МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРО -КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Справочное

издание

Под редакцией

доктора биологических наук М. А. КЛИСЕНКО

МОСКВА «КОЛОС» 1983

Приложение 2

ПРЕДИСЛОВИЕ

Повышение благосостояния народа всегда находится в центре внимания КПСС. Об этом свидетельствует разработанная в соответствии с решением XXVI съезда партии и одобренная майским (1982 г.) Пленумом ЦК КПСС Продовольственная программа СССР на период до 1990 года. Одной из важнейших задач этой программы является развитие материально-технической базы агропромышленного комплекса, что предусматривает, в частности, расширение производства высокоэффективных средств защиты растений и увеличение их поставки сельскому хозяйству. Более широкое применение химических средств защиты растений позволит получать большую урожайность сельскохозяйственных культур, улучшит качество выращиваемой продукции и условия ее хранения.

Однако если неумело использовать химические средства защиты растений, то остатки пестицидов могут попасть в продукты питания, корма и объекты окружающей среды. Поэтому правильному применению пестицидов в нашей стране, как и вообще охране окружающей среды, уделяется особенно большое внимание. Научно обоснованной программой охраны природы в СССР явились постановления ЦК КПСС и Совета Министров СССР «Об усилении охраны природы и улучшении использования природных ресурсов» (1972 г.) и «О дополнительных мерах по усилению охраны природы и улучшению использования природных ресурсов» (1978 г.), которые директивно обязывают вести контроль за остатками пестицидов в продуктах питания, воде, почве и воздухе. Для предотвращения загрязнения окружающей среды пестицидами введено строгое регламентирование их применения, совершенствуются технология получения и применения пестицидов и препаративные формы их. Одно из обязательных требований, которое позволяет включать пестициды в список препаратов, разрешенных к применению, является разработка методов определения их остатков в продуктах питания, воде, почве и воздухе.

В предлагаемой книге представлены методические указания по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, разработанные спе-циалистами-аналитиками различных министерств и ведомств. В разработке данных указаний принимали участие: Т. Г. Аббасов, В. Д. Агарков, С. Л. Акоронко, Т. В. Алдошина, И. А. Антонова, Ж. А. Арутюнян, Г. У. Аслалян, Э. И. Бабкина, Ю. С. Баранов, Г. А. Бегунов, А. Б. Белова, С. Г. Билуши, Н. П. Бирюков, Ц. И. Бобовникова, 3. Н. Богомолова, М. Ф. Болоховец, К. А. Большакова, Г. С. Борисов, А. М. Ботвиньева, Л. И. Бублик, Г. Т. Брюшнина, Н. В. Букина, А. Л. Бурштейн, А. С. Василенко, Л. В. Васильковская, Р. Д. Васягина, Л. В. Воронин, И. В. Воинова, К. А. Гар, С. Г. Геворкян, В. М. Гезиков, Г. Н. Георгиева, Д. Б. Гиренко, И. Н. Гладенко, Н. И. Глембицкий, В. Е. Горбунова, Р. С. Горенштейн, В. А. Давтян, Э. Б. Данилова, Е. Г. Даурова, В. Ф. Демченко, А. В. Дибцева, Т. А. Евстегнеева, В. В. Егоров, В. В. Ермаков, А. В. Жарков, В. Н. Жуленко, А. Ф. Заболотный, И. Ш. Заманская, А. И. Затула, И. 3. Зисерман. 3. Златьев, А. И. Зорсва, Т. И. Зубко, Л.Н. Ка-вецкая, И. Н. Карпова, У. С. Кашимов, В. И. Кириченко, Н. И. Киселева, М. А. Клисенко, Е. С. Ковалева, А. Ф. Конюхов, В. В. Королев, Ф. И. Копытова, Е. И. Косачева, И. А. Кочеровская, В. И. Кофанов, И. Ш. Кофман, А. Н. Крылова, О. С. Кухтина, В. В. Лещев, Л. И. Лещинская, С. А. Ликунова, А. М. Макеева, О. А. Малинин, И. Н. Матвиенко, И. Л. Меерзон, Ф. Р. Мель-цер, Л. Д. Микадзе, Г. В. Миронюк, Н. А. Мовсетян, В. В. Молочников,

Сыры

Л. П. Моргунова, Г. К. Морина, Ю. Ф. Моряков, В. И. Мочалов, В. И. Мурзой А. А. Непоклонов, И. П. Нестерова, К. Ф. Новикова, Л. В. Новикова, Н. И. Пав лова, Ф. И. Патрашку, К. Н. Пашкевич, С. Д. Павлов, Т. М. Петрова Н. В. Перетолчин, Р. Д. Петухов, М. С. Петросян, А. Л. Перцовский, И. И. Пи лснкова, М. В. Письменная, Т. В. Пластинина, Л. Р. Полищук, В. Н. Полякова Н. Г. Попова, Н. Я. Пестовский, Л. С. Прииутина, IO. А. Присмотров Н. В. Птицина, У. Ф. Пулатов, Г. Г1. Пушкина, Б. А. Рехтер, Л. Д. Рузанкова И. И. Ряженов, П. А. Самгин, Э. О. Сахкалян, В. А. Силаев, М. А. Стемпков ская, Л. С. Самосват, Л. А. Смирнова, А. А. Сиверина, Л. К. Слепова Ж. С. Степанян, Н. Г. Стеланченко, В. В. Стеценко, Г. А. Таланов, С. М. Ти хомиров, Г. А. Трондина, Г. П. Угрюмова, А. Д. Фатьянова, Ь. Ф. Филимонов М. М. Филимонова, Л. А. Хилик, Л. И. Хлюпнна, В. Д. Чмиль, Д. И. Чканни ков, Л. Д. Чудакова, Э. П. Чурпий, Н. И. Шадрин, А. М. Шмигидина А. И. Шумкова, 3. Ф. Юркова.

Методические указания апробированы группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Министерства сельского хозяйства СССР, одобрены лабораторным советом при Министерстве здравоохранения СССР и утверждены заместителем Главного государственного санитарного врача СССР в качестве официальных.

Методические указания предназначены для контроля за содержанием остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктах, кормах, объектах окружающей среды агрохимическими, ветеринарными, контрольно-токсикологическими лабораториями Министерства сельского хозяйства СССР, санитарно-эпидемиологическими станциями и научно-исследовательскими институтами Министерства здравоохранения СССР, лабораториями Госкомгидромета СССР, а также лабораториями научно-исследовательских институтов других министерств и ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

ПРОИЗВОДНЫЕ МОЧЕВИНЫ

Утверждаю Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А. И. Зайченко 23.01.1975 №1220-75

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГАТНОНА В ВОДЕ И ПРОДУКТАХ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ¹

Краткая характеристика препарата. Гатнон—[М-метил-№-(2-бенатиазолил)-мочевина. Эмпирическая формула препарата C9H₉N₃OS, молекулярная масса 207. Это белое кристаллическое вещество с т. пл. выше 290°С (возгоняется). Гатнон очень плохо растворяется в воде, слабо растворим в ацетоне, хлороформе, метиловом, этиловом и других спиртах, хорошо растворяется в димстилформамиде, днметилсульфоксиде.

Методика определения гагнона в воде, картофеле, луке фотометрическим методом. Основные положения. Принцип метода. Анализируемый материал экстрагируют ацетоном, очистку экстракта производят в системе хлороформ — щелочь. Извлеченный гатнон гидролизуют до 2-амннобснзтиазола кипячением в 60%-ной серной кислоте, диазотируют и проводят азосочетание с диметиланилино.м. Количественное определение производится путем измерения оптической плотности раствора при 595 нм.

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел определения 0,1 мг/л воды, 0,2 мг/кг картофеля и 0,3 мг/кг лука. Степень определения составляет при а=0,95, %: для природной воды—97±8,4, для картофеля — 95±9,6, для лука — 65± 18.

Реактивы и растворы. Ацетон х. ч. Хлороформ х. ч. Спирт этиловый. Серная кислота, х. ч., удельная масса 1,84. Серная кислота, водный раствор 1 : I (по объему). Раствор серной кислоты 1 н. Раствор едкого натра 0,5 н. Раствор азотистокислого натрия 5%-ный. Раствор сульфаминовой кислоты 10%-ный. Раствор в 40%-ной серной кислоте диметиланилина 1%-ный. Сернокислый натрий безводный. Стандартный раствор гатнона «А», содержащего 100 мкг/мл, готовят растворением в ацетоне 10 мг гербицида в мерной колбе объемом 100 мл. Стандартный раствор гатнона «Б», содержащего 10 мкг/мл, готовят разбавлением стандартного раствора «А¹ в 10 раз.

Приборы и посуда. Колбы конические на 0,5 л. Колбы круглолонные на 0,5; 1,0 л и 100 мл. Воронки делительные на 0,5 л. Стаканы химические на 200 мл. Воронки конические. Пипетки на 1 и 2 мл. Колба Бунзена с воронкой. Прибор для отгонки растворителей. pH-метр. Спектрофотометр или фотоколориметр.

Подготовка к определению заключается в построении градуировочного графика. В колбы объемом 100 мл вносят 0,5; 1,0; 1,5 и 2,0 мл стандартного раствора «А» и 1,0; 2,0 мл стандартного раствора «Б», что соответствует 50, 100, 150, 200, 10 и 20 мкг гатнона. Удаляют растворитель, вносят 5 мл раствора серной кислоты (1:1) и нагревают с обратным холодильником 2 ч на металлической бане при 140°С. (Шлифы колбы и холодильника должны быть тщательно подогнаны!) После охлаждения к растворам приливают по 5 мл воды, охлаждают до 20°С, прибавляют 0,1 мл 5%-ного раствора азотистокислого нат-

рия. Через 15 мин прибавляют 0,1 мл 10%-ного раствора сульфаминовой кислоты, встряхивают и приливают 1 мл 1%-ного раствора диметиланнлииа в 10%-ной серной кислоте. Выдерживают 30 мин при 20°С, переносят раствор в мерную колбу на 25 мл и доводят объем раствора до метки.

Измерение оптической плотности производят через 5—10 мин при длине волны 595 нм или фотоколориметрируют с оранжевым светофильтром в кювете толщиной 10 мм. Раствором сравнения служит контрольная проба не обработанного гатноном продукта, подвергнутая тем же операциям, что и рабочая проба.

По полученным данным строят градуировочный график зависимости величин оптической плотности раствора азокрасителя от концентрации бензтиазу-рона.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта из картофеля и лука. Пробу 100 г измельченного на терке картофеля заливают 250 мг ацетона, добавляют 0,5 мл серной кислоты (удельная масса 1,84) и оставляют на 15—20 мин, периодически встряхивая.

Пробу лука 100 г, измельченного на терке, заливают 250 мл ацетона и оставляют на 15—20 мин, периодически встряхивая.

Полученный экстракт фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера, твердый остаток промывают на фильтре 100 мл ацетона. Объединенный ацетоновый экстракт упаривают на ротационном испарителе до полной отгонки ацетона. Водный остаток нейтрализуют до pH 7 раствором едкого натра.

Гатнон экстрагируют из водного раствора хлороформом 4 раза (200, 100, 100, 100 мл), сушат над сернокислым натрием, фильтруют через складчатый фильтр и отгоняют хлороформ до объема 50 мл. Раствор переносят в делительную воронку, колбу споласкивают хлороформом (50 мл) и экстрагируют 3 раза 0,5 н. раствором едкого натра (20, 20, 20 мл). Нейтрализуют щелочной раствор 1 н. раствором серной кислоты, контролируя рН-метром.

Нейтрализованный раствор 4 раза экстрагируют хлороформом (100, 50, 50, 50 мл). Сушат над сернокислым натрием, отгоняют хлороформ, а остаток переносят в колбу емкостью 100 мл, тщательно смывая стенки колбы, в которой производилась отгонка, хлороформом (20, 10, 10 мл). Хлороформ упаривают досуха.

Приливают в колбу 5 мл серной кислоты (1:1 по объему) и выдерживают 2 ч на металлической бане при 140°С с обратным холодильником. (Шлифы колбы и холодильника должны быть тщательно подогнаны!) К охлажденному раствору приливают 5 мл воды, охлаждают до 20°С и прибавляют 0,1 мл 5%-ного раствора азотистокислого натрия. Выдерживают 15 мин. Прибавляют 0,1 мл 10%-ного раствора сульфаминовой кислоты, встряхивают и приливают 1 мл 1%-ного раствора диметиланилина в 10%-ной серной кислоте. Выдерживают 30 мин при 20°С.

Разбавляют раствор этанолом и переносят в мерную колбу объемом 25 мл, доливают этанолом до метки. При наличии гатнона раствор окрашивается в фиолетовый цвет. Измерение оптической плотности производят через 5—10 мин при длине волны 595 нм или фотоколориметрируют с оранжевым светофильтром в кювете толщиной 10 мм. В качестве раствора сравнения используют холостую пробу на не обработанный гатноном объект, подвергнутую тем же операциям, что и рабочая проба. Если анализируемый раствор получается мутным, его перед определением фильтруют через бумажный складчатый фильтр.

Экстракция и очистка экстракта из воды. При определении гатнона в воде производят экстракцию из 100 мл воды хлороформом 4 раза (200, 100, 100, 100 мл). Сушат хлороформный экстракт над сернокислым натрием, фильтруют через складчатый фильтр и упаривают на ротационном испарителе. Остаток переносят в колбу объемом 100 мл, споласкивают стенки колбы для отгонки хлороформом (20, 10, 10 мл). Хлороформ упаривают досуха, в колбу вносят 5 мл серной кислоты (1:1) и проводят гидролиз, диазотирова-ние, азосочетание, как описано для растительной пробы. Количество гатнона в пробе определяют по градуировочному графику.

Обработка результатов анализа. Расчет количества гатнона (X, мг/кг) производят по формуле:

где А — количество гатнона, найденное по градуировочному графику, мг; Р — масса анализируемой пробы, кг.

Отбор проб растительного материала на корню

1

Методические указания разработаны В. Е. Кириченко, К. И. Пашкевичем, И. Я. Постовским (Институт химии Уральского научного центра АН СССР).

131