии и личной гигиены при работе в химической лаборатории.

92

Алфавитный указатель

стр.

1. 2-Амино-4,6-днмстил-1.3-пиримилнн - 9 2. 2-Амнно-4-лиметнламнно-6-хлор~1.3.5-триазин - 16.21 3. 2-Метил-4-лнметнламннометил-бензнмнлазол-5-ол-днгилрохлорнл -5 4. 2-Метокснкарбонкл-М-(4.б-лнмсткл-1.3-пирнмнлнн-2ил>-ямннокарбонкл- бензо л сульфамид - 45 5. 2-Метокснкар6оннл-М-(4.6-лнметнл-1.3-пнрнмндн11-2ил')-ами11окарбоннл- бензолсульфамнд калиевая соль - 45 6. 5-оксн-КЗ-бензоксатнолон -2 - 65 7. N - Г4-метокси-6-метнл~1.3,5-триазин-2ил)-Г'Г -42.5-днметилфенил)сульФо- ннлмочевнна - 70 8. 1Ч-окснд-2,6-лутидина и янтарной кислоты комплекс - 36.40 9. Амбиол -5 10. Аминопиримнднн -9 И. Аминофумаровой кислоты лиметнловый эфир -27 12. Анкор-5 -45 13. Анкор-85 -45 14. Грамекс.метаболит и полупродукт синтеза - 16,21 15. Лигнлроаспарагиновой кислоты лнмстиловый эфир -27 16. Днннконазол - 33 17.1-Карбамоил-3(5)-метилпнразол -51 18. Каскад -73 19. Ленок - 80.87 20. Люцис - 36.40 21- ММП -51 22. Номолт -61 23. Павстим -54 24. Препарат-1 - 80.87 25. Соналан -97 26. Спайк -57 27. Суми-8 -33 28. Тсбутиурон -57 29. Тефлубензурон -61 30. Тиолон -65 31. Утнур -70 32. Флуфеноксурон -73 33. Фосфитов смесь -77 34. Фумар - 27 35. Хардин - 80.87 36. Хлорсульфурона калиевая соль - 80.87 37. Экостим -94 38. Эталфлуралнн -97 39. Эфаль-М.промежуточные продукты синтеза -77

106

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Редакционная коллегия:

Калинин В.Л. -к.с.н., профессор, зав.кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н., Российский институт лекарственных культур; Борисов Г.С.-зав. KTJI РРСТАЗР; Федорова Н.Е.- к.х.н., МНИИГ им.Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ответственный за выпуск - Орехов Д.А., председатель Госхимкомиссии

тел. 207-63-90

Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией защиты растений Департамента химизации и защиты растений Минсельхозпрода РФ.

г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосъемки 11/41 тел.(246) 3-09-52

СОДЕРЖАНИЕ:

1.    Временные методические указания по определению остаточных количеств 2-метил-4-димстиламинометил- бензимидазол- 5 - ол- дигидрохлорида в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91 г. № 6264-91     стр.5

2.    Методические указания по измерению концентраций 2-амино-4,6 диметил-1,3-пиримидина в воде методом жидкостной хроматографии.

29.07.91 г. №6152-91     9

3.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор -

1.3.5- триазина в воде хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6161-91     16

4.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6- хлор-

1.3.5- триазина в воздухе хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6159-91     21

5.    Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии.

29.07.91    г. № 6230-91     27

6.    Методические указания по измерению концентрации диниконазола в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6156-91     33

7.    Методические указания по определению остаточных количеств N-okhch-2,6 -лутидина в воде, почве, зеленой массе люцерны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    №6179-91     36

8.    Временные методические указания по измерению концентраций М-окиси-2,6-лутидина в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6178-91     40

9.    Методические указания по измерению концентраций 2-метоксикарбонил-М-(4,6 -диметил-1,3-пиримидин-2-ил)-аминокарбонил-бензолсульфамида и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом жидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6171-91     45

10.    Временные методические указания по измерению концентраций карбамоил- метил-пиразола в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6236-91     51

11.    Методические указания по измерению концентраций павстима в воздухе рабочей зоны колориметрическим методом.

29.07.91    г.    № 6277-91     54

12.    Методические указания по измерению концентрации тебутиурона в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6199-91     57

13. Временные методические указания по измерению концентраций тефлубензурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91 г. №6234-91

14.    Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии.

29.07.91    г.    №6168-91     65

15.    Методические указания по измерению концентраций М-(4-метокси-б-метил-1,3,5-триазин^-шО-Г'Г -(2,5-диметил фенил) сульфонилмочевина в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6240-91     70

16.    Временные методические указания по измерению концентраций флуфеноксурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91    г.    № 6235-91     73

17.    Методические указания по измерению концентраций смеси фосфитов (промежуточные продукты синтеза препарата эфаль-М) в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г.    №6266-91     77

соли в воде методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6167-91     80

19.    Методические указания по измерению концентраций хлорсульфурона и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. №6170-91     87

20.    Методические указания по измерению концентраций экостима в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г. № 6276-91    ............................................ 94

21.    Методические указания по определению остаточных количеств эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6244-91    ............................................ 97

Алфавитный указатель.     106 ¹

Утверждено Министерством здравоохранения СССР “29” июля 1991 г.

№6170-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ХЛОРСУЛЬФУРОНА И ЕГО КАЛИЕВОЙ СОЛИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ.

1. Краткая характеристика препарата.

Торговое наименование: препарат-1, хардин, ленок.

Производитель:Россия.

Действующее вещество: калиевая соль хлорсульфурона.

Калиевая соль Г4-[(4-метил-6-метокси-1,3,5-триазинил-2)аминокарбонил|-2-хлоробензол-сульфонамида.

Структурная формула:

/V^е'

ОСНз.

Эмпирическая формула: C12H11N5O4SCIK.

Молекулярная масса: 395,50.

Калиевая соль хлорсульфурона представляет собой тонкодисперсный порошок светлосерого цвета.

Растворимость при 295,5°К (22,5°С) в 100 гр. растворителя:

1. Вода    - 14

2.    Ацетон    - 0,28

3.    Этиловый спирт    - 1,65

4.    Бензол    - 1,28

Упругость паров калиевой соли хлорсульфурона при 298°К (25°) < 1 х I0*² мм.рт.ст.

При pH 2-3 калиевая соль хлорсульфурона переходит в хлорсульфурон, в результате чего растворимость в воде уменьшается, а в органических растворителях резко возрастает. В воздухе рабочей зоны может находиться в виде аэрозоля.

ЛД50 для крыс - 9220,5 мг/кг.

ПДК калиевой соли хлорсульфурона в воздухе рабочей зоны 5 мг/м^э .

Область применения препарата хардин 12,5% в.р. - селективный гербицид для до- и послевсходовой обработки посевов злаковых.

2. Методика определения калиевой соли хлорсульфурона .

2.1.    Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода.

Определение основано на улавливании аэрозоля вещества на фильтр, извлечении вещества с фильтра ацетоном и газожидкостной хроматографии с применением селективного детектора по захвату электронов (ДЭЗ).Отбор проб и их концентрирование проводился с применением фильтрующего материала-стекловата или обеззоленный бумажный фильтр “синяя лента”.

2.1.2.    Избирательность метода.

Метод обеспечивает полную селективность. Определению не мешают полупродукты получения препарата.

2.1.3.    Метрологическая характеристика метода.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 1,5 нг.

Нижний предел измерения в воздухе 0,5 мг/м³.(при отборе 15 литров).

Диапазон измеряемых концентраций калиевой соли хлорсульфурона (КСХС) в воздухе от 0,5 до 10 мг/м³.

Суммарная погрешность не превышает 18,0%.

Время выполнения определения (включая отбор образца) КСХС в одной пробе при одновременной подготовке двух параллельных образцов 30 минут.

2.2.    Реактивы, растворы и материалы.

Ацетон, ос.ч., ТУ 6-09-3513-82.

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263-76.

Твердый носитель - сферохром-1, зернением 0,15-0,30 мм.

Жидкая фаза - жидкость кремнеорганическая ПФМС-4, ГОСТ 15866-70.

Азот,ос.ч., ГОСТ 9293-73, из баллона с редуктором.

Этанол, абсолютированный, ГОСТ 17299-78.

Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.

Кислота ортофосфорная, ч., ГОСТ 6552-68.

Калиевая соль хлорсульфурона (КСХС) с содержанием основного вещества не менее 98%.

Стекловата тонковолокнистая.

Фильтры обеззоленные “синяя лента”, ТУ 6-09-1678-77.

2.3.    Приборы, аппаратура, посуда.

Газовый хроматограф типа “Цвет-100”, ТУ 1.550.127, снабженный детектором по захвату электронов, порог чувствительности детектора по линдану - 2,5x10-¹⁰ мг/с.

Колонка стеклянная длиной 100 см, с внутренним диаметром 3 мм.

Аспираторное устройство, модель 822 ТУ 61-1-862-72, с объемным расходом воздуха от 1 до 20 дм/мин.

Цилиндр 4-50, ГОСТ 1770-74.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл и 50 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10,5,2 мл с делениями.

Делительные воронки, вместимостью 100 мл, ГОСТ 25336-82.

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.

Колбы грушевидные вместимостью 50 мл, ГОСТ 9737-70.

Колба 2-25-2, ГОСТ 1770-74.

Колба 2-50-2, ГОСТ 1770-74.

Воронка В-36-50 ХС, ГОСТ 25336-82.

Чашка фарфоровая вместимостью 250 мл, ГОСТ 9X47-73.

Пробирка П-2-10-14/23 ХС, ГОСТ 1770-74.

Пробирка П-2-15-14/23 ХС, ГОСТ 1770-74.

Холодильник XI11-1-200-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82.

Воронка ВК-50 ЗС ГОСТ 25336-82.

Линейка измерительная, цена деления 1 мм, ГОСТ 4272-75.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Рег7лятор температуры УКТ-4 У-2, ТУ 25-111378-77.

Термометр контактный типа ТПК, ГОСТ 9871-61.

Термометр, ГОСТ 215-73, ТЛ-2, цена деления 1° С.

Секундомер механический СОП-пр. 2аЗ-000, ГОСТ 5072-79.

Барометр ВК-75, ТУ 35-04-223-75, цена деления 0,1 кПа.

Весы аналитические,лабораторные,общего назначения,тип ВЛА-200М,ТУ 25-06-1049-72.

Весы лабораторные,технические ВЛКТ-500М, 4-ый класс, ГОСТ 24104-80.

Набор разновесов Г-2-210, ГОСТ 7328-82.

Насос водоструйный, ГОСТ 25336-82.

Шкаф сушильный, электрический 2В-151,ТУ 64-1-1411-76.

Аппарат универсальный для встряхивания АВУ-6с,ТУ 64-1-2451-72.

Алонж для фильтров ИРА-20он, ТУ 690-00-000.

Бюксы СН-60/14 или СН-85/15, ГОСТ 7148-70.

2.4.    Отбор пробы.

Готовят стеклянную трубку длиной 50-100 мм с внутренним диаметром 6 мм. С одной стороны в трубку на расстоянии 5-7 мм от края помещают предварительно промытую в ацетоне и высушенную стекловату массой 70-100 мг. Стекловату слегка уплотняют так, чтобы она размещалась в трубке на длине 15-20 мм. При 2-ом варианте, т.е. при использовании бумажного фильтра “синяя лента”, в соответствии с размером алонжа для фильтра, плотно прижимают его накидной гайкой для обеспечения герметичности между фильтром и воронкой алонжа.

Подготовленную трубку или алонж с фильтром присоединяют к аспиратору и пропускают анализируемый воздух с объемным расходом 3 л/мин в течение 5 мин, что обеспечивает измерение 1/2 ПДК (ОБУВ). Трубка с закрытыми концами может храниться в холодильнике до 2-х месяцев. Это же относится к хранению фильтра в бюксе.

2.5.    Подготовка к определению.

2.5.1. Приготовление стандартных и градуировочных растворов.

Стандартные растворы калиевой соли хлорсульфурона:

0,10 мг/мл - раствор №1.

0,01 мг/мл - раствор №2.

10-20 мг КСХС взвешивают в мерной колбе вместимостью 25 мл на аналитических весах, записывая результат до четвертого знака. Приливают 1 мл дистиллированной воды, после растворения навески добавляют ацетон до метки, тщательно перемешивая содержимое колбы и рассчитывают концентрацию вспомогательного раствора с учетом чистоты стандартного вещества.

Из вспомогательного раствора разбавлением готовят стандартные растворы КСХС в ацетоне с концентрациями 0,1 мг/мл (№1) и 0,01 мг/мл (№2).

Способ приготовления градуировочных растворов из стандартных растворов №1 и №2 представлен в Таблице 1.

Стандартные растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение месяца при условиях, исключающих испарение раствора.

Градуировочные растворы с содержанием калиевой соли хлорсульфурона от 0,00075 мг/мл до 0,015 мг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора №1 и №2 ацетоном.

89

Таблица!.

Номер градуиров. раствора Стандартный раствор №1 (0,1 мг/мл) мл Стандартный раствор №2 (0,01 мг/мл) мл Растворит. ацетон Концентрация градуиров. раствора, мг/мл 3 - 3,75 46,25 0,00075 4 - 10,00 40,00 0,00200 5 2,50 - 47,50 0,00500 6 5,00 - 45,00 0,01000 7 7,50 - _ 0,01500

2.5.2.    Подготовка колонки.

Для приготовления насадки для колонки на технических весах взвешивают 20 гр сорбента сферохром-1 в бюксе и помещают в сушильный шкаф для просушивания при температуре 150°С на 5 часов. После охлаждения с закрытой крышкой до 20-30°С сорбент помещают в фарфоровую чашку вместимостью 250 мл со спиртовым раствором (60-70 мл) ортофосфорной кислоты с массой 2% от веса сорбента.

Для испарения спирта чашку с содержимым нагревают на водяной бане при температуре 70-80°С, осторожно помешивая. Спирт упаривают почти досуха. Затем таким же способом наносят кремнеорганическую жидкость ПФМС-4 с массой 4% от веса носителя. Для растворения ПФМС-4 используют хлороформ, который упаривают при температуре 50-89°С досуха.

Хроматографическую колонку заполняют насадкой с присоединением к слабому вакууму. Достаточная плотность и равномерность набивки обеспечивается непрерывным постукиванием по колонке. Колонку кондиционируют при скорости азота 50 мл/мин в режиме программирования температуры от 50 до 270°С со скоростью нагрева 2°С/мин, а затем в изотермическом режиме при 270 °С в течение 6-8 часов без присоединения колонки к детектору. Общую подготовку прибора проводят согласно инструкции.

2.5.3.    Построение градуировочного графика.

После установки подготовленной колонки в хроматограф следует убедиться, что падение напряжения, измеренное согласно технического описания ДПР, составляет 30-40 в. Затем приступают к градуировке прибора. Для этого вводят в хроматограф по 2 мкл каждого градуировочного раствора не менее 3-х раз, измеряют высоту пика линейкой и строят градуировочный график зависимости высоты пика от массовой концентрации КСХС в градуировочном растворе.

При данной градуировке необходимо провести измерение коэффициента извлечения КСХС с фильтра или со стекловолокна трубки. Для этого на фильтр (стекловолокно) необходимо нанести по одному мл градуировочных растворов и провести аспирацию воздуха через фильтр (стекловолокно) с объемной скоростью 3 л/мин в течение 5 мин. После экстракции соли проводят 3-х кратное хроматографирование. Коэффициент извлечения определяют по соотношению нанесенной на фильтр (стекловолокно) КСХС и определенного количества.

При использовании градуировочного графика, построенного на основании полученных данных после этой процедуры, вводить коэффициент извлечения в расчетную формулу не требуется.

2.6. Описание определения.

1-ый вариант:

В пробирку вместимостью 10 мл пипеткой вместимостью 1 мл приливают 0,5 мл водноспиртовой смеси (1:10), затем туда же стеклянной палочкой выталкивают стекловату из пробоотборной трубки, закрывают пробирку пробкой и выдерживают в течение 15 мин. После этого приливают 9,5 мл ацетона пипеткой вместимостью 10 мл, встряхивают

90

содержимое пипетки в течение 30 сек, затем анализируют ацетоновый экстракт, вводя в хроматограф по 2 мкл раствора троекратно, соблюдая условия хроматографирования.

2-ой вариант:

Бумажный фильтр пинцетом вынимают из алонжа, помещают в бюкс, приливают на фильтр пипеткой вместимостью 2 мл 0,5 мл водно-спиртовой смеси (1:10) и закрывают бюкс крышкой на 15 мин. После этого в бюкс приливают 10,8 мл ацетона, закрывают бюкс крышкой и помещают его в аппарат для встряхивания на 30 мин. Затем экстракт переливают в пробирку вместимостью 15 мл, бюкс с фильтром дважды ополаскивают ацетоном по 3 мл, ацетон объединяют с экстрактом и упаривают ацетон на водяной бане при 50-60°С под струей воздуха до 10 мл. Полученный раствор анализируют трижды на хроматографе.

Условия хроматографирования.

Длина колонки, см..........................

Внутренний диаметр колонки, мм. Насадка колонки............................

Жидкая фаза....................................

Т емпература,°С

колонки......................................................

испарителя.................................................

детектора....................................................

Скорость потока газа-носителя, мл/мин

через колонку.............................................

через детектор............................................

Скорость диаграммной ленты, мм/час....

Шкала электрометра, ма..........................

Объем вводимой пробы, мкл...................

Абсолютное время удерживания, сек......

Линейный диапазон определения, нг.......

2.7. Обработка результатов анализа.

Перед проведением измерений ежедневно по градуировочному раствору с массовой концентрацией 2x10 мк/г проводят коррекцию градуировочного коэффициента, который рассчитывают по формуле:

K=Q

h

где:

Q- масса КСХС, введенная в хроматограф, нг; h - высота пика,мм.

Концентрация (Q в миллиграммах на куб.метр вычисляют по формуле:

С= Kxhxbx 10 а х Vct

где:

К - градуировочный коэффициент;

h - высота пика КСХС, измеренная при анализе пробы воздуха, мм; b - объем экстракта в мл;

а - объем экстракта, введенного в испаритель, мкл;

91

1

2

Разработчики: Лузянин В.П., Рубцова Е.С., Школина Л.А. (НИИХСЗР, г. Москва), Шкодич П.Е., Изория Л.Е., Селин Н.К., (ВНИИГТП, г. Волгоград).