МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Сборник № 25

Москва 1997 г.

Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

ТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 25

Москва

Центр научно-технической информации, пропаганды и рекламы 1997г.

3. Требования безопасности.

При проведении анализов необходимо выполнить техники безопасности при работе со стеклом, электрооборудованием, ЛВЖ, кислотами, а также соблюдать правила производственной санитарии и личной гигиены при работе в химической лаборатории.

85

Рис-1

Хроматограмма экстрактов пробы воды, содержащей 0,01 мг/л К-соли хлорсульфурона

Алфавитный указатель

стр.

1. 2-Амино-4,6-днмстил-1.3-пиримилнн - 9 2. 2-Амнно-4-лиметнламнно-6-хлор~1.3.5-триазин - 16.21 3. 2-Метил-4-лнметнламннометил-бензнмнлазол-5-ол-днгилрохлорнл -5 4. 2-Метокснкарбонкл-М-(4.б-лнмсткл-1.3-пирнмнлнн-2ил>-ямннокарбонкл- бензо л сульфамид - 45 5. 2-Метокснкар6оннл-М-(4.6-лнметнл-1.3-пнрнмндн11-2ил')-ами11окарбоннл- бензолсульфамнд калиевая соль - 45 6. 5-оксн-КЗ-бензоксатнолон -2 - 65 7. N - Г4-метокси-6-метнл~1.3,5-триазин-2ил)-Г'Г -42.5-днметилфенил)сульФо- ннлмочевнна - 70 8. 1Ч-окснд-2,6-лутидина и янтарной кислоты комплекс - 36.40 9. Амбиол -5 10. Аминопиримнднн -9 И. Аминофумаровой кислоты лиметнловый эфир -27 12. Анкор-5 -45 13. Анкор-85 -45 14. Грамекс.метаболит и полупродукт синтеза - 16,21 15. Лигнлроаспарагиновой кислоты лнмстиловый эфир -27 16. Днннконазол - 33 17.1-Карбамоил-3(5)-метилпнразол -51 18. Каскад -73 19. Ленок - 80.87 20. Люцис - 36.40 21- ММП -51 22. Номолт -61 23. Павстим -54 24. Препарат-1 - 80.87 25. Соналан -97 26. Спайк -57 27. Суми-8 -33 28. Тсбутиурон -57 29. Тефлубензурон -61 30. Тиолон -65 31. Утнур -70 32. Флуфеноксурон -73 33. Фосфитов смесь -77 34. Фумар - 27 35. Хардин - 80.87 36. Хлорсульфурона калиевая соль - 80.87 37. Экостим -94 38. Эталфлуралнн -97 39. Эфаль-М.промежуточные продукты синтеза -77

106

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Редакционная коллегия:

Калинин В.Л. -к.с.н., профессор, зав.кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н., Российский институт лекарственных культур; Борисов Г.С.-зав. KTJI РРСТАЗР; Федорова Н.Е.- к.х.н., МНИИГ им.Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ответственный за выпуск - Орехов Д.А., председатель Госхимкомиссии

тел. 207-63-90

Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией защиты растений Департамента химизации и защиты растений Минсельхозпрода РФ.

г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосъемки 11/41 тел.(246) 3-09-52

СОДЕРЖАНИЕ:

1.    Временные методические указания по определению остаточных количеств 2-метил-4-димстиламинометил- бензимидазол- 5 - ол- дигидрохлорида в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91 г. № 6264-91     стр.5

2.    Методические указания по измерению концентраций 2-амино-4,6 диметил-1,3-пиримидина в воде методом жидкостной хроматографии.

29.07.91 г. №6152-91     9

3.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор -

1.3.5- триазина в воде хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6161-91     16

4.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6- хлор-

1.3.5- триазина в воздухе хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6159-91     21

5.    Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии.

29.07.91    г. № 6230-91     27

6.    Методические указания по измерению концентрации диниконазола в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6156-91     33

7.    Методические указания по определению остаточных количеств N-okhch-2,6 -лутидина в воде, почве, зеленой массе люцерны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    №6179-91     36

8.    Временные методические указания по измерению концентраций М-окиси-2,6-лутидина в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6178-91     40

9.    Методические указания по измерению концентраций 2-метоксикарбонил-М-(4,6 -диметил-1,3-пиримидин-2-ил)-аминокарбонил-бензолсульфамида и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом жидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6171-91     45

10.    Временные методические указания по измерению концентраций карбамоил- метил-пиразола в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6236-91     51

11.    Методические указания по измерению концентраций павстима в воздухе рабочей зоны колориметрическим методом.

29.07.91    г.    № 6277-91     54

12.    Методические указания по измерению концентрации тебутиурона в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6199-91     57

13. Временные методические указания по измерению концентраций тефлубензурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91 г. №6234-91

14.    Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии.

29.07.91    г.    №6168-91     65

15.    Методические указания по измерению концентраций М-(4-метокси-б-метил-1,3,5-триазин^-шО-Г'Г -(2,5-диметил фенил) сульфонилмочевина в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6240-91     70

16.    Временные методические указания по измерению концентраций флуфеноксурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91    г.    № 6235-91     73

17.    Методические указания по измерению концентраций смеси фосфитов (промежуточные продукты синтеза препарата эфаль-М) в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г.    №6266-91     77

соли в воде методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6167-91     80

19.    Методические указания по измерению концентраций хлорсульфурона и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. №6170-91     87

20.    Методические указания по измерению концентраций экостима в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г. № 6276-91    ............................................ 94

21.    Методические указания по определению остаточных количеств эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6244-91    ............................................ 97

Алфавитный указатель.     106

4

Утверждено Министерством здравоохранения СССР “29” июля 1991 г.

№6167-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ХЛОРСУЛЬФУРОНЛ И ЕГО КАЛИЕВОЙ СОЛИ В ВОДЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ.

1. Краткая характеристика препарата.

Торговое наименование: препарат-1, харднн, ленок.

Производитсль:Россия.

Действующее вещество: калиевая соль хлорсульфурона.

Калиевая соль [М-|(4-метил-6-мстокси-1 ,3,5-триазинил-2)аминокарбонил|-2-хлоробензол-сульфонамида.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: Cull nNsO iSCIK.

Молекулярная масса: 395,50.

Калиевая соль хлорсульфурона представляет собой тонкодисперсный порошок свеглоссрого цвета.

Растворимость при 295,5°К (22,5°С)    в    100    гр. растворителя:

КВода    - 14

2.    Ацетон    - 0,28

3.    Этиловый спирт    - 1,65

4.    Бензол    - 1,28

При pH 2-3 калиевая соль хлорсульфурона переходит в хлорсульфурон,в результате чего растворимость в воде уменьшается, а в органических растворителях резко возрастает.

ЛД» для крыс - 9220,5 мг/кг.

Г1ДК калиевой соли хлорсульфурона в воде - 0,01 мг/л.

Область применения препарата хнрдин 12,5% в.р. - селективный гербицид для до- и нослевсходовой обработки посевов злаковых.

Разработчики: Лузяпин В.Г!., Петров В.В., Тувальбасва В.В.,(НИИХСЗР, г. Москва).

2. Методика определения калиевой соли хлорсульфурона в воде.

2.!. Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода.

Определение основано на переводе калиевой соли анализируемого вещества при pH 2-3 в нсионизированную форму хлорсульфурона, экстракции последнего из воды хлороформом, концентрировании экстракта упариванием и последующем определении методом газожидкостной хроматографии с использованием электроннозахватного детектора (ДПР) на колонке с 3% ПФМС-4 на. сферохромс-1, пропитанного 2% ортофосфорной кислоты.

2.1.2.    Избирательность метода.

Метод обеспечивает полную селективность. Определению не мешают полупродукты получения препарата.

2.1.3.    Метрологическая характеристика метода.

Диапазон измеряемых концентраций калиевой соли хлорсульфурона (КСХС) в воде от 0,01 до 0,1 мг/л.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 0,005 мкг.

Нижний предел измерения в воде 0,01 мг/л.

Среднее значение определения стандартных количеств КСХС при п=15 равно 91%.

Стандартное максимальное отклонение случайной ошибки при п=15 равно 2,5%.

Доверительный интервал определения при п=5 и Р=0,95 равен 6,8%.

Суммарная погрешность не превышает 11,40%.

Время выполнения определения (включая отбор образца) КСХС в одной пробе при одновременной подготовке двух параллельных образцов 1-1,5 часа.

2.2. Реактивы и материалы.

Ацетон, ос.ч., ТУ 6-09-3513-82.

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263-76.

Твердый носитель - сферохром-1, зернением 0,15-0,30 мм.

Жидкая фаза - жидкость кремнеорганическая ПФМС-4, ГОСТ 15866-70.

Азот,ос.ч., ГОСТ 9293-73, из баллона с редуктором.

'-Этанол, абсолютированный, ГОСТ 17299-78.

Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.

Кислота хлористоводородная, ч., ГОСТ 3118-77,15% раствор.

Кислота ортофосфорная, ч., ГОСТ 6552-68.

Калиевая соль хлорсульфурона (КСХС) с содержанием основного вещества не менее 98%.

2.3. Приборы, аппаратура, посуда.

Г азовый хроматограф типа “Цвет-100”, ТУ 1.550.127, снабженный детектором по захвату электронов, порог чувствительности детектора по линдану - 2,5 х 10¹⁰ мг/с. Колонка стеклянная длиной 200 см, с внутренним диаметром 3 мм.

Аспиратор с объемным расходом воздуха от 1 до 20 дм/мин.

Цилиндр 4-50, ГОСТ 1770-74.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл и 50 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10,5,2 мл с делениями.

Делительные воронки, вместимостью 100 мл, ГОСТ 25336-82.

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.

Колбы грушевидные вместимостью 50 мл, ГОСТ 9737-70.

Колба 2-25-2, ГОСТ 1770-74.

81

Колба 2-50-2, ГОСТ 1770-74.

Воронка В-36-50 ХС, ГОСТ 25336-82.

Чашка фарфоровая вместимостью 250 мл, ГОСТ 9147-73.

Пробирка П-2-10-14/23 ХС, ГОСТ 1770-74.

Пробирка П-2-15-14/23 ХС, ГОСТ 1770-74.

Холодильник XII1-1-200-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82.

Линейка измерительная, цена деления 1 мм, ГОСТ 4272-75.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Регулятор температуры УКТ-4 У-2, ТУ 25-111378-77.

Термометр контактный типа ТПК, ГОСТ 9871-61.

Термометр, ГОСТ 215-73, ТЛ-2, цена деления Г С.

Секундомер механический СОП-пр. 2аЗ-000, ГОСТ 5072-79.

Барометр ВК-75, ТУ 35-04-223-75, цена деления 0,1 кПа.

Весы аналитические, лабораторные, общего назначения, тип ВЛА-200М, ТУ 25-06-1049-

72.

Весы лабораторные,технические ВЛКТ-500М, 4-ый класс, ГОСТ 24104-80.

Набор разновесов Г-2-210, ГОСТ 7328-82.

Насос водоструйный, ГОСТ 25336-82.

Бюксы СН-60/14 или СН-85/15, ГОСТ 7148-70.

Шкаф сушильный, электрический 2В-151, ТУ 64-1-1411-76.

2.4.    Отбор пробы.

Отбор пробы производится в соответствии с “Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств”, утвержденными Зам. Главного Государственного санитарного врача СССР от 21.08.79 г., № 2051-79.

2.5.    Подготовка к определению.

2.5.1. Приготовление стандартных и градуировочных растворов.

Стандартные растворы калиевой соли хлорсульфурома: 0,01 мг/мл - раствор №1. 50 мкг КСХО взвешивают в мерной колбе вместимостью 50 мл на аналитических весах, записывая результат до четвертого знака. Приливают 1 мл дистиллированной воды, после растворения навески добавляют ацетон до метки, тщательно перемешивая содержимое колбы и рассчитывают концентрацию вспомогательного раствора с учетом чистоты стандартного вещества.

Из вспомогательного раствора методом разбавления готовят стандартный раствор КСХС в ацетоне с концентрациями 0,001 мг/мл (№1). Затем, используя стандартный раствор, готовят градуировочные растворы с массовыми концентрациями:

№2 - 0,00001 мг/мл №3 - 0,00004 мг/мл №4 - 0,00006 мг/мл №5 - 0,00008 мг/мл №6 - 0,00010 мг/мл

Способ приготовления градуировочных растворов из стандартного раствора №1 представлен в Таблице 1.

Градуировочные растворы с содержанием калиевой соли хлорсульфурона от 0,00001 мг/мл до 0,0001 мг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора JNal ацетоном.

Стандартные растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 10 суток при условиях, исключающих испарение раствора.

82

Таблица!.

Номер градуиров. раствора Стандартный раствор №1 (0,001 мг/мл) мл Растворит, ацетон Концентрация градуиров. раствора мг/мл 2 1 99,00 0,00001 3 4 96,00 0,00004 4 6 94,00 0,00006 5 8 92,00 0,00008 6 10 90,00 0,00010

2.5.2.    Подготовка колонки.

Для приготовления насадки для колонки на технических весах взвешивают 20 гр сорбента сферохром-1 в бюксе и помещают в сушильный шкаф для просушивания при температуре 150°С на 5 часов. После охлаждения с закрытой крышкой до 20-30°С сорбент помещают в фарфоровую чашку вместимостью 250 мл со спиртовым раствором (60-70 мл) ортофосфорной кислоты с массой 2% от веса сорбента.

Для испарения спирта чашку с содержимым нагревают на водяной бане при температуре 70-80°С, осторожно помешивая. Спирт упаривают почти досуха. Затем таким же способом наносят кремнеорганическую жидкость ПФМС-4 с массой 4% от веса носителя. Для растворения ПФМС-4 используют хлороформ, который упаривают при температуре 50-89°С досуха.

Хроматографическую колонку заполняют насадкой с присоединением к слабому вакууму. Достаточная плотность и равномерность набивки обеспечивается непрерывным постукиванием по колонке. Колонку кондиционируют при скорости азота 50 мл/мин в режиме программирования температуры от 50 до 270°С со скоростью нагрева 2°С/мин, а затем в изотермическом режиме при 270 °С в течение 20 часов без присоединения колонки к детектору. Общую подготовку прибора проводят согласно инструкции.

После установки подготовленной колонки в хроматограф следует убедиться, что падение напряжения, измеренное согласно технического описания ДПР, составляет 30-40 в.

2.5.3.    Построение градуировочного графика.

Для градуировки прибора вводят в хроматограф по 2 мкл каждого градуировочного раствора не менее 3-х раз, измеряют высоту пика линейкой и строят градуировочный график зависимости высоты пика от массовой концентрации КСХС в градуировочном растворе.

При данной градуировке необходимо провести измерение коэффициента экстракции КСХС из воды. Коэффициент экстракции определяют по соотношению высоты пика КСХС при анализе экстракта из воды с дозированным количеством КСХС, к высоте пика КСХС при анализе градуировочных растворов тех же концентраций.

При использовании градуировочного графика, построенного на основании данных, полученных после экстракции, вводить коэффициент извлечения в расчетную формулу не требуется.

2.6. Описание определения.

2.6.1. Подготовка проб к анализу.

250 мл воды помещают в делительную воронку, воду подкисляют 15%-ным раствором хлористоводородной кислоты до pH 2-3, определяя pH по индикаторной бумаге, и энергично встряхивая в течение 1-2 мин с 40 мл хлороформа. После расслаивания фаз хлороформный слой фильтруют через бумажный фильтр, смоченный хлороформом, в выпарительную грушевидную колбу. Экстракцию повторяют с тем же объемом хлороформа и объединенный экстракт упаривают под вакуумом водоструйного насоса при

83

температуре 60-80°С досуха. В охлажденную колбу вносят 1 мл ацетона и тщательно обмывают стенки колбы, при этом колба закрыта притертой пробкой.

2.6.2. Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб.

Т емпература,°С

колонки............................................................................................230

испарителя............................................................................. 300

детектора..........................................................................................250

Скорость потока газа-носителя, мл/мин

через колонку....................................................................................50

через детектор......................................................... 150

Скорость диаграммной ленты, мм/час.............................................60

Шкала электрометра, ма..........................................................1х64хНИ°

Объем вводимой пробы, мкл.................. 2

Абсолютное время удерживания, сек............................... 220

Линейный диапазон определения, нг......................... 1,50-30,00

2.7. Обработка результатов анализа.

Перед проведением измерений ежедневно по градуировочному раствору с массовой концентрацией 0,00006 мг/мл проводят коррекцию градуировочной прямой.

Расчет содержания анализируемого вещества в пробе воды проводится по высоте пика методом сравнения со стандартом по формуле:

Х= CxhwxK hrp х V

где:

X - содержание КСХС, мг/л или ppm;

С - концентрация КСХС градуировочного раствора, мкг/мл;

hrp и h - высоты пиков на хроматограммах градуировочного раствора и экстракта соответственно, мм;

v - объем экстракта после растворения остатка, мл;

V - объем пробы воды, взятой для анализа, мл;

К - коэффициент, учитывающий потери при экстракции и концентрировании, который равен 1:1, что соответствует среднему обнаружению 91%.

Примечание: Коэффициент К находят после анализа проб воды, содержащих определенные количества анализируемого вещества по формуле:

К= А внесено А обнаружено

84