Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Сборник № 21 Часть 1-ая
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.
Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Сборник № 21 Часть 1-ая
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.
ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПЕСТИЦИДЫ
Утверждено Министерством здравоохранения СССР " 29" июля 1991 г Л 6127-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 2,4-Д В ВОДЕ МЕТОДОМ ОБРАЩЕННО-ФАЗОВОЙ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
1. Краткая характеристика препарата
Краткая характеристика препарата приведена на стр.247.
2. Методика определения 2,4-Д в воде 2.1.Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на концентрировании 2,4-Д в пробе и последующем определении препарата с помощью обращеыно-фазовой ВЭЖХ.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Среднее значение определения (X) - 90
Стандартное отклонение (X) - 8,06
Относительное стандартное отклонение (X) - 3.61
Доверительный интервал (-Х) - 2,95
Предел обнаружения (мг/л) в неочищенной и очищенной пробе -0,7 и 0,002
2.1.3. Избирательность метода
Метод избирателен в присутствии глобальных загрязнителей окружающей среды-производных циклопарафинов(у-ГХЦГ и его изомеры),соединений дифенилметанового ряда (ДДТ и его производные),о также галакона,глифо сата и других гербицидов,применяемых на зерновых культурах.
2.2.Реактивы и растворы
Вода дистиллированная,ГОСТ 6709-72.
н-Гексан,ч..ТУ 6-09-3375-78.
Разрабочики: М. А.Клисенко,В.Ф.Демченко,Е.И.Давидюк,ЗНИИГКНТОКС.г.Киев
Метанол, дч. tГОСТ 6995-77.
Натрия ayjihignv , безводный, ч.,ГОСТ 4166-76.
Натрия гидрокарбонат, чде.,ГОСТ 4201 -66 -
Универсальные индикаторные бумаги pH 0-12 "Lachema" (ЧССР).
Фильтры "синяя лента",ТУ 6-09-1678-77.
Хлороформ,Фармакопея СССР*ГОСТ 20015-74.
Хлористоводородна я кислота,ч.,ГОСТ 3118-77.
Эфир для наркоза*Фармакопея СССР,ГОСТ 6265-74.
Стандартный раствор 2*4-Д в воде с концентрацией 10 мкг/мл.
2.3.Приборы и посуда
Весы аналитические типа ВЛР-200,Г0СТ 24104 80.
Весы технические типа ВЛКТ-500,ГОСТ 24104-80.
Испаритель ротацционный типа ИР-1М2,ТУ 25-1173-102-84.
Микроколопка стандартная металлическая (50 х 2 мм)с сорбентом. "Саласорб c.jg":5 мкм."С1зетаро1"(ЧССР).
Хроматограф микроколоночный яеидкостный типа "Милихром".
Воронки делительные,Г0СТ 25336-82,на 250 мл.
Воронки конические,ГОСТ 25336-82.
Колбы конические с пришлифованной пробкой,ГОСТ 25336-82,на 100 мл. Колбы круглодонные со шлифом,ГОСТ 25336-82,на 100 мл.
Колбы плоскодонные,ГОСТ 25336-82,на 250 мл.
Пипетки мерные .ГОСТ 20292-74,на 1 мл.
Пробирки мерные,ГОСТ 1770 74,на 10 мл.
Цилиндры мерные,ГОСТ 1770-74,на 100 и 25 мл.
Линейка металлическая,ГОСТ 25706-83.
2.4.Отбор,хранение и подготовка проб
Отбор,хранение и подготовка проб к анализу проводится в соответствии с "Ушфвдированними правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции .пищевых продуктов я объектов окружающей среды для определения микро
254
количеств пестицидов", у творяеденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за J3 2051-79.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Приготовление елюента
Элюирующая смесь - вода-метанол в объемном соотношении 7:3 готовится заранее,перед проведением хроматографического анализа.Цилиндром вместимостью на 100 мл отмеряют 70 мл дистиллированной воды,которую выливают в плоскодонную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью на 100 мл; туда же приливают 30 мл метанола,колбу закрывают пробкой,содержимое перемешивают при легком взбалтывании и дают смеси отстояться в течение 30-40 мин,поело чего фильтруют в сосуд для элюента.Элюент отстаивают еще некоторое время (до прекращения образования пузырьков воздуха на стенках сосуда)и приступают к подготовке хроматографической системы прибора к анализу.
2.5.2. Подготовка хроматографической системы к проведению определения 2,4-Д.Подготовку прибора к хроматографическому анализу начинают с промывку насоса свежеприготовленным элзоентом,после чего насос заполняют элюирующей смесью вода-метанол (7:3)и приступают к промывке хроматографической системы и заполнению кюветы сравнения елюентом.Подготовка хроматографа продолжается до установления равномерного нулевого выходного сигнала детектора и снижения шумов до мипимума.
2.6. Проведение анализа
2.6*1.Экстракция препарата из анализируемой прбы
Чистую пробу воды (прозрачная и бесцветная- фильтруют 1ерез складчатый фильтр и проводят хроматографичоский анализ неочищенной пробы,вводя в колонку от 5 до 40 мкл (вводимый обьем берется по усмотрению оператора, ни не более 40 мкл).
255
Если проба вода грязная (мутная и окрашена ши содержит сопутствующие прямее}: природных оргаккчоеккх соединений,других пестицидов,влияющих на провеД61Ш6 анализа) поступают следующим образом: 100 мл отфильтрованной пррбы помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью на 250 мл, туда не добавляют 4 г гидрокарбоната натрия,взвешенного на технических весах,и,при перемешивании раствора,его растворяют в пробе,после чего содержимое колбы переносят в делительную воронку вместимость» па 250 мл. Для удаления из пробы влияющих на анализ примесей проводится их пере-экстракция сначала в хлороформ (2 раза по 25 мл ),а затем в п-гексаы ( 2 раза по 25 мл).при взбалтывании содержимого воронки в течение 1 мин.Растворители,содержащие сопуствующие примеси пробы,отбрасывают, а водный раствор сливают в колбу вместимостью на 250 мл и постепенно приливают туда 1 мл хлористоводородной кислоты.раствор перемешивают при легком взбалтывании.После прекращения выделения углекислого газа раствор переносят в делительную воронку и проводят переокетракцию 2,4-Д в диэтк-ловый эфир (2 раза по 20 мл)‘ в течение 1 мин.Водный раствор отбрасывают, а объединенный эфирный экстракт отмывают дистиллированной водой (до нейтрального pH).фильтруют через прокаленный сульфат натрия в круглодонную колбу со шлифом вместимостью на 100 мл,упаривают на ротационном испарителе при 30-35°С до небольшого объема,переносят в мерную пробирку и упаривают в токе азота особой чистоты досуха.Сухой остаток пробы растворяют в 0,2 мл дистиллированной воды и проводят хроматографический анализ.
2.6.2.Хроматографическое определение 2,4-Д методом ВЭЖХ
Количественное определение 2,4-Д проводят при следующих условиях хро матографирования:неподвижная фаза -"Силасорб С18",Ь мкм; подвижная фаза вода с метанолом в объемном соотношении 7:3;скорость элюирующего потока
256
200 мкл/мин;поддиапазон чувствительности измерений 0,2 А;время измерения выходного сигнала 0,6о;скорость протяжки диаграммной ленты 300 мм/час; длина волны поглощения светового потока 280 нм;объем удерживания 235 мкл.
После окончания подготовки прибора к анализу проводится хроматографирование градуировочного раствора 2,4-Д (10 мкг/мл) в объеме от 5 до 40 мкл (5*10,15,20,30,40 мкл),а затем пробы воды в объеме,необходимом для обнаружения препарата(но не более 40 мкл) как в посконцентрированной,так и в сконцентрированной (при необходимости) пробе.Если содержание в пробе находится за пределом верхней границы обнаружения,часть ее разбавляют в определенном объеме дистиллированной поды и анализ повторяют при тех же условиях хроматографирования.
2.6.3.Обработка результатов анализа
Количественное определеюте 2,4Д проводят методом соотношения со стандартами, путем сравнения площади пиков в анализируемом образце воды и стандартном растворе.
Расчет проводят по формуле;
SjX V хС Хгт_ . (мг/л), где;
S2x Р
О
S]- площадь пика 2,4-Д в пробе, мм ;
р
S2~ площадь пика-стандартного раствора,мм ;
С - концентрация стандартного раствора,мкг/мл;
7 - обьем анализируемой пробы,мл;
Р - конечный обьем исходной пробы,мл.
257
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками
Редакционная коллегия:
Новикова К.Ф.-начальник сектора ННХСЗР; Калинин В.А--к.с.н..профес сор,зав.квфедры ТСХА; Гиренко Д.Б.-к.х.н.,зав.аналитической лаборатории УКР ВНИИГИНТОКС; Борисов Г.С.-зав. КТЛ РРСТАЗР; Устинова Т.Н.-ведущий специалист КТЛ РРСТАЗР.
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве офи циальвых Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
Ответственный за выпуск - Орехов Д.А., заместитель председателя
Госхимкомиссии -тел. 207-63-90
Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией
защиты растений "Главхимзащиты" МСХ РФ
г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосьемки 11/41 тел.(246) 3-09-92
ОГЛАВЛЕНИЕ
Хлорорганические пестициды стр.
1. Методические указания по групповой идентификации хлороргашхческих пестицидов и их метаболитов в биоматериале, продуктах питания и объектах окружающей среды методом адсорбционной высокоэффективной жидкостной хроматографией.
29 июля 1991г. Л 6129-91..........9..
2. Временные методические указания по определению модауна в эфирных маслах методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г, Л 6109-91.........18..
Фосфорорганическио пестициды
3. Методические указания по определению бициклада в растительном материале хроматографией в тонком слое.
29 июля 1991г, Л 6113-91.........26...
4. Временные методические указания по определению офтанола-Т (но изо-фенфосу) в воде, почве, зерне и семенах сахарной свеклы.
29 июля 1991г. л 6Ю9-91.........31...
9. Временные методические указания по определению метаболитов ФОН, производных тио- и дитиофосфор1шх кислот в биоматериале методом тонкослойной и газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. Л 6072 -91.........36----
6. Методические указания по определению метаболитов фосфамида в биологических средах методом тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. J* 6133-91.........48----
7. Методические указания по определению этримфоса в зерновых культурах методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. J* 6129-91.........57----
8. Методические указания по гпзохроматогрзфичоскому определению остаточных количеств эталона в столовой и сахарной свекле.зеленой массе
растения и почве.
29 июля 1991г. * 6094-91.........62.....
3. Методические указания по определению эфзля (этнлфосфита алюминия и фосфористой кислоты) в растительных культурах, продуктах их перера ботки, воде, почве методой газожидкостной хроматография.
29 июля 1991г, N 6132-91..........70...
Пиретроздк
10. Временные методические указания по определению изатрина в растительном материале методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6070-91..........85____
11. Временные методические указания по огтределению пиретроидов (пермет-рина .циперметрина .фенвалерата и декаметрина )в молоке и мясе методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6093-91.........91-..
12. Временные методические указания по определению суми-о в биологическом материале методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6101-91.........ЮЗ____
Гетероциклические соединения
13. Временные методические указания по определению остаточных количеств азовитз в зерне злаковых, зеленой массе растений, сахарной свекле, яблоках, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 5371-91.........110.....
14. Методические указания по определению байфидана в зерновых и лекарственных культурах, воде и почве методами гэзо:чядкостпой и тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6131-91........123____
15. Методические указания по определению бутизанэ С в воде и почве ме
то дом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6139-91........131----
16. Временные методические указания по хроматографическому определению ивина и его метаболита, 2,6-лутидина в воде, овощах (картофель,огурцы ,томаты).
29 июля 1991г. N 6079-91.......136......
17. Временные методические указания но хроматографическому определению ивина в биологическом материале.
29 июля 1991г, N 6078-91.......143......
18. Временные методические указания по определению остаточных количеств ивина и его комплексов в воде методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6СГ/7-91.......149.....
19. Временные методические указания по определению кентавра в воде методом хроматографии в тонком слое.
29 июля 1991г. N 6100-91.......155----
20. Временные методические указания по определению лентаграна в офир-ных маслах методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6111-91.......162.....
21. Временные методические указания по определению рейсера в эфирных маслах лаванды и мяты методом газожидкостной хроматографии
29 июля 1991 г. N 6074-91.......168.....
22- Методические указания по определению топаза в сельскохозяйственных культурах газожидкостной и тонкослойной хроматографией.
8 июня 1989г. N 5009-89........174____
23. Временные методические указания по определению харалли в воде методом хроматографии в тонком слое.
29 июля 1991г. N 6102-91.......182...
24- Временные методические указания по определению экспромта в воде методом хроматографии в тонком слое.
29 июля 1991г. N 6107-91
25. Методические указания по определению эллипса в почве, зерне зерновых культур методами газожидкостной и тонкослойной грома то гра
29 июля 1991г. N 6273-91.......199...
Нитрофенолы и их производные
26- Методические указания по определению акрекса и диносеба в крови и моче тонкослойной хроматографией.
4 октября 1988т, N 4707-88......210...
27. Методические указания по определению трефлана в зеленой массе и зерне зорповых культур методом газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6125-91........215*.
Производные мочевины и карбаминовой кислоты
28. Временные методические указания по определению остаточных коли честв димилина в яблоках тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г, N 6075-91........222..
29. Временные методические указания по определению остаточных количеств картолина -2 в зерне ячменя, пшеницы и других злаков,гречихи, бобах сои.сухих кормовых травах, почве и воде тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 6U97-91.........228.
30. Методические указания по определению картолина-2 в биосубстра тах методом тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 6115-91........240.
Алканкарбоновые кислоты и их производные
31. Методические указания по ускоренному определению 2,4-Д и ТХА
в биоматериале (органы и ткани мелких наземных и почвенных животных) методом газожидкостной хроматографии.
32. Методические указания по определению 2,4-Д в воде методом обращению-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6127-91.......253..
Прочие пестицида
33. Временные методические указания по определению на Су в эфирных маслах методом тошсослойной хроматографии.
29 июля 1991г, N 6110-91.........260..
34. Временные методические указания по определению остаточных количеств нафталевого ангидрида в зерне кукурузы, льна и воде тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991 г, N 6096-91.......265...
Методические указания по измерению концентраций пестицидов и полупродуктов их получения в воздухе рабочей зоны
1. Методические указания по газохроматрографическому измерению концентраций Оутизана в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6138-91.........272----
2. Методические указания по хроматографическому измерению концентраций виджила в воздухе рабочей зоны.
26 февраля 1991г. N 5325-91......276----
3. Методические указания по хроматографическому измерению концентраций глина в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6134-91.........281.....
4. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций грамекса в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6082-91.........285......
5. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций гранстара в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6090-91
в- Методические указания по измерении концентраций оксима дикамбн в воздухе рабочей зоны тонкослойной хроматографией.
29 июля 1991г. N 6117-91.........295.....
7. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций дгосвата и едила в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6154-91.........300.......
8. Методические указания по измерению концентраций Су- - эфиров 2,4-ДМ;
2,4-Д и 2,4,5 - ТП- кислот в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.
29 июля 1991г. N 6119-91.........308......
9. Временные методические указания по измерению концентраций дуала в
воздухе рабочей зоны методом фотометрии, тонкослойной и газожидкостной хроматографии.
29 июля 1991 г, N 6086-91.......314......
10 Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций кентавра в воздухе рабочей зоны
29 июля 1991 г, J* 6085-91.......323.....
11.Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций лондакса в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991 г, N 6104-91........329......
12 .Методические указания по хроматографическому измерению концентраций 4-нитро-о-ксилола и 3-нитро-о-ксилола в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6116-91 .........334.....
13. Методические указания по газохроматогряфическому измерению концентраций омайтв в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6269-91........339----
14. Временные методические указания по газохроматографическому измерению концентраций офтанола-Т (по изофенфосу) в воздухе рабочей
15. Методические указания по хроматографическому измерению концентраций 4-родан-2-нитроанилина в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6118-91......349....
16. Временные методические указания по измерению коонцентраций тиадиа-зола в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
29 июля 1991г. N 6084-91......354____
17. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций тотрила в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6089-91......358----
18. Временные методические указания по измерению концентраций фоликура в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
29 июля 1991г. N 6112-91.......362....
19-Временные методические указания по газохроматографическому измерению концентраций фюзилада в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. N 6088-91.......369____
20. Времвшше методические указания по хроматографическому измерению концентраций харэлли в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. >1 6071-91.....373____
21. Временные методические указания по измерению концентраций экспромта в воздухе методом газожидкостной хроматографии
29 июля 1991г. Я 6081-91......378____
22. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций эллипса в воздухе рабочей зоны.
29 июля 1991г. Я 6083-91......383____
23-Методические указания по измерению концентраций эфаля в воздухе рабочей зоны фотометрическим и газохромзтографмческим методом.
29 июля 1991 г. Я 6120-91
